二妙散三种汤剂的煎出率比较实验
【摘要】 目的 研究二妙散生药袋包颗粒饮片、免煎颗粒饮片及其饮片汤剂的煎出率、盐酸小檗碱的含量，优选出二妙散袋包颗粒饮片汤剂的最佳工艺。方法 采用正交实验计算煎出率，再用薄层层析—紫外分光光度法测定浸膏中的盐酸小檗碱的含量。结果 优选出二妙散生药袋包颗粒饮片的最佳工艺即粒度30目，加水量为药材的10倍，煎煮3次，每次25min。生药袋颗粒汤剂的煎出率是饮片的1.37倍，免煎颗粒的1.57倍;其盐酸小檗碱的含量是饮片的1.24倍，免煎颗粒的1.56倍。结论 二妙散生药袋包颗粒汤剂用来替代饮片汤剂，方法可行，可节省大量的药材，值得推广应用。
关键词 二妙散生药袋包颗粒 薄层层析—紫外分光光度法 盐酸小檗碱 正交试验
【文献标识码】 B 【文章编号】 1609-6614(2003)10-0938-02
中药汤剂是现代中药剂型中用量最大，其优点是适应中医辨证施治，随症加减的原则，缺点是服用不方便，有效成分煎出率低，剂量大，浪费药材等 [1] 。笔者对成方二妙散(黄柏、苍术)生药袋包颗粒汤剂最佳工艺进行了研究，并与饮片、免煎颗粒汤剂作比较，获得满意结果。现报告如下。
, 百拇医药
1 药品与仪器
1.1 药品 黄柏、苍术药材由本院中药房提供(上海药品检验所鉴定)，免煎颗粒购自江阴天江药业公司。
1.2 试剂 盐酸小檗碱对照品购自中国药品生物制品检定所;硫酸;盐酸;无水甲醇;无水乙醇均为分析纯;硅胶G为青岛海洋化工有限公司制造。
1.3 仪器 752C紫外分光光度计(上海第三分析仪器厂);SC202-1电热恒温干燥箱(南通沪通制药机械厂);TG328B型分析天平(上海天平仪器厂);AE240电子分析天平(梅特勒—托利多上海有限公司);ZF-I型三用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂)。
2 二妙散生药袋包颗粒工艺条件的优选
2.1 正交试验的设计因素水平 见表1。
, 百拇医药
表1 L 9 (3 4 )因素水平(略)
2.2 二妙散生药袋包颗粒的制备 将干燥的黄柏，苍术药材粉碎过5目、20目、30目筛，精密称重，每袋15g，封口、待用。
2.3 工艺条件的优选 煎出率的测定，分别取不同粒度的二妙散生药袋包颗粒各一袋，加水浸泡15min，按正交试验进行，煎煮后，滤取滤液，先用直火浓缩至一定体积，后置于已恒重的蒸发皿中，在水浴锅浓缩至干，于恒温干燥箱中105℃干燥至恒重，计算煎出率，见表2。
2.4 含量测定 [2]
2.4.1 标准曲线的制备 精密称取盐酸小檗碱对照品1.25mg，置于25ml的容量瓶中，加入0.05MH 2 SO 4 溶解至刻度，摇匀。精密吸取此液0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml分别置于10ml的容量瓶中各加入0.05M硫酸溶解至刻度，以0.05M H 2 SO 4 为空白对照在345±1nm波长处测得吸收度，经处理得回归方程A=0.0642C+0.0033，r=0.9998，线性范围为0.086～40978μg/ml。
, 百拇医药
2.4.2 样品液制备 精密称取浸膏粉1g，置于50ml索氏提取器中，加乙醚适量，在水浴锅上回流1～2h，弃去乙醚，再加甲醇适量回流提取至提取液无色，合并洗液，浓缩至15ml左右移入50ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。吸取25ml在锥形瓶中浓缩至干，再用2.5ml甲醇溶解。
2.4.3 样品液的测定 吸取2.4.2项的溶液4μl与0.6mg/ml标准品液点于薄层板上，并用展开剂(苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-氨水12∶6∶3∶3∶1)。展开，在紫外分析仪上365nm±1波长处测定，圈出与标准品相同的斑点，取斑点部位的硅胶，用0.05M H 2 SO 4 洗脱，用10ml的容量瓶收集，并稀释至刻度，在345±1nm波长处测得吸收度，结果见表2。
表2 正交试验及实验结果 (略)
