苯那普利和非洛地平对原发性高血压患者TGF-β1、Bcl-2浓度的影响及临床意义的探讨
【摘要】 目的 研究原发性高血压患者(EH)血清中转化生长因子β1(TGF-β1)、Bcl-2的浓度及在苯那普利和非洛地平对其治疗前后浓度的变化及临床意义。方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定60例EH患者分别服用苯那普利、非洛地平前后血清Bcl-2、TGF-β1浓度，并与30例健康人对照。结果 与健康对照组相比，所有EH患者的TGF-β1、Bcl-2浓度均增高(P<0.01)，应用降压药物苯那普利及非洛地平治疗10天，两者降压作用相似，且均能使TGF-β1和Bcl-2浓度下降，但苯那普利使这两种蛋白浓度改变更明显。结论 Bcl-2、TGF-β1可能介导血管增生、重塑及部分通过凋亡参与原发性高血压发生、发展的病理过程。Benazepril在其中起到更有益的作用。
关键词 原发性高血压 转化生长因子β1 Bcl-2 苯那普利 非洛地平 凋亡
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2003)06-0832-03
, http://www.100md.com
The clinical significance and altered TGF-β1、Bcl-2concentration in
hypertension patients after Benazepril and felodipine administration
Wang Qi，Shan Haiyan，Zhang Lili
The Center Hospital of Fushun，Liaoning113006.
【Abstract】 Objective To study the altered blood concentration of TGF-β1、Bcl-2and the clinic signifiˉcance in patients with EH after Benazepril and Felodipine administration.Methods Blood concentration of TGF-β1and Bcl-2were measured in60patients with EH by ELISA before and after Benazepril and Felodipine admi
, 百拇医药
nistraˉtion，and were compared with30members of a healthy control group.Results TGF-β1and Bcl-2concentration were higher in hypertension than normotensive subject(P<0.01);Treatment of hypertensive patients with antihyperˉtensive drugs caused a reduction in TGF-β1and Bcl-2concentration，which was marked after admin
istration of Beˉnazepril than Felodipine despite of the similar antihypertension effect.Conclusion Increased TGF-β1and Bcl-2concentration in EH patients may contribute to the pathogesis of the disease through the vascular remodeling，hypertroˉphy and partly apoptosis，Benazepril has greatly benefit in vascular archi
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tecture.
Key words essential hypertension transforming growth factor-β1 Bcl-2 benazepril felodipine apopˉtosis
近年来，随着对原发性高血压研究的逐渐深入，部分相关内容已达到细胞及分子水平。越来越多的证据表明，凋亡的不足可能在原发性高血压(EH)的病理起重要作用 [1] ，而抗高血压药物可引起血管肥厚逆转的同时伴有凋亡的增加 [2] 。因为转化生长因子β1(TGF-β1)、Bcl-2都在血管平滑肌细胞(SMCs)中表达，而这两种蛋白表达可通过血清中Bcl-2、TGF-β1的浓度表现出来。本文旨在观察正常人和EH患者血清中Bcl-2、TGF-β1的浓度，以及苯那普利和非洛地平对其的影响。
1 对象与方法
, 百拇医药
1.1 研究对象 原发性高血压(EH)组:60例均为2002年1月～2003年1月入院患者、经病史、体检、有关临床及实验室检查，排除继发性高血压、内分泌和代谢疾病、严重心脑血管并发症、肝肾功能障碍、血液系统疾病及严重烟酒嗜好者。EH标准参照1999年中国高血压防治指南标准，入选病人未经治疗，如已经治疗则停用一切降压药物5个半衰期以上。正常对照组:为30例健康自愿者。
1.2 方法
