肝毒清颗粒对硫代乙酰胺实验性急性肝损伤的保护作用
【摘要】 目的 观察肝毒清颗粒的保肝作用。方法 选用雄性Wistar大鼠36只，随机分为6组，即空白对照组，模型组，肝毒清颗粒大、中、小剂量组，乙肝宁阳性对照组。用硫代乙酰胺复制急性肝损伤模型。检测血清的ALT、AST活性和血浆内毒素含量。结果 硫代乙酰胺急性肝损伤时，血清ALT、AST活性及内毒素含量明显增高，与空白对照组比较差异有显著性(P<0.05);而肝毒清颗粒大、中剂量组和阳性对照组均能明显降低血浆内毒素含量和血清ALT、AST活性，与模型组比较差异有显著性(P<0.05)。结论 肝毒清颗粒能减轻急性肝损伤时的肝损害，对肝脏起到保护作用。
关键词 肝毒清 硫代乙酰胺 肝损伤
【文献标识码】 A 【文章编号】 1609-6614(2003)04-0295-02
The protective effect of GanDuQing granule on experimental
, 百拇医药
acute hepatic injury by thioacetabmide
Li Wanping，Wei Mei，Xiao Shunhan，et al.
Department of Pharmacology，The Medical College of Luzhou，Sichuan646000.
【Abstract】 Objective To observe the protective effect of GanDuQing granule on acute hepatic injury.Methˉods Thirty-six male Wistar rats were divided into6groups，namely normal control group，model group，GanDuQing larger，middle，small dose groups and YiGanNing positive group.Acute hepatic injury induced by thioacetamide.The changes of blood serum ALT，AST activity and plasma endotoxin level were measured.Results Plasma endotoxin level and blood serum ALT，AST levels were significantly higher than those of normal control group(P<0.05).But blood serum ALT，AST activity and plasma endotoxin level in GanDuQing granule large，middle dose groups and YiGanNing positive group decreased significantly compared with that of model group.Conclusion GanDuQing granule can reduce the hepatic injury and protect the liver when the liver was injured.
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Key words GanDuQing thioacetamide hepatic injury
肝毒清颗粒是由治疗乙型肝炎的经验方精制而成，本实验旨在用硫代乙酰胺复制急性肝损伤模型，以观察肝毒清颗粒的保肝作用。
1 材料与方法
1.1 材料 (1)药物:①肝毒清颗粒，10g(生药)/包，由泸州医学院附属医院制剂中心提供。②硫代乙酰胺(Thioacˉetamide，TAA)，由北京化学试剂三厂提供。③乙醚，天津市化学试剂三厂生产，批号20010108。④半宙乙肝宁，17g(生药)/包，由广西半宙制药公司生产，桂卫药准字1990第079023号。⑤鲎试剂药盒，由上海市医学化验所提供，批号200203。(2)动物:Wistar雄性大鼠36只，由四川省动物研究所提供，体重180～220g。
1.2 方法 将大鼠随机分成6组，每组6只，即肝毒清颗粒治疗大、中、小剂量组，模型组，乙肝宁阳性对照组，空白对照组。肝毒清颗粒治疗大、中、小剂量组分别为0.5g(生药)/100g、0.25g(生药)/100g、0.125g(生药)/100g(相当于临 床用量的10倍、5倍、2.5倍)，阳性对照组用半宙乙肝宁冲剂0.85g(生药)/100g(相当于临床用量的10倍)，临用时用温蒸馏水分别配成一定浓度于每日晨按0.8ml/100g灌胃，为排除灌胃对动物食欲的影响，模型组和空白对照组给予等量蒸馏水，连续给药7天，实验期间动物正常饮水，以标准颗粒饲料喂养。在第5天下午，对治疗各组、模型组和阳性对照组给予硫代乙酰胺300mg/kg腹腔注射，注射后观察动物的一般情况。于36h后将大鼠用乙醚麻醉，打开腹腔，从腹主动脉取血检查ALT、AST和内毒素含量，并取肝组织作病理切片检查。血浆内毒素的测定采用鲎试剂法。氨基酸转移酶的测定采用赖氏法。
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1.3 统计处理 采用SPSS10.0通用软件进行方差分析。方差分析显著时用SNK法，方差不齐用Tambane’s T2法。
2 结果
2.1 肝毒清颗粒对大鼠血清中ALT、AST水平及血浆内毒素含量的影响，见表1。
