中药1号雾化吸入对主动吸烟小鼠的抗氧化作用及体重影响
【摘要】 目的 观察中药1号雾化吸入对主动吸烟小鼠的抗氧化作用及体重、脏器系数的影响。方法 小鼠主动吸烟30天，其中后15天雾化吸入中药1号，比较各组血清、肺组织SOD活性和MDA含量以及体重、脏器系数改变。结果 雾化吸入中药1号可显著提高吸烟小鼠血清、肺组织SOD活力，并降低血清MDA含量，高、中剂量组尚可使肺组织MDA含量明显降低(P<0.01，P<0.05);药物组小鼠体重增加值高于吸烟组，其中中、低剂量组增加值有统计学意义(P<0.01)。结论 中药1号对主动吸烟小鼠有一定的抗氧化与恢复体重作用。
关键词 中药1号 主动吸烟 SOD MDA 体重
【文献标识码】 B 【文章编号】 1606-8106(2004)03-0246-03
香烟燃烧可产生多种化学物质对人体造成损害，包括某些致癌物质和自由基。有资料显示，一口烟中约含有5×10 4 个自由基，一支烟的烟雾中，自由基则约达1×10 15 个 [1] 。因此，普遍认为自由基的氧化损伤是吸烟有害健康的主要机制之一，抑制自由基的生成有助于减轻吸烟对人体的损害。本实验以雾化吸入的方式，观察中药1号对主动吸烟小鼠血清和肺组织SOD、MDA的影响，评价其抗氧化作用，同时观察用药前后吸烟小鼠体重的变化，以期能为临床减低吸烟危害提供一定的指导。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 药品与试剂 中药1号(100%，10 3 g/L)，皖南医学院中西医结合研究所提供;样品烟(每支焦油含量8mg，烟气烟碱含量1.0mg)，安徽芜湖卷烟厂。SOD测试盒，批号20030702;MDA测试盒，批号20030618;考马斯亮兰蛋白测试盒，批号20030630，南京建成生物工程研究所，其它试剂均为分析纯。
1.2 动物 昆明种小鼠70只，体重(20±2)g，雌雄各半，皖南医学院动物中心提供。
1.3 主要仪器 自制主动吸烟箱(50cm×50cm×100cm) [2，3] ;动物人工呼吸机(DW-2000型)，上海嘉鹏科技有限公司;S-888E超声波雾化器，中外合资南京道芬电子有限公司;XD811生化分析仪，上海讯达医疗仪器公司;TGL-16G-A冷冻离心机，上海安亭科学仪器厂;玻璃匀浆管，南京建成生物工程研究。
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1.4 实验方法
1.4.1 分组与给药 动物适应性喂养1周，随机均分5组， 按文献 [4，5] 及预试结果设置如下剂量组:空白对照组(NS+等量空气)、样品烟+NS组、样品烟+药物高(20.00g·kg-1 ·d -1 )、中(6.80g·kg -1 ·d -1 )、低(2.27g·kg -1 ·d -1 )剂量组。各组每天吸烟2次，每次2支，空白对照组吸入等量空气，计30d。其中，高、中、低剂量组吸烟15d后按上述剂量设置再加吸中药1号(雾化吸入)，持续15d;样品烟+NS组对照雾化吸入20ml NS。
1.4.2 观察指标 记录吸烟前、后7、15、22、30d体重;末次吸烟次日每组各取8只(雌雄各半)于眼球取血，3500rpm离心10min，取血清2℃～4℃冷藏;剪取肺脏，称重后研磨制成10%匀浆，同血清离心、取上清液冷藏，按试剂盒说明书测定血清和肺组织SOD活力(黄嘌呤氧化法)及MDA含量(硫代巴比妥酸法，TBA法);剩余小鼠脱臼处死，称取所有动物心、脾、肺、肾、脑、睾丸、附睾等脏器重量，计算脏器系数。
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1.5 统计学方法 数据用ˉx±s表示，t检验分析组间差异。
2 结果
