中药冷饭团对四氯化碳致大鼠实验性肝损伤的保护作用观察
【摘要】 目的 观察冷饭团对大鼠实验性肝损伤的保护作用。方法 采用CCl 4 诱导大鼠慢性肝损伤模型，以联苯双酯作对照，检测各组大鼠肝功能、血清及肝组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果 冷饭团能显著降低实验性肝损伤大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性，降低肝组织MDA含量，提高肝组织及血清SOD水平。结论 冷饭团护肝降酶作用的机制可能与其抗脂质过氧化作用有关。
关键词 冷饭团 慢性肝损伤 丙二醛 超氧化物歧化酶 大鼠
【文献标识码】 A 【文章编号】 1680-077X(2004)01-0003-02
Kadsurae coccinea’s protective liver fuction on rats
models of experimental hepatic injury
, 百拇医药
Li Yan，Qu Keyi，Li Wensheng
Yi Ling Hospital of Yi chang City，Hubei443100
【Abstract】 Objective To observe the effect of Kadsurae coccinea protectiveliver fuction on rats models of experimental hepatic injury.Methods With rats models of chronic hepatic injury induced by CCl 4 ，compared to bifenclafe，rats liver function，the amount of serumMDA and liver tissue MDA，and the activity of SOD are determined respectively.Results Kadsurae coccinea can significantly lowerthe activity of serum ALT and AST in experimental hepatic injury rats，and can lower the content ofMDA in liver tissues and improve SOD level in liver tissue and serum.Conclusion The mechanism of Kadsurae coccinea’s liver protection and enzyme reduction is possibly comected to its fuction of inhibitory effect of fat super oxidation.
, 百拇医药
Key words Kadsurae coccinea chronic hepatic injury MDA SOD rats
冷饭团系木兰科植物冷饭团[Kadsura coccinea(Lem.)A.C.Smith]的根及藤茎，为民间常用草药，具有行气活血、消胀止痛、祛风活络之功效，用于治疗关节疼痛、劳伤腰痛、肝炎、腹胀、腹痛等症 [1] 。我们研究发现，冷饭团有较好的抗肝纤维化作用 [2] 。本实验从氧自由基方面探讨冷饭团的抗肝损伤作用及其机制。
1 材料与方法
1.1 药物与试剂 冷饭团，采自宜昌市夷陵区，切薄片，干燥，水煎2次，每次30min，滤过，合并滤液，置水浴上浓缩至1∶1(1ml含生药1g)。联苯双酯，上海天平制药厂生产，批号990110。四氯化碳(CCl 4 )，郑州化学试剂二厂生产，批号980906。MDA、SOD试剂盒，由南京建成生物制品研究所提供。
, 百拇医药
1.2 动物及造模 Wistar大鼠，雌雄兼用，体重(180±20)g，由华中科技大学同济医学院医学实验动物中心提供。除正常对照组外，其余各鼠均按0.3ml/100g体重皮下注射40%CCl4 橄榄油溶液，每周2次，共6周。在整个实验中，正常大鼠饲以全价颗粒饲料，其余各鼠均以饲料配方一(79.5%纯玉米粉+20%猪油+0.5%胆固醇压制成颗粒饲料)喂养2周，继以饲料配方二(89.5%纯玉米粉+10%猪油+0.5%胆固醇压制成颗粒饲料)喂养至第6周末。另以30%乙醇按1ml/100g灌胃，每周2次，共6周。
1.3 分组及给药 将实验动物随机分成5组。正常组和模型组分别以生理盐水5ml/kg灌胃，造模后，冷饭团低剂量组以冷饭团3g/kg灌胃，冷饭团高剂量组以冷饭团5g/kg灌胃，联苯双酯组以联苯双酯25mg/kg灌胃。各组均从实验第2天开始给药，每日1次，共6周。
1.4 检测指标及方法 于实验第43天，击昏大鼠、断头取血5ml，离心分取血清。剖腹，取肝左叶组织约1g，用冰冷生理盐水冲洗后称重，加冰生理盐水制成10%肝组织匀浆，离心分取上清液。按试剂盒内说明方法，检测大鼠血清ALT、AST及血清和肝组织MDA、SOD活性。