2.4.4 对煎出率进行直观分析结果表明:各因素的影响大小为D>A>B>C，最佳工艺为A3B2C1D3;对盐酸小檗碱含量进行分析，结果表明:各因素主次为C>A>D>B，最佳工艺为A3B2C2D3。综合比较:加水倍数B1，B2对煎出率和盐酸小檗碱含量影响不明显，最佳工艺为A3B1C2D3即粒度为30目，加10倍水，煎煮3次，每次25min。
, 百拇医药
3 二妙散生药袋包颗粒与饮片汤剂、免煎颗粒剂的煎出率和盐酸小檗碱的含量的对比试验
3.1 煎出率的比较 [3] 称取黄柏，苍术(30)目袋包颗粒饮片各15g，在最佳工艺条件下煎煮，得滤液，然后同2.3项方法得浸膏，取免煎颗粒黄柏相当于原饮片15g，苍术相当于原饮片15g，直接溶于300ml的水中，煎煮25min后过滤，将滤液蒸干，于烘箱中至恒重得浸膏，见表3。
由表3得，二妙散生药袋包颗粒的煎出率是饮片的1.37倍，是免煎颗粒的1.57倍。
3.2 盐酸小檗碱含量比较 [4] 9份浸膏各称取1g，按2.4 项方法测得含量，见表4。
表3 二妙散袋包颗粒、饮片、免煎颗粒汤剂煎出率比较(略)
表4 二妙散袋包颗粒、饮片、免煎颗粒汤剂中盐酸小檗碱含量比较(略)
, http://www.100md.com
由表4得，二妙散生药袋包颗粒中盐酸小檗碱含量是饮片的1.24倍，是免煎颗粒的1.56倍。
3.3 加样回收实验 精密称取已知含量的浸膏粉，加入一定量的对照品，按样品测定方法操作，见表5。
表5 加样回收结果(略)
4 讨论
正交试验结果表明:二妙散生药袋包颗粒的最佳工艺为30目，加水10倍，煎煮3次，每次25min。通过比较二妙散制成袋包颗粒后，其煎出率，盐酸小檗碱含量比饮片和免煎颗粒要高，替代饮片汤剂有较大价值。本次只考察了二妙散中黄柏的盐酸小檗碱含量，其它成分尚待今后研究。
参考文献
1 董占军，何洪林，李桔，等.包布免煎法改进中药汤剂的可行性和优越性.中国药，1996，7(1):48.
2 阚毓铭，南轸.中药制剂分析，南京:江苏科技出版社，1991，258.
3 丁青龙，王云征.黄柏生药袋包颗粒与饮片及免煎颗粒汤剂的对比研究.河北中西医结合杂志，1999，8(6):870.
4 中华人民共和国药典委员会编.中华人民共和国药典(一部)2000版，北京:化学工业出版社，附录18.
作者单位:200052上海解放军第85医院
(编辑 晓亮), 百拇医药(黄晓瑾)
关键词 二妙散生药袋包颗粒 薄层层析—紫外分光光度法 盐酸小檗碱 正交试验
【文献标识码】 B 【文章编号】 1609-6614(2003)10-0938-02
中药汤剂是现代中药剂型中用量最大，其优点是适应中医辨证施治，随症加减的原则，缺点是服用不方便，有效成分煎出率低，剂量大，浪费药材等 [1] 。笔者对成方二妙散(黄柏、苍术)生药袋包颗粒汤剂最佳工艺进行了研究，并与饮片、免煎颗粒汤剂作比较，获得满意结果。现报告如下。
, 百拇医药
1 药品与仪器
1.1 药品 黄柏、苍术药材由本院中药房提供(上海药品检验所鉴定)，免煎颗粒购自江阴天江药业公司。
1.2 试剂 盐酸小檗碱对照品购自中国药品生物制品检定所;硫酸;盐酸;无水甲醇;无水乙醇均为分析纯;硅胶G为青岛海洋化工有限公司制造。
1.3 仪器 752C紫外分光光度计(上海第三分析仪器厂);SC202-1电热恒温干燥箱(南通沪通制药机械厂);TG328B型分析天平(上海天平仪器厂);AE240电子分析天平(梅特勒—托利多上海有限公司);ZF-I型三用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂)。
2 二妙散生药袋包颗粒工艺条件的优选
2.1 正交试验的设计因素水平 见表1。
, 百拇医药
表1 L 9 (3 4 )因素水平(略)
2.2 二妙散生药袋包颗粒的制备 将干燥的黄柏，苍术药材粉碎过5目、20目、30目筛，精密称重，每袋15g，封口、待用。
2.3 工艺条件的优选 煎出率的测定，分别取不同粒度的二妙散生药袋包颗粒各一袋，加水浸泡15min，按正交试验进行，煎煮后，滤取滤液，先用直火浓缩至一定体积，后置于已恒重的蒸发皿中，在水浴锅浓缩至干，于恒温干燥箱中105℃干燥至恒重，计算煎出率，见表2。