1.2.1 给药方法 将EH患者随机分为2组，每组30例，分别给予苯那普利(血管紧张素转换酶抑制剂，商品名洛丁新，北京诺华制药有限公司)10mg(苯那普利组)及非洛地平(钙通道阻滞剂，商品名波依定，阿斯特拉制药有限公司产品)5mg(非洛地平组)，于晨6h服药，连续服药10d，于服药后第5日如血压无下降，加用双氢克尿噻25mg，日1次口服。对照组无服药。
1.2.2 观察指标
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1.2.2.1 血压测定 EH患者于服药前一天及服药期间每日晨8h测量坐位血压，在安静休息10min后进行，使用袖带汞柱式血压计测量坐位右上臂血压，取korothoff第Ⅰ音及第Ⅳ音为收缩压和舒张压，测量3次，各间隔2min，取平均值，由专人负责。
1.2.2.2 TGF-β1、Bcl-2检测 EH患者于服药前1天及服药第10天晨起抽取空腹肘静脉血2ml，立即离心(2000r/min×10min)，分离血清，-20℃下储存待测。测定采用酶联免疫吸附法(ELISA)，按说明书操作。TGF-β1试剂盒由深圳晶美实业有限公司提供，Bcl-2试剂盒由福州迈新生物技术有限公司提供。
1.3 统计学处理 组内、组间各数据t检验，以四格表确切概率法进行统计学处理。P<0.05为差异有显著性。
2 结果
2.1 两组患者基本情况比较 苯那普利和非洛地平组在年龄、性别、高血压病史、体重指数、基本收缩压、基本舒张压、心率无差异(P>0.05)，见表1。
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表1 两组患者的基本情况比较 (略)
2.2 血压变化 两组血压在用药后均明显下降(P<0.001)，且两组血压下降程度无差异。苯那普利组加用双氢克尿噻3例占15%，非洛地平组加用双氢克尿噻5例占20%，两组比较差异无显著性，见表2。
表2 两组用药前后血压变化 (略)
2.3 TGF-β1与Bcl-2浓度 EH患者血清TGF-β1、Bcl-2浓度较正常血压者明显升高(Bcl-2:98.71±16.43vs65.3±16.0，P<0.001;TGF-β1:82.51±3.60vs42.12±24.57，P<0.001)。应用药物前两组间TGF-β1、Bcl-2浓度无差异(P>0.05)，应用两组降压药物后Benazepril组P<0.001，Felodipine组P<0.01(见表3)。
表3 两组用药前后Bcl-2(U/ml)、TGF-β1(ng/ml)浓度变化 (略)
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3 讨论
本文结果显示EH患者血清TGF-β1、Bcl-2的浓度在抗高血压药物干预后，所有EH患者水平均增高(P<0.01)，应用ACE-Ⅰ类TGF-β1和Bcl-2浓度较应用钙离子阻滞剂明显下降。故推测TGF-β1、Bcl-2有可能通过血管增生，重塑及部分通过抑制凋亡参与EH发生、发展病理 过程。TGF-β1是近年来发现与细胞凋亡密切相关细胞内源性因子 [3] ，TGF-β1分子为二聚体，由二硫链相连接，分子量为25kD，属于表皮生长抑制因子，是参与各种器官分化和退化的蛋白家族成员之一 [4] 。TGF-β1对VSMc有促进增殖，抑制凋亡及促进胶原合成作用 [5，6] 。Bary等 [7] 通过细胞培养发现在自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌中TGF-β1表达增高，这与我们在人血清中观察结果是一致的。TGF-β1通过TGF-β族配体→配受体→MAD(增强子，mother against dpp的基因产物)类蛋白→转录因子→基因表达等步骤来控制不同细胞生长分化和凋亡，以表现不同生物效应。
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Bcl-2是第一个被确认有抑制凋亡作用的基因，其可直接与Apaf-1结合/或阻止细胞色素C释放，抑制caspases级联激活。Diez [8] 发现SHR血管平滑肌细胞Bcl-2表达升高，这也与我们在人血清中观察到结果相一致。
众所周知，血管紧张素转换酶抑制剂(Angiotension Conˉverting Enzyme Inhibitors，ACEI)是治疗高血压病的常用药物，苯那普利是新一代ACEI，含羧基、长效、前体药，能加速吸收率和延长有效成份的作用，不受饮食的影响，口服后在体内水解成活性物质-苯那普利拉(Benageprilat)，可明显抑制血管紧张素Ⅰ转化为血管紧张素Ⅱ，减弱血管紧张素Ⅱ介导的一切作用而产生降压等效果，半衰期为21～22h，一次用药在血浆中对血管紧张素转换酶的抑制作用可持续24h，蛋白结合率达95%～97%。其降压作用主要是通过抑制血管紧张素Ⅰ转变为血管紧张素Ⅱ而实现的 [9] ，减少继发于高血压病的心、肾等血管病变的发生 [10] ;其可特异地阻断Ang-Ⅱ，通过RAS的某些环节介导凋亡有关。故应用ACE-Ⅰ类治疗高血压病来保持一定细胞凋亡对维持血管正常结构和功能有重要意义。
, 百拇医药
根据本试验有一点可以肯定凋亡在EH发病及进展中起病理作用。故保持一定的细胞凋亡对维持血管正常结构和功能有重要意义。这对以后开发具有特异性和(或)抑制细胞凋亡的药物对EH治疗有临床价值。