, 百拇医药
1.5 统计学处理 数据用均数±标准差(X±s)来表示，采用t检验。
2 结果
2.1 对大鼠血清ALT和AST活性的影响 大鼠造模后，血清ALT和AST活性显著升高。冷饭团和联苯双酯均能使升高的肝功能指标恢复至接近正常水平。见表1。表1 对各组大鼠ALT、AST活性的影响(略)注:与模型组比较 ˇ P<0.05， ˇˇ P<0.01， ˇˇˇ P<0.001
2.2 对大鼠血清及肝
组织MDA含量的影响 模型组大鼠肝组织MDA含量显著升高，而冷饭团5g/kg剂量和联苯双酯均能显著对抗肝损伤大鼠肝组织MDA含量的升高。见表2。表2 对各组大鼠MDA含量的影响(略) 注:与模型组比较 ˇ P<0.05， ˇˇ P<0.01， ˇˇˇ P<0.001
, 百拇医药 2.3 对大鼠血清
及肝组织SOD活性的影响 冷饭团和联苯双酯均能显著提高慢性肝损伤大鼠肝组织SOD活性，冷饭团5g/kg剂量还能升高大鼠血清SOD水平。见表3。表3 对各组大鼠SOD活性的影响(略)注:与模型组比较 ˇ P<0.05， ˇˇ P<0.01
3 讨论
CCl 4 对肝毒性损伤是由于CCl 4经肝细胞微粒体内细胞色素P 450 代谢成三氯甲基自由基，并在其启动的过氧化连锁反应中，产生毒性作用更强的超氧阴离子和氢氧离子，这些自由基通过脂质过氧化作用损伤肝细胞。脂质过氧化反应也可直接或通过醛的过氧化产物作用于贮脂细胞，或通过激活枯否细胞释放细胞因子如转化生长因子β 1 作用于贮脂细胞，增加胶原生成，最终导致肝纤维化 [3] 。本实验结果表明，大鼠经CCl 4 等复合因素刺激6周后，其肝组织MDA含量显著升高。MDA是脂质过氧化的主要降解产物，可严重损伤细胞膜的结构，导致肝细胞坏死。冷饭团能明显降低慢性肝损伤大鼠肝组织MDA含量，提高血清及肝组织SOD活性，减少氧自由基生成和加快自由基的清除，从而减轻氧自由基对肝细胞的损伤。冷饭团的这种抗脂质过氧化作用，可能是其抗慢性肝损伤的作用机制之一。
, 百拇医药
参考文献
1 湖北省卫生厅.湖北中草药志(2)，武汉:湖北人民出版社，1982，492.
2 屈克义，黄继海，李文胜，等.冷饭团抗肝纤维化的实验研究.中国中西医结合消化杂志，2001，9(2):86.
3 Britton RS，Bacon BR.Role of free radicals in liver dieases and hepatic fibrosis.Hepato-Gastroenterology，1994，41:343.
(收稿日期:2003-08-18)
作者单位:443100湖北省宜昌市夷陵医院
(编辑清 泉), 百拇医药(李 艳 屈克义 李文胜)
关键词 冷饭团 慢性肝损伤 丙二醛 超氧化物歧化酶 大鼠
【文献标识码】 A 【文章编号】 1680-077X(2004)01-0003-02
Kadsurae coccinea’s protective liver fuction on rats
models of experimental hepatic injury
, 百拇医药
Li Yan，Qu Keyi，Li Wensheng
Yi Ling Hospital of Yi chang City，Hubei443100
【Abstract】 Objective To observe the effect of Kadsurae coccinea protectiveliver fuction on rats models of experimental hepatic injury.Methods With rats models of chronic hepatic injury induced by CCl 4 ，compared to bifenclafe，rats liver function，the amount of serumMDA and liver tissue MDA，and the activity of SOD are determined respectively.Results Kadsurae coccinea can significantly lowerthe activity of serum ALT and AST in experimental hepatic injury rats，and can lower the content ofMDA in liver tissues and improve SOD level in liver tissue and serum.Conclusion The mechanism of Kadsurae coccinea’s liver protection and enzyme reduction is possibly comected to its fuction of inhibitory effect of fat super oxidation.
