星形细胞瘤中Bcl-2、p21蛋白的表达与预后的关系
【摘要】 目的 探讨Bcl-2、p21蛋白在星形细胞瘤中的表达及其与预后的关系。方法应用免疫组织化学SABC法检测58例不同分化程度的星形细胞瘤Bcl-2、p21蛋白的表达。结果Bcl-2、p21蛋白的表达阳性率分别为38%和60%，两者表达之间差异有显著性，呈负相关(P<0.05)。Bcl-2表达与星形细胞瘤分级呈负相关(P<0.05)，Ⅰ、Ⅱ级星形细胞瘤Bcl-2阳性表达率明显高于Ⅲ、Ⅳ级;Bcl-2表达与复发、生存期无关。p21表达与星形细胞瘤分级明显相关(P<0.05)，p21表达与复发情况、生存期有相关性。结论 Bcl-2表达与预后无关，p21可作为预后估价的客观指标。
关键词 星形细胞瘤 Bcl-2 p21蛋白 预后
【文献标识码】 A 【文章编号】 1680-077X(2003)11-0971-02
The relation between expression of Bcl-2and p21protein and prognosis of as trocytoma
, 百拇医药
Wang Donglin，E Qun，Shi Gongsheng，et al.
Dept.of Pathology，Nantong Medical College，Nantong226001.
【Abstract】 Objective To study the relationship between the expression of Bcl-2and p21protein and progˉnosis of astrocytoma.Methods Using SABC immunohistochemical method，Bcl-2and p21expression in58cases of astrocytoma were detected.Results Among those tumors，immunopositivity was observed for Bcl-2in22cases(38%)and p21in35cases(60%).The correlation between the expression of both was found(P<0.05).There was a significant relation between the expression of Bcl-2and histological grade(P<0.05).Bcl-2expression in gradeⅠandⅡare higher than ones of gadeⅢandⅣ.Bcl-2expression is not related to recurrence and survival perio
, 百拇医药
d.p21expression correlates positively to histological grade(P<0.05).p21expression is related to recurrence and surˉvival period.Conclusion Bcl-2expression related no to prognosis.p21may be a prognostic indicator in astrocyˉtoma.
Key words astrocytoma Bcl-2 p21 prognosis
细胞程序性死亡(programmed cell death，PCD)或细胞凋亡(apoptosis)是组织发育形成和功能维持的必需生理现象，当PCD出现反常调控时，可促使肿瘤等多种疾病的发生 [1] 。Bcl-2和p21是近年来发现的PCD的一些抑制因子，有关这方面的研究已成为分子生物学、肿瘤学领域的热门课题。为了探讨两者在星形细胞瘤发生发展中的作用及其与预后的关系，我们采用免疫组织化学的方法对58例星形细胞瘤中Bcl-2和p21的表达进行了检测。现将结果报告如下。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 选用我院脑外科1997～1999年间手术切除的58例星形细胞瘤存档蜡块，常规固定包埋，组织学分级采用Kernohan标准，其中Ⅰ级11例，Ⅱ级26例，Ⅲ级13例，Ⅳ级8例。58例中男31例，女27例，年龄20～77岁。4例正常脑组织为对照。随访自术后第1天开始或化疗后第1天开始，随访时间3～40个月。
1.2 主要试剂 鼠抗人Bcl-2单克隆抗体、鼠抗人p21单克隆抗体均为Dako公司产品，SABC试剂盒购自迈新公司。
1.3 免疫组织化学染色 石蜡组织以4μm切片，常规脱蜡，0.5%胰酶消化，20.5%正常羊血清封闭，分别滴加1:50Bcl 作者单位:1226001南通医学院病理学教研室2南通医学院附属医院病理科 -2和p21单隆抗体，4℃过夜，其后步骤按SABC试剂盒说明书操作，DAB显色，均设阳性、阴性对照。
, 百拇医药
