稳定表达结核分枝杆菌38抗原的EL-4细胞株的建立及鉴定
结核分枝杆菌|38抗原|EL-4细胞株,关键词：
参见附件(256kb)。
康林；王庆敏；胡振林；周凤娟；王磊；孙树汉 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室 上海200433；河北医科大学解剖教研室 石家庄050017；海军医学研究所舰艇卫生研究室 第二军医大学学报 2003 11
关键词：结核分枝杆菌；38抗原；EL-4细胞株
将结核分枝杆菌的38抗原基因片段经PCR方法扩增并插入到pcDNA3真核表达载体中,通过脂质体转染EL-4细胞,经G418筛选,用RT-PCR方法和ELISA方法检测整合和表达情况。结果成功地构建了pcDNA3-38抗原重组质粒,转染细胞中可检测到38抗原的存在,PCR扩增也证实38抗原基因已稳定整合于EL-4细胞的染色体中。本实验为今后在小鼠体内检测结核DNA疫苗激发的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应奠定了基础。
关键词：结核分枝杆菌；38抗原；EL-4细胞株
将结核分枝杆菌的38抗原基因片段经PCR方法扩增并插入到pcDNA3真核表达载体中,通过脂质体转染EL-4细胞,经G418筛选,用RT-PCR方法和ELISA方法检测整合和表达情况。结果成功地构建了pcDNA3-38抗原重组质粒,转染细胞中可检测到38抗原的存在,PCR扩增也证实38抗原基因已稳定整合于EL-4细胞的染色体中。本实验为今后在小鼠体内检测结核DNA疫苗激发的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应奠定了基础。
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