小鼠体内着色条带物质构筑的初步观察分析
【摘要】 目的 观察分析小鼠体内着色条带的物质构筑。方法 采用新型示踪染色液，在小鼠活体内进行离子电泳后，对其着色条带立即镜检，并制成切片，作HE染色镜检分析。结果 着色条带的物质是由成带状集聚的脂肪细胞相连而成。结论 小鼠体内着色条带的物质构筑是脂肪细胞。
关键词 经络实质 针灸 脂肪细胞 连接蛋白 内分泌
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2003)22-3050-02
Primary observation and analysis on the substance that
builds up the pigmentized strips in the body of the mouse
Meng Fanxun，Jing Rongfan，Sun Yong，etal.
, 百拇医药
Nantong Medical College，Jiangsu226001.
【Abstract】 Objective To observation and analyze the substance that builds up the pigmentized strips in the body of the mouse.Methods Immediately after a hydronium eletrophoresis using a newtype of tracing dye solution in the body of the mouse，microscopic examination is carried out on the pigmentized strips，whichare also made into secˉtions and analyzed with HE dye microscopic examination.Results The substance that builds up the pigmentized strips are formed by adipose cells that connect to each other in strips.Conclusion The substance that builds up pigmenˉtized strips in the body of the mouse is from adipose cell.
, 百拇医药
Key words substance of channels and collaterals acupuncture adipose cell connecting protein incretion
探明经络的物质基础是研究经络实质的关键所在，多年来众多国内外研究者从不同的角度运用各种技术手段和方法进行了深入研究，但一直未出现通行部位确切、物质构筑明确的研究结果。我们按照经络实质是“蛋白桥接”工作假说的新理念，运用体内器官组织之间离子电泳技术，在小鼠活体内显示出与传统经络线位置相近的部分着色条带。本研究就是对这些着色条带的物质构筑进行初步的观察分析，得到了目前国内外经络研究领域尚无报道的新的实验结果，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 新型示踪染色液 研究者自行研制的特殊染色液 [1] 。
, 百拇医药 1.2 ICR小鼠 (30±5)g/只，清洁级，雌雄不拘。由南通医学院实验动物中心提供，生产许可证:SCXK(苏)2003-0002;使用许可证:SCXK(苏)2002-0002。
1.3 实验方法 在戊巴比妥钠腹腔常规麻醉下(40mg/kg)，用鞋绳线固定四肢，将正负极导入电极头分别插入小鼠皮下(相当于任脉线上的关元—华盖穴，或者相当于肾经线上的大赫—神封穴)，注意正负电极极性，并用胶条适当固定防止脱落。在靠近负极导入电极头处皮下注射孟氏示踪染液0.05ml左右，输入直流电，11～12V/2mA，经过40min后，再调高至20V/5mA，20min后切断电源，处死小鼠，解剖取材，镜下观察分析。并制冰冻切片，HE染色，对脂肪细胞进行鉴别观察分析。并取小鼠皮下脂肪细胞在镜下与着色条带上的细胞直接对照观察，摄像记录。
2 结果
2.1 着色条带 是由成带状集聚的脂肪细胞附着示踪染液离子而形成的，见图1。
, http://www.100md.com
2.2 小鼠肠系膜上着色条带的物质背景 见图2。
2.3 小鼠皮下脂肪细胞对照 见图3。
2.4 条带组织切片HE染色 见图4。图1-1图1-2
