三种肺炎支原体血清学检测方法比较
【摘要】 目的 通过微量颗粒凝集法、酶联免疫吸附试验(ELISA)法及冷凝集试验(CAT)对呼吸道感染患儿血清肺炎支原体(MP)的检测，评估三种方法的应用价值。方法 对216例呼吸道患儿同时作冷凝集试验及颗粒凝集法、ELISA法检测其肺炎支原体的抗体IgM。结果 在172例临床诊断为MP感染的患儿中，颗粒凝集法阳性160例，敏感性93.0%，ELISA法阳性164例，敏感性95.3%，CAT阳性116例，敏感性67.4%。结论 颗粒凝集法与ELISA法敏感性较高，特异性较强，而CAT较差。
关键词 肺炎支原体 血清特异性抗体IgM 冷凝集试验
【文献标识码】 B 【文章编号】 1726-7587(2003)12-1119-02
肺炎支原体(Myocoplasima pneumonia，MP)是急性呼吸道感染的常见病原体之一。近年来，已成为小儿肺炎常见的病原体 [1] ，由其引起的呼吸感染日趋增多 [2] 。目前，实验室诊断方法主要依靠血清学。我们对2002年9月～2003年4月分院收治住院的呼吸道感染患儿进行微量颗粒凝集法(PA)和酶联免疫吸附法(ELISA)进行肺炎支原体抗体IgM的测试，并且同时检测冷凝集试验，现报告如下。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 对象 标本来源2002年10月～2003年4月就诊的呼吸道感染症状的分院儿科病房呼吸道感染患者216例。每例均于入院2天内抽血，。同时用间接血凝法和酶联免疫法检测MP-IgM抗体及冷凝集试验。
1.2 方法
1.2.1 微量颗粒凝集法(PA) 测MP-IgM抗体，试剂盒SERODIAS MYCO-H由FUJI REBIO INC提供。严格按说明书进行操作，每次均设阴、阳性对照，滴度≥1:80为阳性。
1.2.2 ELISA法 试剂由美国诊断自动化公司生产，上海领检科技公司提供，操作严格按说明书进行。
1.2.3 冷凝集试验(CAT) 按《临床医学检验》“冷凝集试验”进行操作，滴度≥1:64为阳性。
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2 结果
2.1 治疗结果 216例受检样品中，MP感染和非MP感染患儿MP三种结果比较见表1。
172例疑为MP感染的病例中，PA法阳性占93.0%，ELISA法占95.3%，CAT法占67.4%。在44例非MP感染中，PA法阳性占9.0%，ELISA法占11.3%，CAT法占13.6%。
表1 MP感染和非MP感染患儿MP三种结果比较 略
2.2 PA法、ELISA法、CAT三种检测方法比较 PA法敏感性93.0%，特异性90.9%，ELISA法敏感性95.3%，特异性88.6%，冷凝集试验敏感性67.4%，特异性86.3%。
3 讨论
小儿肺炎支原体感染的临床表现多种多样，可引起全身各脏器损害，但以呼吸道感染最为多见 [3] 。随着检测技术的提高，检出MP感染发病率明显增高，已受到人们的关注。目前，支原体肺炎的实验室诊断方法有支原体分离培养、特异性抗体检测、冷凝集试验及PCR等 [4] 。其中，这些试验中最为可靠的方法是取呼吸道分泌物做支原体培养，培养基上见煎蛋状菌落生长，即可确诊。但所需时间长，阳性率低，临床上不能快速诊断。PCR方法特异高，但需昂贵设备，不易普及。冷凝集试验虽然方法简单、易行，长期被认为诊断肺炎支原体的传统方法，但其敏感性和特异性均较差，是一种非特异方法，本文敏感性为67.4%，漏诊率较高，抗MP-IgM抗体是机体受MP感染最早出现的抗体，于发病1周左右开始升高，这对于1周的病程易造成漏诊。ELISA法检测MP-IgM敏感性和特异性分别为95.3%和88.6%，敏感性和特异性与微量颗粒凝集法接近，且重复性好，但操作较繁琐，且需要酶标仪等。颗粒凝集法用日本富士提供的试剂盒，运用表面吸附支原体抗原的明胶颗粒代替动物红细胞，消除了非特异性反应，且3h即能出报告。灵敏度和特异性分别为93.0%和90.0%，无需特殊仪器设备，即可操作，可作为支原体肺炎实验室诊断的常规检测，以利于早期做出诊断。
, 百拇医药
参考文献
1 Davis SF.Concurrent outbreaks of pertussis and Mycoplasma pneumonia
infection.Clin Infect Dis，1995，20:621.
2 王学枋，王晓红，赵国吕.小儿肺炎支原体96例临床分析.上海医科大学学报，19997，24(6):523.
3 张蓓，余晓刚，沈立崧.小儿肺炎支原体感染的血清学检测及临床应用.上海医学检验杂志，2001，16:35-36.
