胃肠术后1号对胃肠手术加腹腔感染大鼠小肠粘膜及存活率的影响
【摘要】 目的 探讨胃肠术后1号对胃肠手术加腹腔感染大鼠肠粘膜屏障的保护作用。方法 采用胃肠手术加腹腔感染大鼠动物模型，随机分为对照组、模型组、胃肠术后1号治疗组。治疗组术后即刻灌胃给胃肠术后1号，对照组和模型组大鼠灌胃等量生理盐水。观察小肠病理变化及存活率的变化。结果 治疗组动物血浆小肠组织髓过氧化物酶活性显著低于对照组，48、72和120h存活率显著高于对照组。结论 胃肠术后1号具有明显的肠粘膜屏障保护作用，能提高胃肠手术加腹腔感染动物的存活率。
关键词 大鼠 小肠切除 肠粘膜屏障 胃肠术后1号
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2003)10-1451-02
Herbal medicines in improving intestinal mucosal barrier damage and survival rate in a rat model of small
, http://www.100md.com
bowel operation and by cecal ligation and puncture
Gu Junchao，Wang Yu，Xue Jianguo，et al.
Department of General Surgery，Beijing Friendship Hospital，Beijing100050.
【Abstract】 Objective To evaluate the protective role of herbal medicines in treatment of experimental small bowel operation and abdominal infection.Methods Animal model was established by experimental small bowel operaˉtion and cecalligation and puncture(CLP).The animals were divided into model，treatment andcontrol groups.Aniˉmals in the treatment groups were given herbal medicines immediately after small bowel operation separately，meanˉwhile those in control group received the same doses of saline.Results It was found that after giving herbal medicines，as activities of myeloperoxidase in intestines were significantly lowered in aniamls in treatment groups than those in control group.The survival rates of animals48，72and120hours in treatment groups were significantly higher than those in control group.Conclusion Herbal medicines has benefit effects inalleviating intestinal mucosal damage and improving survival rate.
, 百拇医药
Key words rat small bowel resection intestinal mucosal barrier wei chang shuhou-1
创伤和感染可导致肠道屏障损害，本研究的目的是观察我院自制胃肠术后1号口服液对胃肠道手术大鼠肠道病理形态及存活率的影响，为防治胃肠道手术并发症提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料 动物及分组:90只Wistar大鼠，雌、雄不限，体重250～300g(北京友谊医院实验中心提供)，随机分为3组:对照组(30)、模型组(30)、中药治疗组(30)。模型制备:术前禁食12h，自由饮水，戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(50mg/kg)。麻醉成功后，消毒，铺无菌巾。取上腹部正中切口入腹腔，找到回肠末段，切除回肠1cm，行回肠端端吻合，查吻合口通畅，无血液循环障碍，再采用大鼠盲肠结扎穿孔(CLP)腹腔感染制备模型。模型组和假手术组:手术后灌服生理盐水，逐层关腹。
, http://www.100md.com