3 讨论
着色条带的物质构筑是由相连不断的脂肪细胞所组图2图3图4成，这个实验结果的确出乎研究者的预料 [2] 。虽然相当于络脉着色条带还需要与血管和淋巴管进行进一步的实验鉴别，也不排除经脉和络脉的物质构筑有不同的可能，但我们所观察到的相当于络脉的着色条带都是和脂肪细胞密不可分的。尽管我们已有的实验研究还不能断定这就是经络的物质基础，但凭借实验结果的启示，很有必要结合经络循经感传、针灸和针麻的临床特点，对脂肪细胞进行新的认识和探讨。
脂肪组织不但能贮存能量，而且从重量上讲也是体内最大的内分泌器官，脂肪细胞可因受外界刺激(物理性、化学性)，能旺盛地分泌多种因子(激素)，如瘦素、肿瘤坏死因子、解偶联蛋白、抵抗素、脂联素、IL-6、游离脂肪酸等数十种，而且还在不断的报道有新的因子发现。受外来刺激的脂肪细胞不仅自身分泌细胞因子，同时向全身相关器官发送信号，参与机体的代谢调节 [3～8] 。
, 百拇医药
连接蛋白是26～56kD的蛋白家族，存在于所有组织中，脂肪细胞有可能在连接蛋白作用下集聚相连，共同发挥传送刺激信号、运送小分子或离子物质的作用 [9，10] 。
由此分析，体内通路丰富的脂肪细胞条带受到刺激信号后，一方面自身循线释放脂肪细胞因子(激素)，同时向另外的器官组织传递信息，使其它相关的内分泌器官参与神经体液调节，共同维持机体代谢功能整体性的动态平衡。 以此解释经络在循经感传中、针灸针麻的临床实践中所特有的相关现象就有了科学的依据。如多年来对穴位给药、针刺信号，引起靶器官(组织)产生效应，一直是两端观察还算清楚，而中间途径也就是经络循经传递的路径和作用机理就谁也说不清了，而据相关资料分析，脂肪细胞已被确认的部分作用就正好与之相适应。再如对于针刺时深浅横斜等多种进针方向和各种手法的运用，基本原理何在?没有公认的具有实验依据的解释，只好搁置争议，肯定实际价值，使中医针灸理论一直处于一种只能言传意会、查无依据、极其模糊难辨的状态中。
, 百拇医药
我们现在分析认为，这有可能是在向不同的脂肪细胞条带输送强弱不等的刺激信号，引发相关的条带上脂肪细胞分泌细胞因子参与调节，并循脂肪细胞条带向不同的组织器官传递信号，引起更大范围的关联反应，这有可能就是针刺效应产生的物质基础所在。我们观察到，脂肪细胞条带在体内广泛分布，其中有相当部分的脂肪条带簇拥着血管延伸，有资料表明，其分泌的细胞因子对心血管能产生不同的作用 [11～13] 。而我们更能从中获得的感受是，古人对经络作用的概括:“行气血，营阴阳”、“决生死，处百病”、“内属腑脏，外络肢节”等，确有博大精深的内涵，这正需要我们不断地用现代科学技术手段探究其实质、阐明其作用机理。
经络实质三要素包括经络组织结构、经络作用通路、经络效应表现，对着色条带物质构筑———脂肪细胞的认识，只是对疑拟经络的组织结构和作用通路有了粗浅的了解，关键是要观察其效应表现。在脂肪细胞条带上验证相关的经络效应，这是一个蕴含重大突破机遇的新的研究视野，有可能离破译经络实质这个“千古之谜”为期不远了。
, 百拇医药
参考文献
1 孟凡迅.在小鼠活体内显示着色条带的实验研究.(待发表)
2 孟凡迅.从感觉神经特异蛋白29kD的分子生物学特性探讨经络实质及作用机理.中国针灸，2001，21(2):87-88.
3 张洪德.脂肪细胞激素和细胞因子在能量平衡调节中的作用.国外医学分子生物学分册，1999，21(4):252-254.
4 林玲.大鼠脂肪细胞TSH受体机能的研究.中国病理生理杂志，1999，15(10):941-943.
5 卢盛华.人与大鼠皮下脂肪细胞分解的受体调节差异研究.山东医科大学学报，1999，37(3):187-189.
6 沣春水，等.新发现的脂肪细胞分泌的激素—抵抗素.国外医学生理、病理科学与临床分册，2003，23(1):5-8.
, 百拇医药
7 门胁孝.脂肪细胞之基础与临床研究最近动向.日本医学介绍，1998，19(11):514.
8 张森，等.脂连素研究进展.国外医学内科学分册，2002，29(10):415-417.
9 王立民.连接蛋白生物学意义的探讨.哈尔滨医科大学学报，1992，26(4):318-322.
10 邱国松.连接蛋白及细胞间连接通讯的调控.国外医学分子生物学分册，1999，21(3):144-146.
11 白雪松.连接蛋白43、细胞连接通讯与心血管疾病.中国动脉硬化杂志，1996，4(4):294-296.
12 廖德祥.连接蛋白43的临床研究进展.医学综述，2003，9(2):76-77.
13 邱国松.连接蛋白、缝隙连接的结构功能及其与心血管疾病.心血管病学进展，2000，21(3):172-174.