1.4 结果判断 阳性反应为细胞浆内或细胞核内出现棕黄色颗粒。染色强度分级:阴性(-)，无任何肿瘤细胞显色或背景深;弱阳性(+)，<25%肿瘤细胞显色;中度阳性(++)，25%～50%肿瘤细胞显色;强阳性(+++)，>50%以上的肿瘤细胞显色。
1.5 统计学处理 采用X 2 检验。
2 结果
2.1 Bcl-2和p21在星形细胞瘤中的表达情况 Bcl-2表达于肿瘤细胞胞浆内(图1)，p21表达于肿瘤细胞核内(图2)，Bcl-2和p21表达阳性率分别为38%(22/58)和60%(35/58)。
2.2 Bcl-2和p21表达之间的关系 Bcl-2和p21表达间差异有显著性，呈负相关(P<0.05)，2.3 Bcl-2和p21表达与临床病理因素之间的关系 详见表2。表2 Bcl-2和p21表达与临床病理因素之间的关系因素(略)Bcl-2和p21表达与病理组织学分级之间的差异均有显著性(X 2 =7.5572，P<0.05)，Ⅰ、Ⅱ级星形细胞瘤Bcl-2阳性表达率明显高于Ⅲ、Ⅳ级，即高分化者阳性率高于低分化者;Bcl-2表达与有无复发无关(X 2 =0.6479，P>0.05);Bcl-2与生存期无关(X 2 =0.0056，P
, http://www.100md.com
>0.05)。
p21表达与病理组织学分级之间的差异有显著性(X 2 =16.5980，P<0.05)，高分级肿瘤p21表达高于低分级肿瘤;p21表达与复发有关(X 2 =8.4667，P<0.05)，有复发者阳性率高于无复发者;p21表达与生存期有相关性(X 2 =13.0368，P<0.05)，生存期≤3年的p21表达阳性率明显高于生存期>3年的p21表达阳性率，呈负相关。
3 讨论
Bcl-2基因最初是从小鼠B细胞淋巴瘤中分离得到的原癌基因，定位于染色体18q 21 ，含有3个外显子、2个开读框架，编码由239个氨基酸组成的蛋白质，是目前公认的抗凋亡基因 [2] 。该基因通过抑制细胞凋亡，延长细胞生存参与肿瘤发生 [3] 。Bcl-2的表达与病理因素如肿瘤大小、肿瘤分期无关。Bcl-2表达与凋亡的关系在预后中的作用各家报道不一，有人认为凋亡率高者预后差，也有人认为凋亡率高者预后好或与预后无关。本组研究显示Bcl-2在星形细胞瘤中的阳性表达率为38%，Bcl-2表达与组织学分级呈负相关，与复发及生存期无明显关系，表明Bcl-2的扩增和表达在星形细胞瘤的发生发展过程中可能是早期事 件，不影响患者的预后。
, http://www.100md.com
p21基因定位于人第6号染色体短臂的2带1区(6P21.2)，DNA长度为85kb，有3个外显子，分别为68kb、450kb和1600kb [4] 。p21基因编码一富含精氨酸酶并有164个氨基酸组成的蛋白质，该蛋白在细胞膜跨膜信号传递中起重要作用。p21可抑制肿瘤细胞的生长，p21与肿瘤细胞的分化、增殖、转移有关，并有预后价值 [5] 。本研究显示p21在星形细胞瘤中的阳性表达率为60%，与文献报道一致 [6] 。结果还显示p21表达与星形细胞瘤的分级、复发呈正相关，与生存期呈负相关，表明p21蛋白表达单因素与星形细胞瘤预后的关系密切。
Bcl-2和p21蛋白在星形细胞瘤中表达关系密切，Bcl-2的表达随p21表达增高而明显减少，呈负相关。p21依赖mtp53既能抑制Bcl-2转录的开始，又能改变mRNA的稳定性，从而间接对Bcl-2表达进行负调节 [7] 。Miyashita等通过转基因实验研究表明，Bcl-2基因具有负应答成分，p21可以直接或间接下调Bcl-2基因的表达。
, 百拇医药
本研究结果表明，p21蛋白可单独作为星形细胞瘤的预后指标，其表达与组织学分级、有无复发及生存期有关;Bcl-2不可单独作为星形细胞瘤的预后指标，其阳性表达程度说明星形细胞瘤分化程度较高或早期阶段，两者配合检测更能反映星形细胞瘤患者的预后。(本文图片见封三(略)
参考文献
1 Eissa S，Labib R，Khalifa A，et al.Regulators of apoptosis in human breast cancer.Clin Biochem，1999，32(5):321-326.
2 Villar E，Redondo M，Rodrigo I，et al.Bcl-2eapression and apoptosis in primary and metastatic breast carcinomas.Tumour Biol，2001，22(3):137-145.
, http://www.100md.com
3 Freneaux P，Stoppa Lyonnet D，Mouret E，et al.Low expression of Bcl-2in Bral-associated breast cancers.Br J Cancer，2000，83(10):1318-1322.
4 Kamaitani H，Taniura S，Watanabe K，et al.Histone accetylation may suppress human glioma cell proliferation when p21and gelsolin are inˉduced.Neuro Oncol，2002，4(2):95-101.