, 百拇医药
Key words Kadsurae coccinea chronic hepatic injury MDA SOD rats
冷饭团系木兰科植物冷饭团[Kadsura coccinea(Lem.)A.C.Smith]的根及藤茎，为民间常用草药，具有行气活血、消胀止痛、祛风活络之功效，用于治疗关节疼痛、劳伤腰痛、肝炎、腹胀、腹痛等症 [1] 。我们研究发现，冷饭团有较好的抗肝纤维化作用 [2] 。本实验从氧自由基方面探讨冷饭团的抗肝损伤作用及其机制。
1 材料与方法
1.1 药物与试剂 冷饭团，采自宜昌市夷陵区，切薄片，干燥，水煎2次，每次30min，滤过，合并滤液，置水浴上浓缩至1∶1(1ml含生药1g)。联苯双酯，上海天平制药厂生产，批号990110。四氯化碳(CCl 4 )，郑州化学试剂二厂生产，批号980906。MDA、SOD试剂盒，由南京建成生物制品研究所提供。
, 百拇医药
1.2 动物及造模 Wistar大鼠，雌雄兼用，体重(180±20)g，由华中科技大学同济医学院医学实验动物中心提供。除正常对照组外，其余各鼠均按0.3ml/100g体重皮下注射40%CCl4 橄榄油溶液，每周2次，共6周。在整个实验中，正常大鼠饲以全价颗粒饲料，其余各鼠均以饲料配方一(79.5%纯玉米粉+20%猪油+0.5%胆固醇压制成颗粒饲料)喂养2周，继以饲料配方二(89.5%纯玉米粉+10%猪油+0.5%胆固醇压制成颗粒饲料)喂养至第6周末。另以30%乙醇按1ml/100g灌胃，每周2次，共6周。
1.3 分组及给药 将实验动物随机分成5组。正常组和模型组分别以生理盐水5ml/kg灌胃，造模后，冷饭团低剂量组以冷饭团3g/kg灌胃，冷饭团高剂量组以冷饭团5g/kg灌胃，联苯双酯组以联苯双酯25mg/kg灌胃。各组均从实验第2天开始给药，每日1次，共6周。
1.4 检测指标及方法 于实验第43天，击昏大鼠、断头取血5ml，离心分取血清。剖腹，取肝左叶组织约1g，用冰冷生理盐水冲洗后称重，加冰生理盐水制成10%肝组织匀浆，离心分取上清液。按试剂盒内说明方法，检测大鼠血清ALT、AST及血清和肝组织MDA、SOD活性。
, 百拇医药
1.5 统计学处理 数据用均数±标准差(X±s)来表示，采用t检验。
2 结果
2.1 对大鼠血清ALT和AST活性的影响 大鼠造模后，血清ALT和AST活性显著升高。冷饭团和联苯双酯均能使升高的肝功能指标恢复至接近正常水平。见表1。表1 对各组大鼠ALT、AST活性的影响(略)注:与模型组比较 ˇ P<0.05， ˇˇ P<0.01， ˇˇˇ P<0.001
2.2 对大鼠血清及肝
组织MDA含量的影响 模型组大鼠肝组织MDA含量显著升高，而冷饭团5g/kg剂量和联苯双酯均能显著对抗肝损伤大鼠肝组织MDA含量的升高。见表2。表2 对各组大鼠MDA含量的影响(略) 注:与模型组比较 ˇ P<0.05， ˇˇ P<0.01， ˇˇˇ P<0.001
, 百拇医药 2.3 对大鼠血清
及肝组织SOD活性的影响 冷饭团和联苯双酯均能显著提高慢性肝损伤大鼠肝组织SOD活性，冷饭团5g/kg剂量还能升高大鼠血清SOD水平。见表3。表3 对各组大鼠SOD活性的影响(略)注:与模型组比较 ˇ P<0.05， ˇˇ P<0.01
3 讨论
CCl 4 对肝毒性损伤是由于CCl 4经肝细胞微粒体内细胞色素P 450 代谢成三氯甲基自由基，并在其启动的过氧化连锁反应中，产生毒性作用更强的超氧阴离子和氢氧离子，这些自由基通过脂质过氧化作用损伤肝细胞。脂质过氧化反应也可直接或通过醛的过氧化产物作用于贮脂细胞，或通过激活枯否细胞释放细胞因子如转化生长因子β 1 作用于贮脂细胞，增加胶原生成，最终导致肝纤维化 [3] 。本实验结果表明，大鼠经CCl 4 等复合因素刺激6周后，其肝组织MDA含量显著升高。MDA是脂质过氧化的主要降解产物，可严重损伤细胞膜的结构，导致肝细胞坏死。冷饭团能明显降低慢性肝损伤大鼠肝组织MDA含量，提高血清及肝组织SOD活性，减少氧自由基生成和加快自由基的清除，从而减轻氧自由基对肝细胞的损伤。冷饭团的这种抗脂质过氧化作用，可能是其抗慢性肝损伤的作用机制之一。
, 百拇医药
参考文献
1 湖北省卫生厅.湖北中草药志(2)，武汉:湖北人民出版社，1982，492.
2 屈克义，黄继海，李文胜，等.冷饭团抗肝纤维化的实验研究.中国中西医结合消化杂志，2001，9(2):86.
3 Britton RS，Bacon BR.Role of free radicals in liver dieases and hepatic fibrosis.Hepato-Gastroenterology，1994，41:343.
(收稿日期:2003-08-18)
作者单位:443100湖北省宜昌市夷陵医院
(编辑清 泉), 百拇医药(李 艳 屈克义 李文胜)