作者单位:226001江苏南通医学院生物技术系实验室
226400南通医学院附属海安医院
(编辑李 木), 百拇医药(孟凡迅 景荣芳 孙永 何江虹)
关键词 经络实质 针灸 脂肪细胞 连接蛋白 内分泌
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2003)22-3050-02
Primary observation and analysis on the substance that
builds up the pigmentized strips in the body of the mouse
Meng Fanxun，Jing Rongfan，Sun Yong，etal.
, 百拇医药
Nantong Medical College，Jiangsu226001.
【Abstract】 Objective To observation and analyze the substance that builds up the pigmentized strips in the body of the mouse.Methods Immediately after a hydronium eletrophoresis using a newtype of tracing dye solution in the body of the mouse，microscopic examination is carried out on the pigmentized strips，whichare also made into secˉtions and analyzed with HE dye microscopic examination.Results The substance that builds up the pigmentized strips are formed by adipose cells that connect to each other in strips.Conclusion The substance that builds up pigmenˉtized strips in the body of the mouse is from adipose cell.
, 百拇医药
Key words substance of channels and collaterals acupuncture adipose cell connecting protein incretion
探明经络的物质基础是研究经络实质的关键所在，多年来众多国内外研究者从不同的角度运用各种技术手段和方法进行了深入研究，但一直未出现通行部位确切、物质构筑明确的研究结果。我们按照经络实质是“蛋白桥接”工作假说的新理念，运用体内器官组织之间离子电泳技术，在小鼠活体内显示出与传统经络线位置相近的部分着色条带。本研究就是对这些着色条带的物质构筑进行初步的观察分析，得到了目前国内外经络研究领域尚无报道的新的实验结果，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 新型示踪染色液 研究者自行研制的特殊染色液 [1] 。
, 百拇医药 1.2 ICR小鼠 (30±5)g/只，清洁级，雌雄不拘。由南通医学院实验动物中心提供，生产许可证:SCXK(苏)2003-0002;使用许可证:SCXK(苏)2002-0002。
1.3 实验方法 在戊巴比妥钠腹腔常规麻醉下(40mg/kg)，用鞋绳线固定四肢，将正负极导入电极头分别插入小鼠皮下(相当于任脉线上的关元—华盖穴，或者相当于肾经线上的大赫—神封穴)，注意正负电极极性，并用胶条适当固定防止脱落。在靠近负极导入电极头处皮下注射孟氏示踪染液0.05ml左右，输入直流电，11～12V/2mA，经过40min后，再调高至20V/5mA，20min后切断电源，处死小鼠，解剖取材，镜下观察分析。并制冰冻切片，HE染色，对脂肪细胞进行鉴别观察分析。并取小鼠皮下脂肪细胞在镜下与着色条带上的细胞直接对照观察，摄像记录。
2 结果
2.1 着色条带 是由成带状集聚的脂肪细胞附着示踪染液离子而形成的，见图1。
, http://www.100md.com
2.2 小鼠肠系膜上着色条带的物质背景 见图2。
2.3 小鼠皮下脂肪细胞对照 见图3。
2.4 条带组织切片HE染色 见图4。图1-1图1-2
3 讨论