5 Siavoshian S，Segein JP，Kornprobst M，et al.Butyrate and trichostain A effects on the proliferation/differentiation of human intestinal epithelial cells:induction of cyclin D3and p21expression.Gut，2000，46(4):507-514.
6 Ikeguchi M.Digestive Disease and Science，1998，43(5):964.
7 Korsmeyer SJ.Bcl-2gene family and the regulation of programmed cell death.Cancer Res，1999，59:1693.
(收稿日期:2003-04-25)
(编辑一 坤), 百拇医药(王东林)
关键词 星形细胞瘤 Bcl-2 p21蛋白 预后
【文献标识码】 A 【文章编号】 1680-077X(2003)11-0971-02
The relation between expression of Bcl-2and p21protein and prognosis of as trocytoma
, 百拇医药
Wang Donglin，E Qun，Shi Gongsheng，et al.
Dept.of Pathology，Nantong Medical College，Nantong226001.
【Abstract】 Objective To study the relationship between the expression of Bcl-2and p21protein and progˉnosis of astrocytoma.Methods Using SABC immunohistochemical method，Bcl-2and p21expression in58cases of astrocytoma were detected.Results Among those tumors，immunopositivity was observed for Bcl-2in22cases(38%)and p21in35cases(60%).The correlation between the expression of both was found(P<0.05).There was a significant relation between the expression of Bcl-2and histological grade(P<0.05).Bcl-2expression in gradeⅠandⅡare higher than ones of gadeⅢandⅣ.Bcl-2expression is not related to recurrence and survival perio
, 百拇医药
d.p21expression correlates positively to histological grade(P<0.05).p21expression is related to recurrence and surˉvival period.Conclusion Bcl-2expression related no to prognosis.p21may be a prognostic indicator in astrocyˉtoma.
Key words astrocytoma Bcl-2 p21 prognosis
细胞程序性死亡(programmed cell death，PCD)或细胞凋亡(apoptosis)是组织发育形成和功能维持的必需生理现象，当PCD出现反常调控时，可促使肿瘤等多种疾病的发生 [1] 。Bcl-2和p21是近年来发现的PCD的一些抑制因子，有关这方面的研究已成为分子生物学、肿瘤学领域的热门课题。为了探讨两者在星形细胞瘤发生发展中的作用及其与预后的关系，我们采用免疫组织化学的方法对58例星形细胞瘤中Bcl-2和p21的表达进行了检测。现将结果报告如下。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 选用我院脑外科1997～1999年间手术切除的58例星形细胞瘤存档蜡块，常规固定包埋，组织学分级采用Kernohan标准，其中Ⅰ级11例，Ⅱ级26例，Ⅲ级13例，Ⅳ级8例。58例中男31例，女27例，年龄20～77岁。4例正常脑组织为对照。随访自术后第1天开始或化疗后第1天开始，随访时间3～40个月。
1.2 主要试剂 鼠抗人Bcl-2单克隆抗体、鼠抗人p21单克隆抗体均为Dako公司产品，SABC试剂盒购自迈新公司。
1.3 免疫组织化学染色 石蜡组织以4μm切片，常规脱蜡，0.5%胰酶消化，20.5%正常羊血清封闭，分别滴加1:50Bcl 作者单位:1226001南通医学院病理学教研室2南通医学院附属医院病理科 -2和p21单隆抗体，4℃过夜，其后步骤按SABC试剂盒说明书操作，DAB显色，均设阳性、阴性对照。
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1.4 结果判断 阳性反应为细胞浆内或细胞核内出现棕黄色颗粒。染色强度分级:阴性(-)，无任何肿瘤细胞显色或背景深;弱阳性(+)，<25%肿瘤细胞显色;中度阳性(++)，25%～50%肿瘤细胞显色;强阳性(+++)，>50%以上的肿瘤细胞显色。
1.5 统计学处理 采用X 2 检验。
2 结果
2.1 Bcl-2和p21在星形细胞瘤中的表达情况 Bcl-2表达于肿瘤细胞胞浆内(图1)，p21表达于肿瘤细胞核内(图2)，Bcl-2和p21表达阳性率分别为38%(22/58)和60%(35/58)。
