人正、反义转化生长因子beta1基因真核表达载体的构建

http://www.100md.com 2004年6月24日 袁芳；段绍斌；刘伏友；彭佑铭；刘映红；李军；黄亮群；夏家辉

转化生长因子β|RNa|反义|基因疗法,人正、反义转化生长因子BETa1基因真核表达载体的构建,关键词：

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     袁芳；段绍斌；刘伏友；彭佑铭；刘映红；李军；黄亮群；夏家辉 中南大学湘雅二医院肾内科 长沙410011；中南大学医学遗传学国家重点实验室 长沙410078 湖南医科大学学报 2003 5

    关键词：转化生长因子β；RNA；反义；基因疗法

    目的:构建人转化生长因子beta 1(TGFβ1)正、反义基因真核表达载体。方法:从人胎脑的cDNA文库中扩增出TGFβ1共12 84bp长的DNA片段后,与T载体直接进行高效连接,并测序证实无突变。接着利用TGFβ1引物两端所设计的酶切位点将目的片段定向亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1( )。构建的正反义表达重组体(pcDNA3.1 TGFβ1和pcDNA3.1 antiTGFβ1)经限制性内切酶消化证实其中有目的片段完整插入。结果:本实验成功构建了人正、反义TGFβ1基因真核表达载体。结论:人正、反义TGFβ1基因真核表达载体的构建,为今后研究腹膜纤维化的防治奠定了实验基础。

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