脑栓塞病人体外模拟血栓形成与D-二聚体的相关性初探
【摘要】 目的 探讨不同脑栓塞病人的体外模拟血栓形成与血浆D-二聚体含量的关系。方法 用标准摆动式旋转CAST法对43例脑栓塞患者和51例健康人进行体外模拟血栓的试验，并用胶乳定性法及定量法测定血浆D-二聚体含量。结果 患者模拟血栓湿重和指数Q值与健康人差异有显著性(P<0.05)，血栓长度改变不明显(P>0.05);血浆D-二聚体含量水平与年龄有关，年龄小于40岁组与大于40岁组的差异有非常显著性(P<0.01)。结论 对脑栓塞病人进行体外模拟血栓检查和血浆D-二聚体检测对了解血栓形成具有重要意义。
关键词 脑栓塞 体外模拟血栓试验 血栓指数Q D-二聚体
【文献标识码】 A 【文章编号】 1680-6115(2003)11-0972-02
The primary study on the relationship between thrombosis in vitro
, 百拇医药
and the serum level of D-dimer of the patients with cerebral embolism
WeiWenbin，Luo Guohui，Zeng Lianyi，et al.
Futian District Hospital，Shenzhen，Guangdong518033.
【Abstract】 Objective To investigate the relation between the thrombosis and the blood D-dimer level of the patients with cerebral embolism in vitro.Methods The Imitating Thrombosis-Test(ITT)was performed using the standard method of
, 百拇医药
CAST in43adults with cerebral embolism and51healthy adults and the blood D-dimer in the different groups was also compared by the method of latex test.Results
The weight of imitating thrombi and thromˉbus index Q in cerebral embolism group was higher than that of control group(P<0.05)，but no prominent differˉence of the length of thrombi between two groups was shown(P>0.05).The blood D-dimer level was closely relatˉed to the age with the fact that D-dimer level in patients over40years old was much higher than those under40years old.Conclusion The ITT and blood D-dimer level are useful in assessing the risk of thrombus formation in vivo and in conducting the prevention and clinical treatment of cerebral embolism.
, http://www.100md.com
Key words cerebral embolism imitating thrombosis-test thrombus index Q D-dimer
近年来，我国中风和心肌梗死等心脑血管性疾病的发病率、致残率和死亡率均呈日趋上升之势，死亡率二倍于恶性肿瘤，跃居诸病之首。患病人数超过6800万人，约占全国总人数的5.4%。每年死于中风等心脑血管性疾病的人数已超过250万人。体外模拟血栓试验，对心脑血管病人的诊断、治疗、预防和发病机理的研究，对血栓形成机制和血流动力学的阐明以及抗凝溶栓药物、活血化瘀中草药的药理研究和新药开发均有重要意义 [1] 。D-dimer是纤溶酶降解不溶性交联纤维蛋白时所产生的一种特异性降解产物 [2] ，血清D-dimer水平的增加间接反映了机体的高凝状态及血栓形成的风险。继发性纤溶活性增强时存在继发纤维蛋白溶解，故其降解产物可作为体内高凝状态、血栓形成和纤溶亢进的分子标志物之一[3]。本所从1998年起开展了体外模拟血栓试验和D-dimer检测，重点观察了不同年龄组血栓指数Q与血D-二聚体的水平，初步探讨不同年龄的脑梗塞患者的发病机理。