2.2 Bcl-2和p21表达之间的关系 Bcl-2和p21表达间差异有显著性，呈负相关(P<0.05)，2.3 Bcl-2和p21表达与临床病理因素之间的关系 详见表2。表2 Bcl-2和p21表达与临床病理因素之间的关系因素(略)Bcl-2和p21表达与病理组织学分级之间的差异均有显著性(X 2 =7.5572，P<0.05)，Ⅰ、Ⅱ级星形细胞瘤Bcl-2阳性表达率明显高于Ⅲ、Ⅳ级，即高分化者阳性率高于低分化者;Bcl-2表达与有无复发无关(X 2 =0.6479，P>0.05);Bcl-2与生存期无关(X 2 =0.0056，P
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>0.05)。
p21表达与病理组织学分级之间的差异有显著性(X 2 =16.5980，P<0.05)，高分级肿瘤p21表达高于低分级肿瘤;p21表达与复发有关(X 2 =8.4667，P<0.05)，有复发者阳性率高于无复发者;p21表达与生存期有相关性(X 2 =13.0368，P<0.05)，生存期≤3年的p21表达阳性率明显高于生存期>3年的p21表达阳性率，呈负相关。
3 讨论
Bcl-2基因最初是从小鼠B细胞淋巴瘤中分离得到的原癌基因，定位于染色体18q 21 ，含有3个外显子、2个开读框架，编码由239个氨基酸组成的蛋白质，是目前公认的抗凋亡基因 [2] 。该基因通过抑制细胞凋亡，延长细胞生存参与肿瘤发生 [3] 。Bcl-2的表达与病理因素如肿瘤大小、肿瘤分期无关。Bcl-2表达与凋亡的关系在预后中的作用各家报道不一，有人认为凋亡率高者预后差，也有人认为凋亡率高者预后好或与预后无关。本组研究显示Bcl-2在星形细胞瘤中的阳性表达率为38%，Bcl-2表达与组织学分级呈负相关，与复发及生存期无明显关系，表明Bcl-2的扩增和表达在星形细胞瘤的发生发展过程中可能是早期事 件，不影响患者的预后。
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p21基因定位于人第6号染色体短臂的2带1区(6P21.2)，DNA长度为85kb，有3个外显子，分别为68kb、450kb和1600kb [4] 。p21基因编码一富含精氨酸酶并有164个氨基酸组成的蛋白质，该蛋白在细胞膜跨膜信号传递中起重要作用。p21可抑制肿瘤细胞的生长，p21与肿瘤细胞的分化、增殖、转移有关，并有预后价值 [5] 。本研究显示p21在星形细胞瘤中的阳性表达率为60%，与文献报道一致 [6] 。结果还显示p21表达与星形细胞瘤的分级、复发呈正相关，与生存期呈负相关，表明p21蛋白表达单因素与星形细胞瘤预后的关系密切。
Bcl-2和p21蛋白在星形细胞瘤中表达关系密切，Bcl-2的表达随p21表达增高而明显减少，呈负相关。p21依赖mtp53既能抑制Bcl-2转录的开始，又能改变mRNA的稳定性，从而间接对Bcl-2表达进行负调节 [7] 。Miyashita等通过转基因实验研究表明，Bcl-2基因具有负应答成分，p21可以直接或间接下调Bcl-2基因的表达。
, 百拇医药
本研究结果表明，p21蛋白可单独作为星形细胞瘤的预后指标，其表达与组织学分级、有无复发及生存期有关;Bcl-2不可单独作为星形细胞瘤的预后指标，其阳性表达程度说明星形细胞瘤分化程度较高或早期阶段，两者配合检测更能反映星形细胞瘤患者的预后。(本文图片见封三(略)
参考文献
1 Eissa S，Labib R，Khalifa A，et al.Regulators of apoptosis in human breast cancer.Clin Biochem，1999，32(5):321-326.
2 Villar E，Redondo M，Rodrigo I，et al.Bcl-2eapression and apoptosis in primary and metastatic breast carcinomas.Tumour Biol，2001，22(3):137-145.
, http://www.100md.com
3 Freneaux P，Stoppa Lyonnet D，Mouret E，et al.Low expression of Bcl-2in Bral-associated breast cancers.Br J Cancer，2000，83(10):1318-1322.
4 Kamaitani H，Taniura S，Watanabe K，et al.Histone accetylation may suppress human glioma cell proliferation when p21and gelsolin are inˉduced.Neuro Oncol，2002，4(2):95-101.
5 Siavoshian S，Segein JP，Kornprobst M，et al.Butyrate and trichostain A effects on the proliferation/differentiation of human intestinal epithelial cells:induction of cyclin D3and p21expression.Gut，2000，46(4):507-514.
6 Ikeguchi M.Digestive Disease and Science，1998，43(5):964.
7 Korsmeyer SJ.Bcl-2gene family and the regulation of programmed cell death.Cancer Res，1999，59:1693.
(收稿日期:2003-04-25)
(编辑一 坤), 百拇医药(王东林)