BDNF基因逆转录表达载体的构建和在淋巴细胞中的表达
逆转录表达载体|脑源性神经营养因子|淋巴细胞,关键词：
参见附件(750kb)。
唐小卿；冯鉴强；周继斌；郭瑞鲜；李平阳；叶美红 中山大学中山医学院生理学教研室 广东广州510080 中山大学学报 2003 5
关键词：逆转录表达载体；脑源性神经营养因子；淋巴细胞
【目的】构建含脑源性神经营养因子基因(brain-derived neurotrophic factor,BDNFgene)逆转录表达载体并了解其在淋巴细胞中的表达,探讨治疗基因的非损伤性脑内转移的新途径。【方法】用RT-PCR方法从大鼠海马组织总RNA中扩增(cDNA)BDNF片段,应用基因重组技术将大鼠(cDNA)BDNF克隆到逆转录病毒载体pLXSN中,用限制性内切酶酶切分析和DNA测序对重组质粒进行鉴定,采用LipofectAMINE将重组大鼠(cDNA)BDNF导入PA317细胞,获取高滴度的病毒上清转染大鼠淋巴细胞,应用流式细胞仪(FCM)检测大鼠淋巴细胞BDNF的表达,噻唑蓝(MTT)法检测淋巴细胞培养上清对PC12细胞增殖...
关键词：逆转录表达载体；脑源性神经营养因子；淋巴细胞
【目的】构建含脑源性神经营养因子基因(brain-derived neurotrophic factor,BDNFgene)逆转录表达载体并了解其在淋巴细胞中的表达,探讨治疗基因的非损伤性脑内转移的新途径。【方法】用RT-PCR方法从大鼠海马组织总RNA中扩增(cDNA)BDNF片段,应用基因重组技术将大鼠(cDNA)BDNF克隆到逆转录病毒载体pLXSN中,用限制性内切酶酶切分析和DNA测序对重组质粒进行鉴定,采用LipofectAMINE将重组大鼠(cDNA)BDNF导入PA317细胞,获取高滴度的病毒上清转染大鼠淋巴细胞,应用流式细胞仪(FCM)检测大鼠淋巴细胞BDNF的表达,噻唑蓝(MTT)法检测淋巴细胞培养上清对PC12细胞增殖...
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