2.4 含量测定 [2]
2.4.1 标准曲线的制备 精密称取盐酸小檗碱对照品1.25mg，置于25ml的容量瓶中，加入0.05MH 2 SO 4 溶解至刻度，摇匀。精密吸取此液0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml分别置于10ml的容量瓶中各加入0.05M硫酸溶解至刻度，以0.05M H 2 SO 4 为空白对照在345±1nm波长处测得吸收度，经处理得回归方程A=0.0642C+0.0033，r=0.9998，线性范围为0.086～40978μg/ml。
, 百拇医药
2.4.2 样品液制备 精密称取浸膏粉1g，置于50ml索氏提取器中，加乙醚适量，在水浴锅上回流1～2h，弃去乙醚，再加甲醇适量回流提取至提取液无色，合并洗液，浓缩至15ml左右移入50ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。吸取25ml在锥形瓶中浓缩至干，再用2.5ml甲醇溶解。
2.4.3 样品液的测定 吸取2.4.2项的溶液4μl与0.6mg/ml标准品液点于薄层板上，并用展开剂(苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-氨水12∶6∶3∶3∶1)。展开，在紫外分析仪上365nm±1波长处测定，圈出与标准品相同的斑点，取斑点部位的硅胶，用0.05M H 2 SO 4 洗脱，用10ml的容量瓶收集，并稀释至刻度，在345±1nm波长处测得吸收度，结果见表2。
表2 正交试验及实验结果 (略)
2.4.4 对煎出率进行直观分析结果表明:各因素的影响大小为D>A>B>C，最佳工艺为A3B2C1D3;对盐酸小檗碱含量进行分析，结果表明:各因素主次为C>A>D>B，最佳工艺为A3B2C2D3。综合比较:加水倍数B1，B2对煎出率和盐酸小檗碱含量影响不明显，最佳工艺为A3B1C2D3即粒度为30目，加10倍水，煎煮3次，每次25min。
, 百拇医药
3 二妙散生药袋包颗粒与饮片汤剂、免煎颗粒剂的煎出率和盐酸小檗碱的含量的对比试验
3.1 煎出率的比较 [3] 称取黄柏，苍术(30)目袋包颗粒饮片各15g，在最佳工艺条件下煎煮，得滤液，然后同2.3项方法得浸膏，取免煎颗粒黄柏相当于原饮片15g，苍术相当于原饮片15g，直接溶于300ml的水中，煎煮25min后过滤，将滤液蒸干，于烘箱中至恒重得浸膏，见表3。
由表3得，二妙散生药袋包颗粒的煎出率是饮片的1.37倍，是免煎颗粒的1.57倍。
3.2 盐酸小檗碱含量比较 [4] 9份浸膏各称取1g，按2.4 项方法测得含量，见表4。
表3 二妙散袋包颗粒、饮片、免煎颗粒汤剂煎出率比较(略)
表4 二妙散袋包颗粒、饮片、免煎颗粒汤剂中盐酸小檗碱含量比较(略)
, http://www.100md.com
由表4得，二妙散生药袋包颗粒中盐酸小檗碱含量是饮片的1.24倍，是免煎颗粒的1.56倍。
3.3 加样回收实验 精密称取已知含量的浸膏粉，加入一定量的对照品，按样品测定方法操作，见表5。
表5 加样回收结果(略)
4 讨论
正交试验结果表明:二妙散生药袋包颗粒的最佳工艺为30目，加水10倍，煎煮3次，每次25min。通过比较二妙散制成袋包颗粒后，其煎出率，盐酸小檗碱含量比饮片和免煎颗粒要高，替代饮片汤剂有较大价值。本次只考察了二妙散中黄柏的盐酸小檗碱含量，其它成分尚待今后研究。
参考文献
1 董占军，何洪林，李桔，等.包布免煎法改进中药汤剂的可行性和优越性.中国药，1996，7(1):48.
2 阚毓铭，南轸.中药制剂分析，南京:江苏科技出版社，1991，258.
3 丁青龙，王云征.黄柏生药袋包颗粒与饮片及免煎颗粒汤剂的对比研究.河北中西医结合杂志，1999，8(6):870.
4 中华人民共和国药典委员会编.中华人民共和国药典(一部)2000版，北京:化学工业出版社，附录18.
作者单位:200052上海解放军第85医院
(编辑 晓亮), 百拇医药(黄晓瑾)