2.1 中药1号雾化吸入对主动吸烟小鼠血清、肺组织SOD及MDA的影响 见表1。小鼠吸烟30d后，血清和肺组织SOD活力明显降低，MDA含量显著升高，与非吸烟组相比有统计学意义(P<0.01)。吸烟后15d雾化吸入中药1号，血清SOD活力较不用药者明显增高(P<0.01，P<0.05)，其MDA含量亦明显下降(P<0.01，P<0.05);肺组织SOD活力、MDA含量亦呈类似改变，其中对MDA含量的影响，中、高剂量组有统计学意义(P<0.01，P<0.05)。
表1 中药1号雾化吸入15d对主动吸烟小鼠血清和肺组织SOD和MDA含量的影响
注:与NS组相比， a P<0.05， aa P<0.05;与样品烟+NS组相比， b P<0.05， bb P<0.05
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2.2 中药1号雾化吸入对主动吸烟小鼠体重的影响 见表2。非用药吸烟组随着吸烟时日的延长，小鼠体重增长明显慢于正常组小鼠(P<0.01，P<0.05);吸烟15d后，雾化吸入中药1号，小鼠体重增长速度明显加快，用药15d后，高、中、低剂量组体重增加明显快于非用药吸烟组(P<0.05)， 接近于正常组。
2.3 中药1号雾化吸入对主动吸烟小鼠脏器系数的影响 见表3。小鼠主动吸烟30d，其脏器系数无明显改变;后15d加吸中药1号，对脏器系数亦无明显影响。
表2 中药1号雾化吸入对主动吸烟小鼠体重(g)的影响
注:括号内为吸烟前后小鼠体重变化值;与NS组比较， a P<0.05， aa P<0.05;与样品烟+NS组比较， b P<0.05， bb P<0.01
表3 中药1号雾化吸入对小鼠主动吸烟30d脏器重量(mg)及脏器指数的影响
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注:括号内为脏器系数;各组比较均P>0.05
3 讨论
吸烟时，除直接对气道造成损害外，吸入的大量自由基 尚使机体长期处于过度氧负荷状态，消耗体内的抗氧化物质和抗氧化酶类，使其耗竭或失代偿。过量的氧自由基可对生物大分子物质如DNA、RNA、蛋白质和脂肪造成损伤，是癌症启动和促进的基础 [1] 。故抗氧化功能已成为吸烟危害研究的重要观察指标。本实验结果表明，主动吸烟小鼠血清及肺组织SOD活力明显降低，MDA含量增高，与文献报道一致 [1] 。雾化吸入中药1号则可显著升高吸烟小鼠血清及肺组织SOD活力，降低MDA含量，提示中药1号具有一定的抗氧化作用，有助于减轻吸烟对机体的损害。
实验发现，吸烟小鼠的体重增长速度明显慢于正常小鼠，说明吸烟是使体重降低的重要因素，与前人研究结果相符 [6，7] 。吸烟使体重降低的机制尚不清楚，可能与以下因素有关:烟雾中的尼古丁及一氧化碳可通过神经系统和缺氧状态影响消化系统功能，使能量摄入减少;吸烟时交感神经兴奋可使能量消耗增加 [6] 。且吸烟者血脂升高，易沉积于血管壁。因此，在吸烟引起体重降低的同时潜伏着心血管与消化系统的严重隐患。雾化吸入中药1号，可显著恢复吸烟小鼠的体重，可能有助于缓解吸烟体重下降所潜伏的隐患。有研究指出，长期吸烟可引起生殖系统改变，导致小鼠睾丸、附睾等脏器系数下降 [8] ，本实验结果小鼠脏器系数无明显改变，推测与吸烟时日过短有关。 总之，吸烟可产生大量自由基，对机体造成诸多损害;同时减慢体重增长，有害健康。本实验发现，雾化吸入中药1号具有明显抗氧化、恢复体重等作用，可减轻吸烟对机体的危害，为吸烟者提供了一条减轻损害的途径。
, 百拇医药
参考文献
1 黄星培，王晓梅，王林，等.不同浓度香烟烟雾对小鼠SOD、GSH-Px和MDA的影响.职业卫生与病伤，2001，16(1):35-36.
2 吴人亮，李文英，车东媛，等.吸烟对小鼠小气道损伤的形态学研究.同济医科大学学报，1995，24(5):395.
3 李义平，王平，王亚文，等.香烟主流烟雾与侧流烟雾对小鼠致突变的研究.中国公共卫生，2001，17(8):707-708.
4 许爱华，陈华圣，王玲，等.银杏外种皮多糖对不同状态小鼠血清SOD和MDA形成的影响.中国中药杂志，1998，23(12):728.