表1 肝毒清颗粒对血清ALT、AST及血浆内毒素含量的影响 注:与空白组比较ˇP<0.05，与模型组比较#P<0.05
2.2 肝脏病理改变 肉眼观:模型组肝脏出血较明显，其他各组未见明显改变。光电显微镜下:空白对照组肝组织结构清楚，肝细胞无变性、坏死、出血和再生。模型组结构大部分破坏，肝细胞变性、坏死、出血明显，肝细胞再生不明显。肝毒清颗粒大剂量组肝组织结构较清楚，肝细胞见灶性坏死，再生明显;中剂量组肝细胞见片状变性、坏死较轻微，再生较明显;小剂量组肝细胞变性、坏死、出血较明显，肝细胞少量再生。而阳性对照组肝组织结构清楚，肝细胞变性、坏死、出血基本不出现，再生不明显。
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3 讨论
TAA是一种肝毒性药物，TAA进入人体内被摄取后，可经肝细胞内细胞色素P450混合功能氧化酶代谢为TAA-硫氧化物，后者进一步代谢为中间代谢产物及其他极性分子，并与肝脏大分子物质结合，引起肝细胞功能的改变继而坏死 [1] 。TAA具有直接肝毒性作用，可使血清ALT、AST明显增高，同时伴有对枯否细胞的损害，致使枯否细胞吞噬功能降低，血浆内毒素水平升高形成肠源性内毒素血症。且有研究发现肠源性内毒素血症是更为主要的致肝损伤因素 [2，3] 。
在应用中草药治疗内毒素血症的研究中，基本上遵循祖国医学的清热解毒为主，攻里通下、活血化瘀为辅的原则 [4] ，肝毒清颗粒正是遵循了这一原则。从本实验我们观察到，模型组的ALT、AST及内毒素含量明显增高。肝毒清颗粒各组均能明显降低TAA所致的ALT、AST的水平，大、中剂量能明显降低内毒素的含量。表明肝毒清颗粒能减轻TAA的肝损伤作用，减少肠源性内毒素的吸收，对肝脏起到较好的保护作用。
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参考文献
1 Nozu F，Takeyama N，Tanaka T.Changes of hepatic fatty acid metabolism produced by chronic thioacetamide administration in rats.Hepatology，1992，15:1099-1106.
2 刘立新，韩德五，任大宾.肠源性内毒素血症在硫代乙酰胺所致肝损伤发病中的作用.中华肝病杂志，2000，8(3):174-175.
3 任大宾，韩德五，赵元昌.急性肝衰竭时肠源性内毒素血症对肝脏能量代谢的影响.中国病理生理杂志，2001，17(9):890-892.
4 魏嵋，刘鹏，张光海，等.解毒口服液对大鼠实验性肝损伤内毒素血症的防护作用.中西结合肝病杂志，1998，8(3):156-158.
(收稿日期:2003-02-28)
作者单位:646000四川省泸州医学院药理学教研室
(编辑浮 萍), http://www.100md.com(李万平 魏嵋 肖顺汉 陈美娟 李华 李亮)
关键词 肝毒清 硫代乙酰胺 肝损伤
【文献标识码】 A 【文章编号】 1609-6614(2003)04-0295-02
The protective effect of GanDuQing granule on experimental
, 百拇医药
acute hepatic injury by thioacetabmide
Li Wanping，Wei Mei，Xiao Shunhan，et al.
Department of Pharmacology，The Medical College of Luzhou，Sichuan646000.
【Abstract】 Objective To observe the protective effect of GanDuQing granule on acute hepatic injury.Methˉods Thirty-six male Wistar rats were divided into6groups，namely normal control group，model group，GanDuQing larger，middle，small dose groups and YiGanNing positive group.Acute hepatic injury induced by thioacetamide.The changes of blood serum ALT，AST activity and plasma endotoxin level were measured.Results Plasma endotoxin level and blood serum ALT，AST levels were significantly higher than those of normal control group(P<0.05).But blood serum ALT，AST activity and plasma endotoxin level in GanDuQing granule large，middle dose groups and YiGanNing positive group decreased significantly compared with that of model group.Conclusion GanDuQing granule can reduce the hepatic injury and protect the liver when the liver was injured.