4 刘东旭.肺炎支原体感染检测诊断技术究近况.国外医学·内科学分册，1994，21(2):50-53.
作者单位:200002上海中医药大学附属曙光医院检验科
(收稿日期:2003-10-20)
(编辑 刘娜), 百拇医药(张珏)
关键词 肺炎支原体 血清特异性抗体IgM 冷凝集试验
【文献标识码】 B 【文章编号】 1726-7587(2003)12-1119-02
肺炎支原体(Myocoplasima pneumonia，MP)是急性呼吸道感染的常见病原体之一。近年来，已成为小儿肺炎常见的病原体 [1] ，由其引起的呼吸感染日趋增多 [2] 。目前，实验室诊断方法主要依靠血清学。我们对2002年9月～2003年4月分院收治住院的呼吸道感染患儿进行微量颗粒凝集法(PA)和酶联免疫吸附法(ELISA)进行肺炎支原体抗体IgM的测试，并且同时检测冷凝集试验，现报告如下。
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1 材料与方法
1.1 对象 标本来源2002年10月～2003年4月就诊的呼吸道感染症状的分院儿科病房呼吸道感染患者216例。每例均于入院2天内抽血，。同时用间接血凝法和酶联免疫法检测MP-IgM抗体及冷凝集试验。
1.2 方法
1.2.1 微量颗粒凝集法(PA) 测MP-IgM抗体，试剂盒SERODIAS MYCO-H由FUJI REBIO INC提供。严格按说明书进行操作，每次均设阴、阳性对照，滴度≥1:80为阳性。
1.2.2 ELISA法 试剂由美国诊断自动化公司生产，上海领检科技公司提供，操作严格按说明书进行。
1.2.3 冷凝集试验(CAT) 按《临床医学检验》“冷凝集试验”进行操作，滴度≥1:64为阳性。
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2 结果
2.1 治疗结果 216例受检样品中，MP感染和非MP感染患儿MP三种结果比较见表1。
172例疑为MP感染的病例中，PA法阳性占93.0%，ELISA法占95.3%，CAT法占67.4%。在44例非MP感染中，PA法阳性占9.0%，ELISA法占11.3%，CAT法占13.6%。
表1 MP感染和非MP感染患儿MP三种结果比较 略
2.2 PA法、ELISA法、CAT三种检测方法比较 PA法敏感性93.0%，特异性90.9%，ELISA法敏感性95.3%，特异性88.6%，冷凝集试验敏感性67.4%，特异性86.3%。
3 讨论
小儿肺炎支原体感染的临床表现多种多样，可引起全身各脏器损害，但以呼吸道感染最为多见 [3] 。随着检测技术的提高，检出MP感染发病率明显增高，已受到人们的关注。目前，支原体肺炎的实验室诊断方法有支原体分离培养、特异性抗体检测、冷凝集试验及PCR等 [4] 。其中，这些试验中最为可靠的方法是取呼吸道分泌物做支原体培养，培养基上见煎蛋状菌落生长，即可确诊。但所需时间长，阳性率低，临床上不能快速诊断。PCR方法特异高，但需昂贵设备，不易普及。冷凝集试验虽然方法简单、易行，长期被认为诊断肺炎支原体的传统方法，但其敏感性和特异性均较差，是一种非特异方法，本文敏感性为67.4%，漏诊率较高，抗MP-IgM抗体是机体受MP感染最早出现的抗体，于发病1周左右开始升高，这对于1周的病程易造成漏诊。ELISA法检测MP-IgM敏感性和特异性分别为95.3%和88.6%，敏感性和特异性与微量颗粒凝集法接近，且重复性好，但操作较繁琐，且需要酶标仪等。颗粒凝集法用日本富士提供的试剂盒，运用表面吸附支原体抗原的明胶颗粒代替动物红细胞，消除了非特异性反应，且3h即能出报告。灵敏度和特异性分别为93.0%和90.0%，无需特殊仪器设备，即可操作，可作为支原体肺炎实验室诊断的常规检测，以利于早期做出诊断。
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参考文献
1 Davis SF.Concurrent outbreaks of pertussis and Mycoplasma pneumonia
infection.Clin Infect Dis，1995，20:621.
2 王学枋，王晓红，赵国吕.小儿肺炎支原体96例临床分析.上海医科大学学报，19997，24(6):523.
3 张蓓，余晓刚，沈立崧.小儿肺炎支原体感染的血清学检测及临床应用.上海医学检验杂志，2001，16:35-36.
4 刘东旭.肺炎支原体感染检测诊断技术究近况.国外医学·内科学分册，1994，21(2):50-53.
作者单位:200002上海中医药大学附属曙光医院检验科
(收稿日期:2003-10-20)
(编辑 刘娜), 百拇医药(张珏)