5 李仪奎.中药药理实验方法学.上海:上海科学技术出版社，1991，430-433.
6 郑淑鹏，王昆，王庆标，等.吸烟与体重关系的调查分析.中国公共卫生，1991，7(3):111-112.
7 张丽欣.吸烟与体重的关系.中国初级卫生保健，1993，7(6):38-41.
8 王淑玲，宗圣和.吸烟对雄性小鼠生殖内分泌系统的影响.郑州大学学报(医学版)，2002，37(2):164-167.
作者单位:241001安徽芜湖皖南医学院药理学教研室(通讯作者)
(编辑秋 实), 百拇医药
关键词 中药1号 主动吸烟 SOD MDA 体重
【文献标识码】 B 【文章编号】 1606-8106(2004)03-0246-03
香烟燃烧可产生多种化学物质对人体造成损害，包括某些致癌物质和自由基。有资料显示，一口烟中约含有5×10 4 个自由基，一支烟的烟雾中，自由基则约达1×10 15 个 [1] 。因此，普遍认为自由基的氧化损伤是吸烟有害健康的主要机制之一，抑制自由基的生成有助于减轻吸烟对人体的损害。本实验以雾化吸入的方式，观察中药1号对主动吸烟小鼠血清和肺组织SOD、MDA的影响，评价其抗氧化作用，同时观察用药前后吸烟小鼠体重的变化，以期能为临床减低吸烟危害提供一定的指导。
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1 材料与方法
1.1 药品与试剂 中药1号(100%，10 3 g/L)，皖南医学院中西医结合研究所提供;样品烟(每支焦油含量8mg，烟气烟碱含量1.0mg)，安徽芜湖卷烟厂。SOD测试盒，批号20030702;MDA测试盒，批号20030618;考马斯亮兰蛋白测试盒，批号20030630，南京建成生物工程研究所，其它试剂均为分析纯。
1.2 动物 昆明种小鼠70只，体重(20±2)g，雌雄各半，皖南医学院动物中心提供。
1.3 主要仪器 自制主动吸烟箱(50cm×50cm×100cm) [2，3] ;动物人工呼吸机(DW-2000型)，上海嘉鹏科技有限公司;S-888E超声波雾化器，中外合资南京道芬电子有限公司;XD811生化分析仪，上海讯达医疗仪器公司;TGL-16G-A冷冻离心机，上海安亭科学仪器厂;玻璃匀浆管，南京建成生物工程研究。
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1.4 实验方法
1.4.1 分组与给药 动物适应性喂养1周，随机均分5组， 按文献 [4，5] 及预试结果设置如下剂量组:空白对照组(NS+等量空气)、样品烟+NS组、样品烟+药物高(20.00g·kg-1 ·d -1 )、中(6.80g·kg -1 ·d -1 )、低(2.27g·kg -1 ·d -1 )剂量组。各组每天吸烟2次，每次2支，空白对照组吸入等量空气，计30d。其中，高、中、低剂量组吸烟15d后按上述剂量设置再加吸中药1号(雾化吸入)，持续15d;样品烟+NS组对照雾化吸入20ml NS。
1.4.2 观察指标 记录吸烟前、后7、15、22、30d体重;末次吸烟次日每组各取8只(雌雄各半)于眼球取血，3500rpm离心10min，取血清2℃～4℃冷藏;剪取肺脏，称重后研磨制成10%匀浆，同血清离心、取上清液冷藏，按试剂盒说明书测定血清和肺组织SOD活力(黄嘌呤氧化法)及MDA含量(硫代巴比妥酸法，TBA法);剩余小鼠脱臼处死，称取所有动物心、脾、肺、肾、脑、睾丸、附睾等脏器重量，计算脏器系数。
, 百拇医药
1.5 统计学方法 数据用ˉx±s表示，t检验分析组间差异。
2 结果
2.1 中药1号雾化吸入对主动吸烟小鼠血清、肺组织SOD及MDA的影响 见表1。小鼠吸烟30d后，血清和肺组织SOD活力明显降低，MDA含量显著升高，与非吸烟组相比有统计学意义(P<0.01)。吸烟后15d雾化吸入中药1号，血清SOD活力较不用药者明显增高(P<0.01，P<0.05)，其MDA含量亦明显下降(P<0.01，P<0.05);肺组织SOD活力、MDA含量亦呈类似改变，其中对MDA含量的影响，中、高剂量组有统计学意义(P<0.01，P<0.05)。
