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编号:10421660
人胚生殖嵴干细胞多能性调节基因Oct4的克隆及其在大肠杆菌中的表达(英文)
http://www.100md.com 2004年6月24日 刘善荣;王庆敏;杨玲;汤淑萍;惠宁;蒋正;戚中田;刘厚奇
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     刘善荣;王庆敏;杨玲;汤淑萍;惠宁;蒋正;戚中田;刘厚奇 第二军医大学长海医院妇产科;第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室 上海200433 第二军医大学学报 2003 9

    关键词:生殖嵴干细胞;Oct4;基因克隆;基因表达

    目的:克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4 ,并使其在大肠杆菌中表达。方法:取4~6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜,利用RT PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA ,并插入到原核表达载体pGEX5T中,构建成pGEX5T Oct4重组质粒。β硫代半乳糖苷(IPTG)诱导使该基因在k80 2菌中表达。结果:用PCR方法扩增获得大小约1 .1kb条带;全自动测序与GenBank中登录的序列97%同源。获得了pGEX5T Oct4重组子并在k80 2菌中获得了表达,SDS PAGE分析有一特异性的6 2 0 0 0条带。结论:扩增和克隆了人胚生殖系细胞多能性调节蛋白Oct4全长cDNA并在大肠杆菌中获得表达,为进一步研究人...

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