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Key words GanDuQing thioacetamide hepatic injury
肝毒清颗粒是由治疗乙型肝炎的经验方精制而成，本实验旨在用硫代乙酰胺复制急性肝损伤模型，以观察肝毒清颗粒的保肝作用。
1 材料与方法
1.1 材料 (1)药物:①肝毒清颗粒，10g(生药)/包，由泸州医学院附属医院制剂中心提供。②硫代乙酰胺(Thioacˉetamide，TAA)，由北京化学试剂三厂提供。③乙醚，天津市化学试剂三厂生产，批号20010108。④半宙乙肝宁，17g(生药)/包，由广西半宙制药公司生产，桂卫药准字1990第079023号。⑤鲎试剂药盒，由上海市医学化验所提供，批号200203。(2)动物:Wistar雄性大鼠36只，由四川省动物研究所提供，体重180～220g。
1.2 方法 将大鼠随机分成6组，每组6只，即肝毒清颗粒治疗大、中、小剂量组，模型组，乙肝宁阳性对照组，空白对照组。肝毒清颗粒治疗大、中、小剂量组分别为0.5g(生药)/100g、0.25g(生药)/100g、0.125g(生药)/100g(相当于临 床用量的10倍、5倍、2.5倍)，阳性对照组用半宙乙肝宁冲剂0.85g(生药)/100g(相当于临床用量的10倍)，临用时用温蒸馏水分别配成一定浓度于每日晨按0.8ml/100g灌胃，为排除灌胃对动物食欲的影响，模型组和空白对照组给予等量蒸馏水，连续给药7天，实验期间动物正常饮水，以标准颗粒饲料喂养。在第5天下午，对治疗各组、模型组和阳性对照组给予硫代乙酰胺300mg/kg腹腔注射，注射后观察动物的一般情况。于36h后将大鼠用乙醚麻醉，打开腹腔，从腹主动脉取血检查ALT、AST和内毒素含量，并取肝组织作病理切片检查。血浆内毒素的测定采用鲎试剂法。氨基酸转移酶的测定采用赖氏法。
, http://www.100md.com
1.3 统计处理 采用SPSS10.0通用软件进行方差分析。方差分析显著时用SNK法，方差不齐用Tambane’s T2法。
2 结果
2.1 肝毒清颗粒对大鼠血清中ALT、AST水平及血浆内毒素含量的影响，见表1。
表1 肝毒清颗粒对血清ALT、AST及血浆内毒素含量的影响 注:与空白组比较ˇP<0.05，与模型组比较#P<0.05
2.2 肝脏病理改变 肉眼观:模型组肝脏出血较明显，其他各组未见明显改变。光电显微镜下:空白对照组肝组织结构清楚，肝细胞无变性、坏死、出血和再生。模型组结构大部分破坏，肝细胞变性、坏死、出血明显，肝细胞再生不明显。肝毒清颗粒大剂量组肝组织结构较清楚，肝细胞见灶性坏死，再生明显;中剂量组肝细胞见片状变性、坏死较轻微，再生较明显;小剂量组肝细胞变性、坏死、出血较明显，肝细胞少量再生。而阳性对照组肝组织结构清楚，肝细胞变性、坏死、出血基本不出现，再生不明显。
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3 讨论
TAA是一种肝毒性药物，TAA进入人体内被摄取后，可经肝细胞内细胞色素P450混合功能氧化酶代谢为TAA-硫氧化物，后者进一步代谢为中间代谢产物及其他极性分子，并与肝脏大分子物质结合，引起肝细胞功能的改变继而坏死 [1] 。TAA具有直接肝毒性作用，可使血清ALT、AST明显增高，同时伴有对枯否细胞的损害，致使枯否细胞吞噬功能降低，血浆内毒素水平升高形成肠源性内毒素血症。且有研究发现肠源性内毒素血症是更为主要的致肝损伤因素 [2，3] 。
在应用中草药治疗内毒素血症的研究中，基本上遵循祖国医学的清热解毒为主，攻里通下、活血化瘀为辅的原则 [4] ，肝毒清颗粒正是遵循了这一原则。从本实验我们观察到，模型组的ALT、AST及内毒素含量明显增高。肝毒清颗粒各组均能明显降低TAA所致的ALT、AST的水平，大、中剂量能明显降低内毒素的含量。表明肝毒清颗粒能减轻TAA的肝损伤作用，减少肠源性内毒素的吸收，对肝脏起到较好的保护作用。
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参考文献
1 Nozu F，Takeyama N，Tanaka T.Changes of hepatic fatty acid metabolism produced by chronic thioacetamide administration in rats.Hepatology，1992，15:1099-1106.
2 刘立新，韩德五，任大宾.肠源性内毒素血症在硫代乙酰胺所致肝损伤发病中的作用.中华肝病杂志，2000，8(3):174-175.
3 任大宾，韩德五，赵元昌.急性肝衰竭时肠源性内毒素血症对肝脏能量代谢的影响.中国病理生理杂志，2001，17(9):890-892.
4 魏嵋，刘鹏，张光海，等.解毒口服液对大鼠实验性肝损伤内毒素血症的防护作用.中西结合肝病杂志，1998，8(3):156-158.
(收稿日期:2003-02-28)
作者单位:646000四川省泸州医学院药理学教研室
(编辑浮 萍), http://www.100md.com(李万平 魏嵋 肖顺汉 陈美娟 李华 李亮)