参考文献
1 Jagat，Roger J，Hajjar Gl.Apoptosis is the failing heart.Cardiol Clinics，1998，16:691-710.
2 方福得.分子生物学前沿技术.北京:北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社，1998，147.
3 张晓东，王文亮.细胞凋亡相关基因研究进展.国外医学·分子生物学分册，1994，16(4):148.
4 Pollman MJ，Naumavski L，Gibbons GH.Vascular cell apoptosis cell type specific，modulation by transforming growth factor-βin endothelial cells versus smooth muscle cells.Circulation，1999，99:2019.
, http://www.100md.com
5 McCaffrey TA，DW B，Fu C，et al.The expression of TGF-beta recepˉtors in human atherosclerosis;evidences for aquired resistance to apoptoˉsis due to receptor imbalance.J Mol cell cardiol，1999，31:1627.
6 Craff J M，Bansal A，Mellon D A.Xenopus Mad proteins transduce disˉtinct subsets of signals for the TGF-βsignaling:receptor.Cell，1996，85:479-487.
7 Massague J.TGF-βsuperfamily，transluers，and Mad proteins.Cell，1996，85:947-950.
, 百拇医药
8 Wong WJR.Biochem J，1997，328:733-737.
9 Vaur L，Bobrie G，Dutrey-Dupagne C，et al.short-term effects of withdrawing angiotension enzyme inhibitor therapy on home self-meaˉsured blood pressure in hypertensive patients.Am J Hypertension，1998，11:165-173.
10 Dogle JC，Mottram DR，Stubbs H.Prescribing of ACE inhibitors for cardiovascular disorders in general practice.J Clin Pharm Ther，1998，23:133-136.
作者单位:113006辽宁省抚顺市中心医院循环内科
(编辑 元红), 百拇医药(汪琦)
关键词 原发性高血压 转化生长因子β1 Bcl-2 苯那普利 非洛地平 凋亡
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2003)06-0832-03
, http://www.100md.com
The clinical significance and altered TGF-β1、Bcl-2concentration in
hypertension patients after Benazepril and felodipine administration
Wang Qi，Shan Haiyan，Zhang Lili
The Center Hospital of Fushun，Liaoning113006.
【Abstract】 Objective To study the altered blood concentration of TGF-β1、Bcl-2and the clinic signifiˉcance in patients with EH after Benazepril and Felodipine administration.Methods Blood concentration of TGF-β1and Bcl-2were measured in60patients with EH by ELISA before and after Benazepril and Felodipine admi
, 百拇医药
nistraˉtion，and were compared with30members of a healthy control group.Results TGF-β1and Bcl-2concentration were higher in hypertension than normotensive subject(P<0.01);Treatment of hypertensive patients with antihyperˉtensive drugs caused a reduction in TGF-β1and Bcl-2concentration，which was marked after admin
istration of Beˉnazepril than Felodipine despite of the similar antihypertension effect.Conclusion Increased TGF-β1and Bcl-2concentration in EH patients may contribute to the pathogesis of the disease through the vascular remodeling，hypertroˉphy and partly apoptosis，Benazepril has greatly benefit in vascular archi
, http://www.100md.com
tecture.