1.2 给药方法 中药治疗组于模型制备后即刻给大鼠灌胃予中药治疗，中药制剂浓缩为100%药液(1g/ml)，经过滤和高压灭菌后4℃分装存放，给予胃肠术后1号灌胃1次，按1ml/100g体重，每日2次。对照组和模型组于模型制备后即刻给大鼠灌胃生理盐水，按1ml/100g体重，每日2次。
模型制备后12和24h，分别从皮下注射林格氏液50ml/kg补充液体丢失，术后24h动物恢复饮食。术后24、48、72和120h分批处死动物，留取血和组织标本，观察存活率。
本院制剂室制备胃肠术后1号口服液。主要成分:双花31g，连翘31g，公英31g，赤芍9g，大黄9g，陈皮9g，石斛15g，木香9g，桃仁9g，番泻叶6g。分光光度法测定脏器髓过氧化物酶(MPO)。病理形态学检查:动物处死后立即取小肠组织标本，HE染色，光镜下观察组织学改变。
1.3 统计学方法 采用方差分析和q检验。
, 百拇医药
2 结果
2.1 存活率 结果显示胃肠术后1号治疗组动物术后48、72和120h存活率均显著高于对照组，见表1。
2.2 小肠组织MPO 结果显示治疗组动物术后24、48h和72h小肠组织MPO活性均显著低于模型组，模型组术后24、48和72h小肠组织MPO活性显著高于对照组。胃肠术后1号对胃肠术后大鼠小肠MPO的影响，见表2。
表1 各组大鼠存活率的比较 (略)
表2 各组胃肠手术加腹腔感染大鼠小肠MPO检测结果 (略)
2.3 病理改变 超微结构显示对照组48h回肠粘膜微绒毛整齐，肠上皮细胞间紧密连接完整，桥粒存在，细胞间隙无增宽;而在模型组，可见细胞间隙增宽，细胞间紧密连接开放，肠上皮微绒毛脱落、排列稀疏。回肠组织HE染色光镜观察:48h对照组肠道粘膜结构基本正常，绒毛上皮完整，无上皮脱落及碎屑形成;模型组48h肠绒毛上皮水肿，可见局部上皮细胞脱落及溃疡形成，粘膜间质固有层毛细血管及淋巴管扩张，血管中可见积聚的红细胞，并可见肠粘膜间质充血水肿，炎症细胞浸润，上皮细胞脱落;粘膜厚度，绒毛高度及隐窝深度减少，治疗组48h肠道粘膜结构病理改变较模型组有明显减轻。
, http://www.100md.com
3 讨论
肠道屏障可分为两个部分，一是肠粘膜以外防止细菌易位的支持系统，主要包括肠道正常菌群，适当的营养摄入和健全的免疫系统，这些支持系统失常本身不直接损害胃肠粘膜的完整性，但使粘膜易于受损并降低粘膜更新和修复能力;二是肠道粘膜本身，它是防止细菌易位的基础和主要屏障。各种理化和病理原因造成粘膜通透性增加、结构 破坏是细菌易位的基本原因。
严重创伤、感染、烧伤、失血性休克等原因造成胃肠道粘膜组织低灌流、低血氧，特别是内毒素休克致粘膜氧耗增加，均可使粘膜细胞缺氧，无氧代谢增加，粘膜酸中毒，这是细菌易位导致MODS的重要原因。用中医清热解毒、活血化瘀、通里攻下等治则组方药(胃肠术后1号)，获得了一定的临床效果，肠组织髓过氧化物酶主要分布于肠粘膜间质的毛细血管内皮细胞 [1～3] 。本研究采用模型(小肠切除加腹腔感染)模型，观察胃肠术后1号对模型动物小肠粘膜屏障的保护作用及对死亡率的影响，研究结果将接近临床实际。本研究证明，小肠组织MPO活性升高及病理学表现一致，模型组肠组织髓过氧化物酶活性同时升高(P<0.05)
, http://www.100md.com
，胃肠术后1号能改善小肠切除加腹腔感染模型大鼠的病理损害。胃肠术后1号能降低肠组织髓过氧化物酶活性，能显著提高小肠切除加腹腔感染动物的存活率，治疗组48、72和120h存活率均显著高于对照组，差别显著;说明胃肠术后1号对小肠切除加腹腔感染有良好的疗效和潜在的治疗价值。
胃肠术后1号的作用机制:可能通过保护细胞功能、改善血液循环等作用，来达到的胃肠手术加腹腔感染后改善肠上皮细胞的功能，维持肠屏障的形态学完整性和肠粘膜正常通透性的目的。它作用的主要来源可能与胃肠术后1号具有通里攻下，荡涤胃肠积滞，促进肠蠕动和改善组织脏器微循环的作用有关 [4] 。
参考文献
1 Deitch EA.Multiple systems organ failure.Arch Surg，1992，216(2):118.
, 百拇医药 2 Matsuguchi T，MusikacharoenT，Ogawa T，et al.Gen expression of too-like receptor2，but not too-likereceptor4，is induced by LPS and inˉflammatory cytokines in mouse macrophages.J Immunol，2000，165:5767-5772.
3 Salzma AL，Wang H，Wollert PS，et al.Endotoxin induced ileal mucosal hypermeability in pigs:role of tissue acidosis.Am J Physiol，1994，266:633-6464.