, 百拇医药
1 对象与方法
1.1 研究对象 脑栓塞病人组(全部按中华神经科学会 1995年制订的缺血性脑血管疾病的诊断标准 [4])43例，男29例，女14例，年龄31～69岁，平均(56±6)岁;按年龄段分为A、B两组，A组共17例，男12例，女5例，年龄31～40岁，平均(35±4)岁;B组共26例，男17例，女9例，年龄41～62岁，平均(54±7)岁;健康对照组51例，为随机抽取的我院体检科筛查出的正常个体，男30例，女21例，年龄35～65岁，平均(55±5)岁。
1.2 实验方法 (1)血栓试验使用上海医科大学生物力学研究中心研究的CAST式血栓仪，按标准摆动式旋转CAST法进行，实验时室温调节至18～25℃。该机采用体外模拟体内37℃恒温条件，血液在相当于中等大小血管的硅化管(直径为5.0mm)内流动状态下形成血栓，自动定时测定所得血栓长度和湿重，计算出血栓指数Q值，其计算公式为:血栓指数Q值=L/2+W 。(L:血栓长度mm，W:血栓湿重mg)。抽取受试者早晨空腹静脉血1min，立即注入硅化转环内，启动已预热好的CAST血栓仪，7min后仪器自动定时停止摆动旋转后，用镊子将硅化转环取出并将管中血液随同形成的血栓一起倒在滤纸上，用游标卡尺测量血栓长度(mm)，再用镊子将血栓在滤纸上滚动以吸去浮血及水份，然后放在已称重的胶片上用电子天平自动称重，按公式计算血栓指数Q值;(2)D-二聚体检测:采用美国太平洋公司(Pacific Hemostasis)的试剂盒(D-Dimer Assay)，每次均做阴性阳性对照，并依3min观察凝集反应决定稀释度，直到反应为阴性为止。计算半定量值。统计学方法:各测定参数以均数±标准差(ˉx±s)表示;健康对照组与脑栓塞病人组比较采用t检验。脑栓塞病人不同年龄组D-二聚体水平采用t检验。
, 百拇医药
2 结果
2.1 栓塞病人组的体外模拟血栓形成试验结果与健康组比较 结果表明，体外形成的血栓的长度差异不明显P>0.05，而湿重、血栓指数Q值差异均有显著性(P<0.05)，见表1。
表1 心脑血管病组与健康组血栓栓长、湿重、血栓指数Q比较 (略)
2.2 不同年龄组患者血D-二聚体的含量比较 结果表明，小于40岁组与大于40岁组的差异有非常显著性(P<0.01)，见表2。
表2 不同年龄组D-D水平略
3 讨论
血栓可发生在身体任何部位的血管内，静脉血栓较动脉血栓为多，约占20%～30%，微血栓更多，超过33% [5] ，血栓形成与心脑血管病密切相关。血栓形成的影响因素很多，它与血小板的聚集和促凝活性、凝血因子、抗凝及纤溶系统、全血粘弹性增高 [6] 、血流动力学改变及动脉粥样硬化 [7] 等引起的血管内皮细胞损伤的因素均有关。祖国医学浓、粘、凝、聚的理论 [8] 直观地描述了脑血栓的成因。人体内血栓形成很难直接观察到，从而给血栓及抗血栓的研究和疾病的防治带来困难。模拟血栓与人体血栓关系十分密切，通过模拟血栓形成来推断在心脑血管疾病发病期间患者体内血栓形成及其影响因素、血管阻塞程度以及预测在心脑血管疾病前期(潜伏期)体内隐性血栓的存在和发展，其临床意义是十分明显的。CAST仪检测模拟血栓形成时克服了由于血液湍流而引发的误差，采用摆动转体恒温块直接控温，控温精度达±0.2℃。用CAST仪形成的体外血栓与体内血栓有十分相似的结构，可分为头体尾三部分。
, http://www.100md.com
血栓形成影响因素较多，血栓长度、湿重和血栓指数Q值属宏观综合性指标。本研究结果显示，脑栓塞病人的体外模拟血栓各项指标对了解血液宏观状况有很好的帮助。在急性缺血性脑血管病早期功能恢复过程中，伴随着凝血和纤溶的病理演变过程，其中纤溶酶促使交联的纤维蛋白降解，产生多种碎片，D-二聚体就是其中一种 [9]。Seki和Yamazaki [10，11] 等认为脑血栓形成发病过程中，体内凝血和 纤溶系统处于一定程度的持续活化状态。本文结果也显示模拟血栓湿重和Q值，脑血栓病人组和健康对照组有显著差异，但年龄大的患者D-二聚体水平较高，这是因为D-二聚体水平的改变还与动脉粥样硬化、病灶大小、血小板活化的程度等因素有关，这可能与老年人患有较多基础性疾病如动脉粥样硬化、高血压等有关。D-二聚体检验是将高度特异的单克隆抗体定向地以Fc段结合在胶乳颗粒上而将Fab朝向外周，这种结构的胶乳试剂能够非常灵敏快速地捕捉抗原而使其反应迅速，达到微量而快速准确的检测目的。通过这些指标的监测，对于缺血性脑血管病的预防、治疗和预后均有一定的帮助，且试验操作简单、灵敏度高、费用适中，很适合基层单位推广使用。
, http://www.100md.com
参考文献
1 忻伟均.新药与临床，1993，12:69-71.