Key words essential hypertension transforming growth factor-β1 Bcl-2 benazepril felodipine apopˉtosis
近年来，随着对原发性高血压研究的逐渐深入，部分相关内容已达到细胞及分子水平。越来越多的证据表明，凋亡的不足可能在原发性高血压(EH)的病理起重要作用 [1] ，而抗高血压药物可引起血管肥厚逆转的同时伴有凋亡的增加 [2] 。因为转化生长因子β1(TGF-β1)、Bcl-2都在血管平滑肌细胞(SMCs)中表达，而这两种蛋白表达可通过血清中Bcl-2、TGF-β1的浓度表现出来。本文旨在观察正常人和EH患者血清中Bcl-2、TGF-β1的浓度，以及苯那普利和非洛地平对其的影响。
1 对象与方法
, 百拇医药
1.1 研究对象 原发性高血压(EH)组:60例均为2002年1月～2003年1月入院患者、经病史、体检、有关临床及实验室检查，排除继发性高血压、内分泌和代谢疾病、严重心脑血管并发症、肝肾功能障碍、血液系统疾病及严重烟酒嗜好者。EH标准参照1999年中国高血压防治指南标准，入选病人未经治疗，如已经治疗则停用一切降压药物5个半衰期以上。正常对照组:为30例健康自愿者。
1.2 方法
1.2.1 给药方法 将EH患者随机分为2组，每组30例，分别给予苯那普利(血管紧张素转换酶抑制剂，商品名洛丁新，北京诺华制药有限公司)10mg(苯那普利组)及非洛地平(钙通道阻滞剂，商品名波依定，阿斯特拉制药有限公司产品)5mg(非洛地平组)，于晨6h服药，连续服药10d，于服药后第5日如血压无下降，加用双氢克尿噻25mg，日1次口服。对照组无服药。
1.2.2 观察指标
, http://www.100md.com
1.2.2.1 血压测定 EH患者于服药前一天及服药期间每日晨8h测量坐位血压，在安静休息10min后进行，使用袖带汞柱式血压计测量坐位右上臂血压，取korothoff第Ⅰ音及第Ⅳ音为收缩压和舒张压，测量3次，各间隔2min，取平均值，由专人负责。
1.2.2.2 TGF-β1、Bcl-2检测 EH患者于服药前1天及服药第10天晨起抽取空腹肘静脉血2ml，立即离心(2000r/min×10min)，分离血清，-20℃下储存待测。测定采用酶联免疫吸附法(ELISA)，按说明书操作。TGF-β1试剂盒由深圳晶美实业有限公司提供，Bcl-2试剂盒由福州迈新生物技术有限公司提供。
1.3 统计学处理 组内、组间各数据t检验，以四格表确切概率法进行统计学处理。P<0.05为差异有显著性。
2 结果
2.1 两组患者基本情况比较 苯那普利和非洛地平组在年龄、性别、高血压病史、体重指数、基本收缩压、基本舒张压、心率无差异(P>0.05)，见表1。
, 百拇医药
表1 两组患者的基本情况比较 (略)
2.2 血压变化 两组血压在用药后均明显下降(P<0.001)，且两组血压下降程度无差异。苯那普利组加用双氢克尿噻3例占15%，非洛地平组加用双氢克尿噻5例占20%，两组比较差异无显著性，见表2。
表2 两组用药前后血压变化 (略)
2.3 TGF-β1与Bcl-2浓度 EH患者血清TGF-β1、Bcl-2浓度较正常血压者明显升高(Bcl-2:98.71±16.43vs65.3±16.0，P<0.001;TGF-β1:82.51±3.60vs42.12±24.57，P<0.001)。应用药物前两组间TGF-β1、Bcl-2浓度无差异(P>0.05)，应用两组降压药物后Benazepril组P<0.001，Felodipine组P<0.01(见表3)。
表3 两组用药前后Bcl-2(U/ml)、TGF-β1(ng/ml)浓度变化 (略)
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3 讨论
本文结果显示EH患者血清TGF-β1、Bcl-2的浓度在抗高血压药物干预后，所有EH患者水平均增高(P<0.01)，应用ACE-Ⅰ类TGF-β1和Bcl-2浓度较应用钙离子阻滞剂明显下降。故推测TGF-β1、Bcl-2有可能通过血管增生，重塑及部分通过抑制凋亡参与EH发生、发展病理 过程。TGF-β1是近年来发现与细胞凋亡密切相关细胞内源性因子 [3] ，TGF-β1分子为二聚体，由二硫链相连接，分子量为25kD，属于表皮生长抑制因子，是参与各种器官分化和退化的蛋白家族成员之一 [4] 。TGF-β1对VSMc有促进增殖，抑制凋亡及促进胶原合成作用 [5，6] 。Bary等 [7] 通过细胞培养发现在自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌中TGF-β1表达增高，这与我们在人血清中观察结果是一致的。TGF-β1通过TGF-β族配体→配受体→MAD(增强子，mother against dpp的基因产物)类蛋白→转录因子→基因表达等步骤来控制不同细胞生长分化和凋亡，以表现不同生物效应。