4 陈海龙，吴咸中，关凤林.中药通里攻下法对多脏器功能不全综合征时肠屏障损伤的保护作用.中国中西医结合杂志，2000，20(2):120.
作者单位:100050首都医科大学附属北京友谊医院普外科
(编辑 李年令), 百拇医药(谷俊朝)
关键词 大鼠 小肠切除 肠粘膜屏障 胃肠术后1号
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2003)10-1451-02
Herbal medicines in improving intestinal mucosal barrier damage and survival rate in a rat model of small
, http://www.100md.com
bowel operation and by cecal ligation and puncture
Gu Junchao，Wang Yu，Xue Jianguo，et al.
Department of General Surgery，Beijing Friendship Hospital，Beijing100050.
【Abstract】 Objective To evaluate the protective role of herbal medicines in treatment of experimental small bowel operation and abdominal infection.Methods Animal model was established by experimental small bowel operaˉtion and cecalligation and puncture(CLP).The animals were divided into model，treatment andcontrol groups.Aniˉmals in the treatment groups were given herbal medicines immediately after small bowel operation separately，meanˉwhile those in control group received the same doses of saline.Results It was found that after giving herbal medicines，as activities of myeloperoxidase in intestines were significantly lowered in aniamls in treatment groups than those in control group.The survival rates of animals48，72and120hours in treatment groups were significantly higher than those in control group.Conclusion Herbal medicines has benefit effects inalleviating intestinal mucosal damage and improving survival rate.
, 百拇医药
Key words rat small bowel resection intestinal mucosal barrier wei chang shuhou-1
创伤和感染可导致肠道屏障损害，本研究的目的是观察我院自制胃肠术后1号口服液对胃肠道手术大鼠肠道病理形态及存活率的影响，为防治胃肠道手术并发症提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料 动物及分组:90只Wistar大鼠，雌、雄不限，体重250～300g(北京友谊医院实验中心提供)，随机分为3组:对照组(30)、模型组(30)、中药治疗组(30)。模型制备:术前禁食12h，自由饮水，戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(50mg/kg)。麻醉成功后，消毒，铺无菌巾。取上腹部正中切口入腹腔，找到回肠末段，切除回肠1cm，行回肠端端吻合，查吻合口通畅，无血液循环障碍，再采用大鼠盲肠结扎穿孔(CLP)腹腔感染制备模型。模型组和假手术组:手术后灌服生理盐水，逐层关腹。
, http://www.100md.com
1.2 给药方法 中药治疗组于模型制备后即刻给大鼠灌胃予中药治疗，中药制剂浓缩为100%药液(1g/ml)，经过滤和高压灭菌后4℃分装存放，给予胃肠术后1号灌胃1次，按1ml/100g体重，每日2次。对照组和模型组于模型制备后即刻给大鼠灌胃生理盐水，按1ml/100g体重，每日2次。