着色条带的物质构筑是由相连不断的脂肪细胞所组图2图3图4成，这个实验结果的确出乎研究者的预料 [2] 。虽然相当于络脉着色条带还需要与血管和淋巴管进行进一步的实验鉴别，也不排除经脉和络脉的物质构筑有不同的可能，但我们所观察到的相当于络脉的着色条带都是和脂肪细胞密不可分的。尽管我们已有的实验研究还不能断定这就是经络的物质基础，但凭借实验结果的启示，很有必要结合经络循经感传、针灸和针麻的临床特点，对脂肪细胞进行新的认识和探讨。
脂肪组织不但能贮存能量，而且从重量上讲也是体内最大的内分泌器官，脂肪细胞可因受外界刺激(物理性、化学性)，能旺盛地分泌多种因子(激素)，如瘦素、肿瘤坏死因子、解偶联蛋白、抵抗素、脂联素、IL-6、游离脂肪酸等数十种，而且还在不断的报道有新的因子发现。受外来刺激的脂肪细胞不仅自身分泌细胞因子，同时向全身相关器官发送信号，参与机体的代谢调节 [3～8] 。
, 百拇医药
连接蛋白是26～56kD的蛋白家族，存在于所有组织中，脂肪细胞有可能在连接蛋白作用下集聚相连，共同发挥传送刺激信号、运送小分子或离子物质的作用 [9，10] 。
由此分析，体内通路丰富的脂肪细胞条带受到刺激信号后，一方面自身循线释放脂肪细胞因子(激素)，同时向另外的器官组织传递信息，使其它相关的内分泌器官参与神经体液调节，共同维持机体代谢功能整体性的动态平衡。 以此解释经络在循经感传中、针灸针麻的临床实践中所特有的相关现象就有了科学的依据。如多年来对穴位给药、针刺信号，引起靶器官(组织)产生效应，一直是两端观察还算清楚，而中间途径也就是经络循经传递的路径和作用机理就谁也说不清了，而据相关资料分析，脂肪细胞已被确认的部分作用就正好与之相适应。再如对于针刺时深浅横斜等多种进针方向和各种手法的运用，基本原理何在?没有公认的具有实验依据的解释，只好搁置争议，肯定实际价值，使中医针灸理论一直处于一种只能言传意会、查无依据、极其模糊难辨的状态中。
, 百拇医药
我们现在分析认为，这有可能是在向不同的脂肪细胞条带输送强弱不等的刺激信号，引发相关的条带上脂肪细胞分泌细胞因子参与调节，并循脂肪细胞条带向不同的组织器官传递信号，引起更大范围的关联反应，这有可能就是针刺效应产生的物质基础所在。我们观察到，脂肪细胞条带在体内广泛分布，其中有相当部分的脂肪条带簇拥着血管延伸，有资料表明，其分泌的细胞因子对心血管能产生不同的作用 [11～13] 。而我们更能从中获得的感受是，古人对经络作用的概括:“行气血，营阴阳”、“决生死，处百病”、“内属腑脏，外络肢节”等，确有博大精深的内涵，这正需要我们不断地用现代科学技术手段探究其实质、阐明其作用机理。
经络实质三要素包括经络组织结构、经络作用通路、经络效应表现，对着色条带物质构筑———脂肪细胞的认识，只是对疑拟经络的组织结构和作用通路有了粗浅的了解，关键是要观察其效应表现。在脂肪细胞条带上验证相关的经络效应，这是一个蕴含重大突破机遇的新的研究视野，有可能离破译经络实质这个“千古之谜”为期不远了。
, 百拇医药
参考文献
1 孟凡迅.在小鼠活体内显示着色条带的实验研究.(待发表)
2 孟凡迅.从感觉神经特异蛋白29kD的分子生物学特性探讨经络实质及作用机理.中国针灸，2001，21(2):87-88.
3 张洪德.脂肪细胞激素和细胞因子在能量平衡调节中的作用.国外医学分子生物学分册，1999，21(4):252-254.
4 林玲.大鼠脂肪细胞TSH受体机能的研究.中国病理生理杂志，1999，15(10):941-943.
5 卢盛华.人与大鼠皮下脂肪细胞分解的受体调节差异研究.山东医科大学学报，1999，37(3):187-189.
6 沣春水，等.新发现的脂肪细胞分泌的激素—抵抗素.国外医学生理、病理科学与临床分册，2003，23(1):5-8.
, 百拇医药
7 门胁孝.脂肪细胞之基础与临床研究最近动向.日本医学介绍，1998，19(11):514.
8 张森，等.脂连素研究进展.国外医学内科学分册，2002，29(10):415-417.
9 王立民.连接蛋白生物学意义的探讨.哈尔滨医科大学学报，1992，26(4):318-322.
10 邱国松.连接蛋白及细胞间连接通讯的调控.国外医学分子生物学分册，1999，21(3):144-146.
11 白雪松.连接蛋白43、细胞连接通讯与心血管疾病.中国动脉硬化杂志，1996，4(4):294-296.
12 廖德祥.连接蛋白43的临床研究进展.医学综述，2003，9(2):76-77.
13 邱国松.连接蛋白、缝隙连接的结构功能及其与心血管疾病.心血管病学进展，2000，21(3):172-174.
作者单位:226001江苏南通医学院生物技术系实验室
226400南通医学院附属海安医院
(编辑李 木), 百拇医药(孟凡迅 景荣芳 孙永 何江虹)