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Bcl-2是第一个被确认有抑制凋亡作用的基因，其可直接与Apaf-1结合/或阻止细胞色素C释放，抑制caspases级联激活。Diez [8] 发现SHR血管平滑肌细胞Bcl-2表达升高，这也与我们在人血清中观察到结果相一致。
众所周知，血管紧张素转换酶抑制剂(Angiotension Conˉverting Enzyme Inhibitors，ACEI)是治疗高血压病的常用药物，苯那普利是新一代ACEI，含羧基、长效、前体药，能加速吸收率和延长有效成份的作用，不受饮食的影响，口服后在体内水解成活性物质-苯那普利拉(Benageprilat)，可明显抑制血管紧张素Ⅰ转化为血管紧张素Ⅱ，减弱血管紧张素Ⅱ介导的一切作用而产生降压等效果，半衰期为21～22h，一次用药在血浆中对血管紧张素转换酶的抑制作用可持续24h，蛋白结合率达95%～97%。其降压作用主要是通过抑制血管紧张素Ⅰ转变为血管紧张素Ⅱ而实现的 [9] ，减少继发于高血压病的心、肾等血管病变的发生 [10] ;其可特异地阻断Ang-Ⅱ，通过RAS的某些环节介导凋亡有关。故应用ACE-Ⅰ类治疗高血压病来保持一定细胞凋亡对维持血管正常结构和功能有重要意义。
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根据本试验有一点可以肯定凋亡在EH发病及进展中起病理作用。故保持一定的细胞凋亡对维持血管正常结构和功能有重要意义。这对以后开发具有特异性和(或)抑制细胞凋亡的药物对EH治疗有临床价值。
参考文献
1 Jagat，Roger J，Hajjar Gl.Apoptosis is the failing heart.Cardiol Clinics，1998，16:691-710.
2 方福得.分子生物学前沿技术.北京:北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社，1998，147.
3 张晓东，王文亮.细胞凋亡相关基因研究进展.国外医学·分子生物学分册，1994，16(4):148.
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, http://www.100md.com
5 McCaffrey TA，DW B，Fu C，et al.The expression of TGF-beta recepˉtors in human atherosclerosis;evidences for aquired resistance to apoptoˉsis due to receptor imbalance.J Mol cell cardiol，1999，31:1627.
6 Craff J M，Bansal A，Mellon D A.Xenopus Mad proteins transduce disˉtinct subsets of signals for the TGF-βsignaling:receptor.Cell，1996，85:479-487.
7 Massague J.TGF-βsuperfamily，transluers，and Mad proteins.Cell，1996，85:947-950.
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8 Wong WJR.Biochem J，1997，328:733-737.
9 Vaur L，Bobrie G，Dutrey-Dupagne C，et al.short-term effects of withdrawing angiotension enzyme inhibitor therapy on home self-meaˉsured blood pressure in hypertensive patients.Am J Hypertension，1998，11:165-173.
10 Dogle JC，Mottram DR，Stubbs H.Prescribing of ACE inhibitors for cardiovascular disorders in general practice.J Clin Pharm Ther，1998，23:133-136.
作者单位:113006辽宁省抚顺市中心医院循环内科
(编辑 元红), 百拇医药(汪琦)