模型制备后12和24h，分别从皮下注射林格氏液50ml/kg补充液体丢失，术后24h动物恢复饮食。术后24、48、72和120h分批处死动物，留取血和组织标本，观察存活率。
本院制剂室制备胃肠术后1号口服液。主要成分:双花31g，连翘31g，公英31g，赤芍9g，大黄9g，陈皮9g，石斛15g，木香9g，桃仁9g，番泻叶6g。分光光度法测定脏器髓过氧化物酶(MPO)。病理形态学检查:动物处死后立即取小肠组织标本，HE染色，光镜下观察组织学改变。
1.3 统计学方法 采用方差分析和q检验。
, 百拇医药
2 结果
2.1 存活率 结果显示胃肠术后1号治疗组动物术后48、72和120h存活率均显著高于对照组，见表1。
2.2 小肠组织MPO 结果显示治疗组动物术后24、48h和72h小肠组织MPO活性均显著低于模型组，模型组术后24、48和72h小肠组织MPO活性显著高于对照组。胃肠术后1号对胃肠术后大鼠小肠MPO的影响，见表2。
表1 各组大鼠存活率的比较 (略)
表2 各组胃肠手术加腹腔感染大鼠小肠MPO检测结果 (略)
2.3 病理改变 超微结构显示对照组48h回肠粘膜微绒毛整齐，肠上皮细胞间紧密连接完整，桥粒存在，细胞间隙无增宽;而在模型组，可见细胞间隙增宽，细胞间紧密连接开放，肠上皮微绒毛脱落、排列稀疏。回肠组织HE染色光镜观察:48h对照组肠道粘膜结构基本正常，绒毛上皮完整，无上皮脱落及碎屑形成;模型组48h肠绒毛上皮水肿，可见局部上皮细胞脱落及溃疡形成，粘膜间质固有层毛细血管及淋巴管扩张，血管中可见积聚的红细胞，并可见肠粘膜间质充血水肿，炎症细胞浸润，上皮细胞脱落;粘膜厚度，绒毛高度及隐窝深度减少，治疗组48h肠道粘膜结构病理改变较模型组有明显减轻。
, http://www.100md.com
3 讨论
肠道屏障可分为两个部分，一是肠粘膜以外防止细菌易位的支持系统，主要包括肠道正常菌群，适当的营养摄入和健全的免疫系统，这些支持系统失常本身不直接损害胃肠粘膜的完整性，但使粘膜易于受损并降低粘膜更新和修复能力;二是肠道粘膜本身，它是防止细菌易位的基础和主要屏障。各种理化和病理原因造成粘膜通透性增加、结构 破坏是细菌易位的基本原因。
严重创伤、感染、烧伤、失血性休克等原因造成胃肠道粘膜组织低灌流、低血氧，特别是内毒素休克致粘膜氧耗增加，均可使粘膜细胞缺氧，无氧代谢增加，粘膜酸中毒，这是细菌易位导致MODS的重要原因。用中医清热解毒、活血化瘀、通里攻下等治则组方药(胃肠术后1号)，获得了一定的临床效果，肠组织髓过氧化物酶主要分布于肠粘膜间质的毛细血管内皮细胞 [1～3] 。本研究采用模型(小肠切除加腹腔感染)模型，观察胃肠术后1号对模型动物小肠粘膜屏障的保护作用及对死亡率的影响，研究结果将接近临床实际。本研究证明，小肠组织MPO活性升高及病理学表现一致，模型组肠组织髓过氧化物酶活性同时升高(P<0.05)
, http://www.100md.com
，胃肠术后1号能改善小肠切除加腹腔感染模型大鼠的病理损害。胃肠术后1号能降低肠组织髓过氧化物酶活性，能显著提高小肠切除加腹腔感染动物的存活率，治疗组48、72和120h存活率均显著高于对照组，差别显著;说明胃肠术后1号对小肠切除加腹腔感染有良好的疗效和潜在的治疗价值。
胃肠术后1号的作用机制:可能通过保护细胞功能、改善血液循环等作用，来达到的胃肠手术加腹腔感染后改善肠上皮细胞的功能，维持肠屏障的形态学完整性和肠粘膜正常通透性的目的。它作用的主要来源可能与胃肠术后1号具有通里攻下，荡涤胃肠积滞，促进肠蠕动和改善组织脏器微循环的作用有关 [4] 。
参考文献
1 Deitch EA.Multiple systems organ failure.Arch Surg，1992，216(2):118.
, 百拇医药 2 Matsuguchi T，MusikacharoenT，Ogawa T，et al.Gen expression of too-like receptor2，but not too-likereceptor4，is induced by LPS and inˉflammatory cytokines in mouse macrophages.J Immunol，2000，165:5767-5772.
3 Salzma AL，Wang H，Wollert PS，et al.Endotoxin induced ileal mucosal hypermeability in pigs:role of tissue acidosis.Am J Physiol，1994，266:633-6464.
4 陈海龙，吴咸中，关凤林.中药通里攻下法对多脏器功能不全综合征时肠屏障损伤的保护作用.中国中西医结合杂志，2000，20(2):120.
作者单位:100050首都医科大学附属北京友谊医院普外科
(编辑 李年令), 百拇医药(谷俊朝)