2 Hoffmeiser HM，Jur M.Wemdel HP，et al.Alterations of coagulation and fibrinolytic and kallikrein-kinin systems in the acute and post aˉcute phase in patients with unstable angina pectoris.Circulation，1995，91:2520.
3 黄国尉，王鸿利，张颖琪，等.中华医学检验杂志，1995，18:71.
4 中华神经科学会，中华神经外科学会.脑缺血疾病分类(1995).中华神经科杂志，1996，29(6):376-377.
, http://www.100md.com
5 Adbu RA，Zakbour BT，Dallis DJ.Mesenteric venous thrombosis.Surgery，1987，101:383.
6 Ross R.The pathogenesis of atherosclesis-anupdate.NewEng JMed，1986，314:488.
7 Toole JF.Cerebrovascular Disorder.3rd Ed.New York:Raven Press，1984，1-36.
8 胡伯成.体外血栓形成与血液流变学间的关系.医学生物物理学，1992，4:32-35.
9 李家增.血栓疾病.北京:科学技术出版社，1998，66-68.
10 Seki Y，Takabashi H，Wada K，et al.Sustained activation of blood coagulation in patients with cerebral thrombosis.Am J Hematology，1995，50(3):155-160.
, 百拇医药
11 Yamazaki M，Vebiyama S，Maruyama S，et al.Activations of haemoˉstatic markers in various subtypes and phases of stroke.Blood coagula Fibrinolysis，1993，4(5):707-712.
作者单位:1 518033广东省深圳市福田区人民医院内科三、四病区
2 518033广东医学院深圳心肾疾病研究所
3 518033广东省深圳市福田区卫生局
(收稿日期:2003-07-21)
(编辑 秋实), http://www.100md.com(魏文斌)
关键词 脑栓塞 体外模拟血栓试验 血栓指数Q D-二聚体
【文献标识码】 A 【文章编号】 1680-6115(2003)11-0972-02
The primary study on the relationship between thrombosis in vitro
, 百拇医药
and the serum level of D-dimer of the patients with cerebral embolism
WeiWenbin，Luo Guohui，Zeng Lianyi，et al.
Futian District Hospital，Shenzhen，Guangdong518033.
【Abstract】 Objective To investigate the relation between the thrombosis and the blood D-dimer level of the patients with cerebral embolism in vitro.Methods The Imitating Thrombosis-Test(ITT)was performed using the standard method of
, 百拇医药
CAST in43adults with cerebral embolism and51healthy adults and the blood D-dimer in the different groups was also compared by the method of latex test.Results
The weight of imitating thrombi and thromˉbus index Q in cerebral embolism group was higher than that of control group(P<0.05)，but no prominent differˉence of the length of thrombi between two groups was shown(P>0.05).The blood D-dimer level was closely relatˉed to the age with the fact that D-dimer level in patients over40years old was much higher than those under40years old.Conclusion The ITT and blood D-dimer level are useful in assessing the risk of thrombus formation in vivo and in conducting the prevention and clinical treatment of cerebral embolism.
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Key words cerebral embolism imitating thrombosis-test thrombus index Q D-dimer
近年来，我国中风和心肌梗死等心脑血管性疾病的发病率、致残率和死亡率均呈日趋上升之势，死亡率二倍于恶性肿瘤，跃居诸病之首。患病人数超过6800万人，约占全国总人数的5.4%。每年死于中风等心脑血管性疾病的人数已超过250万人。体外模拟血栓试验，对心脑血管病人的诊断、治疗、预防和发病机理的研究，对血栓形成机制和血流动力学的阐明以及抗凝溶栓药物、活血化瘀中草药的药理研究和新药开发均有重要意义 [1] 。D-dimer是纤溶酶降解不溶性交联纤维蛋白时所产生的一种特异性降解产物 [2] ，血清D-dimer水平的增加间接反映了机体的高凝状态及血栓形成的风险。继发性纤溶活性增强时存在继发纤维蛋白溶解，故其降解产物可作为体内高凝状态、血栓形成和纤溶亢进的分子标志物之一[3]。本所从1998年起开展了体外模拟血栓试验和D-dimer检测，重点观察了不同年龄组血栓指数Q与血D-二聚体的水平，初步探讨不同年龄的脑梗塞患者的发病机理。
, 百拇医药
1 对象与方法
1.1 研究对象 脑栓塞病人组(全部按中华神经科学会 1995年制订的缺血性脑血管疾病的诊断标准 [4])43例，男29例，女14例，年龄31～69岁，平均(56±6)岁;按年龄段分为A、B两组，A组共17例，男12例，女5例，年龄31～40岁，平均(35±4)岁;B组共26例，男17例，女9例，年龄41～62岁，平均(54±7)岁;健康对照组51例，为随机抽取的我院体检科筛查出的正常个体，男30例，女21例，年龄35～65岁，平均(55±5)岁。
1.2 实验方法 (1)血栓试验使用上海医科大学生物力学研究中心研究的CAST式血栓仪，按标准摆动式旋转CAST法进行，实验时室温调节至18～25℃。该机采用体外模拟体内37℃恒温条件，血液在相当于中等大小血管的硅化管(直径为5.0mm)内流动状态下形成血栓，自动定时测定所得血栓长度和湿重，计算出血栓指数Q值，其计算公式为:血栓指数Q值=L/2+W 。(L:血栓长度mm，W:血栓湿重mg)。抽取受试者早晨空腹静脉血1min，立即注入硅化转环内，启动已预热好的CAST血栓仪，7min后仪器自动定时停止摆动旋转后，用镊子将硅化转环取出并将管中血液随同形成的血栓一起倒在滤纸上，用游标卡尺测量血栓长度(mm)，再用镊子将血栓在滤纸上滚动以吸去浮血及水份，然后放在已称重的胶片上用电子天平自动称重，按公式计算血栓指数Q值;(2)D-二聚体检测:采用美国太平洋公司(Pacific Hemostasis)的试剂盒(D-Dimer Assay)，每次均做阴性阳性对照，并依3min观察凝集反应决定稀释度，直到反应为阴性为止。计算半定量值。统计学方法:各测定参数以均数±标准差(ˉx±s)表示;健康对照组与脑栓塞病人组比较采用t检验。脑栓塞病人不同年龄组D-二聚体水平采用t检验。
, 百拇医药
2 结果
2.1 栓塞病人组的体外模拟血栓形成试验结果与健康组比较 结果表明，体外形成的血栓的长度差异不明显P>0.05，而湿重、血栓指数Q值差异均有显著性(P<0.05)，见表1。
表1 心脑血管病组与健康组血栓栓长、湿重、血栓指数Q比较 (略)
2.2 不同年龄组患者血D-二聚体的含量比较 结果表明，小于40岁组与大于40岁组的差异有非常显著性(P<0.01)，见表2。
表2 不同年龄组D-D水平略
3 讨论
血栓可发生在身体任何部位的血管内，静脉血栓较动脉血栓为多，约占20%～30%，微血栓更多，超过33% [5] ，血栓形成与心脑血管病密切相关。血栓形成的影响因素很多，它与血小板的聚集和促凝活性、凝血因子、抗凝及纤溶系统、全血粘弹性增高 [6] 、血流动力学改变及动脉粥样硬化 [7] 等引起的血管内皮细胞损伤的因素均有关。祖国医学浓、粘、凝、聚的理论 [8] 直观地描述了脑血栓的成因。人体内血栓形成很难直接观察到，从而给血栓及抗血栓的研究和疾病的防治带来困难。模拟血栓与人体血栓关系十分密切，通过模拟血栓形成来推断在心脑血管疾病发病期间患者体内血栓形成及其影响因素、血管阻塞程度以及预测在心脑血管疾病前期(潜伏期)体内隐性血栓的存在和发展，其临床意义是十分明显的。CAST仪检测模拟血栓形成时克服了由于血液湍流而引发的误差，采用摆动转体恒温块直接控温，控温精度达±0.2℃。用CAST仪形成的体外血栓与体内血栓有十分相似的结构，可分为头体尾三部分。
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血栓形成影响因素较多，血栓长度、湿重和血栓指数Q值属宏观综合性指标。本研究结果显示，脑栓塞病人的体外模拟血栓各项指标对了解血液宏观状况有很好的帮助。在急性缺血性脑血管病早期功能恢复过程中，伴随着凝血和纤溶的病理演变过程，其中纤溶酶促使交联的纤维蛋白降解，产生多种碎片，D-二聚体就是其中一种 [9]。Seki和Yamazaki [10，11] 等认为脑血栓形成发病过程中，体内凝血和 纤溶系统处于一定程度的持续活化状态。本文结果也显示模拟血栓湿重和Q值，脑血栓病人组和健康对照组有显著差异，但年龄大的患者D-二聚体水平较高，这是因为D-二聚体水平的改变还与动脉粥样硬化、病灶大小、血小板活化的程度等因素有关，这可能与老年人患有较多基础性疾病如动脉粥样硬化、高血压等有关。D-二聚体检验是将高度特异的单克隆抗体定向地以Fc段结合在胶乳颗粒上而将Fab朝向外周，这种结构的胶乳试剂能够非常灵敏快速地捕捉抗原而使其反应迅速，达到微量而快速准确的检测目的。通过这些指标的监测，对于缺血性脑血管病的预防、治疗和预后均有一定的帮助，且试验操作简单、灵敏度高、费用适中，很适合基层单位推广使用。
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参考文献
1 忻伟均.新药与临床，1993，12:69-71.
2 Hoffmeiser HM，Jur M.Wemdel HP，et al.Alterations of coagulation and fibrinolytic and kallikrein-kinin systems in the acute and post aˉcute phase in patients with unstable angina pectoris.Circulation，1995，91:2520.
3 黄国尉，王鸿利，张颖琪，等.中华医学检验杂志，1995，18:71.
4 中华神经科学会，中华神经外科学会.脑缺血疾病分类(1995).中华神经科杂志，1996，29(6):376-377.
, http://www.100md.com
5 Adbu RA，Zakbour BT，Dallis DJ.Mesenteric venous thrombosis.Surgery，1987，101:383.
6 Ross R.The pathogenesis of atherosclesis-anupdate.NewEng JMed，1986，314:488.
7 Toole JF.Cerebrovascular Disorder.3rd Ed.New York:Raven Press，1984，1-36.
8 胡伯成.体外血栓形成与血液流变学间的关系.医学生物物理学，1992，4:32-35.
9 李家增.血栓疾病.北京:科学技术出版社，1998，66-68.
10 Seki Y，Takabashi H，Wada K，et al.Sustained activation of blood coagulation in patients with cerebral thrombosis.Am J Hematology，1995，50(3):155-160.
, 百拇医药
11 Yamazaki M，Vebiyama S，Maruyama S，et al.Activations of haemoˉstatic markers in various subtypes and phases of stroke.Blood coagula Fibrinolysis，1993，4(5):707-712.
作者单位:1 518033广东省深圳市福田区人民医院内科三、四病区
2 518033广东医学院深圳心肾疾病研究所
3 518033广东省深圳市福田区卫生局
(收稿日期:2003-07-21)
(编辑 秋实), http://www.100md.com(魏文斌)