表1 中药1号雾化吸入15d对主动吸烟小鼠血清和肺组织SOD和MDA含量的影响
注:与NS组相比， a P<0.05， aa P<0.05;与样品烟+NS组相比， b P<0.05， bb P<0.05
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2.2 中药1号雾化吸入对主动吸烟小鼠体重的影响 见表2。非用药吸烟组随着吸烟时日的延长，小鼠体重增长明显慢于正常组小鼠(P<0.01，P<0.05);吸烟15d后，雾化吸入中药1号，小鼠体重增长速度明显加快，用药15d后，高、中、低剂量组体重增加明显快于非用药吸烟组(P<0.05)， 接近于正常组。
2.3 中药1号雾化吸入对主动吸烟小鼠脏器系数的影响 见表3。小鼠主动吸烟30d，其脏器系数无明显改变;后15d加吸中药1号，对脏器系数亦无明显影响。
表2 中药1号雾化吸入对主动吸烟小鼠体重(g)的影响
注:括号内为吸烟前后小鼠体重变化值;与NS组比较， a P<0.05， aa P<0.05;与样品烟+NS组比较， b P<0.05， bb P<0.01
表3 中药1号雾化吸入对小鼠主动吸烟30d脏器重量(mg)及脏器指数的影响
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注:括号内为脏器系数;各组比较均P>0.05
3 讨论
吸烟时，除直接对气道造成损害外，吸入的大量自由基 尚使机体长期处于过度氧负荷状态，消耗体内的抗氧化物质和抗氧化酶类，使其耗竭或失代偿。过量的氧自由基可对生物大分子物质如DNA、RNA、蛋白质和脂肪造成损伤，是癌症启动和促进的基础 [1] 。故抗氧化功能已成为吸烟危害研究的重要观察指标。本实验结果表明，主动吸烟小鼠血清及肺组织SOD活力明显降低，MDA含量增高，与文献报道一致 [1] 。雾化吸入中药1号则可显著升高吸烟小鼠血清及肺组织SOD活力，降低MDA含量，提示中药1号具有一定的抗氧化作用，有助于减轻吸烟对机体的损害。
实验发现，吸烟小鼠的体重增长速度明显慢于正常小鼠，说明吸烟是使体重降低的重要因素，与前人研究结果相符 [6，7] 。吸烟使体重降低的机制尚不清楚，可能与以下因素有关:烟雾中的尼古丁及一氧化碳可通过神经系统和缺氧状态影响消化系统功能，使能量摄入减少;吸烟时交感神经兴奋可使能量消耗增加 [6] 。且吸烟者血脂升高，易沉积于血管壁。因此，在吸烟引起体重降低的同时潜伏着心血管与消化系统的严重隐患。雾化吸入中药1号，可显著恢复吸烟小鼠的体重，可能有助于缓解吸烟体重下降所潜伏的隐患。有研究指出，长期吸烟可引起生殖系统改变，导致小鼠睾丸、附睾等脏器系数下降 [8] ，本实验结果小鼠脏器系数无明显改变，推测与吸烟时日过短有关。 总之，吸烟可产生大量自由基，对机体造成诸多损害;同时减慢体重增长，有害健康。本实验发现，雾化吸入中药1号具有明显抗氧化、恢复体重等作用，可减轻吸烟对机体的危害，为吸烟者提供了一条减轻损害的途径。
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参考文献
1 黄星培，王晓梅，王林，等.不同浓度香烟烟雾对小鼠SOD、GSH-Px和MDA的影响.职业卫生与病伤，2001，16(1):35-36.
2 吴人亮，李文英，车东媛，等.吸烟对小鼠小气道损伤的形态学研究.同济医科大学学报，1995，24(5):395.
3 李义平，王平，王亚文，等.香烟主流烟雾与侧流烟雾对小鼠致突变的研究.中国公共卫生，2001，17(8):707-708.
4 许爱华，陈华圣，王玲，等.银杏外种皮多糖对不同状态小鼠血清SOD和MDA形成的影响.中国中药杂志，1998，23(12):728.
5 李仪奎.中药药理实验方法学.上海:上海科学技术出版社，1991，430-433.
6 郑淑鹏，王昆，王庆标，等.吸烟与体重关系的调查分析.中国公共卫生，1991，7(3):111-112.
7 张丽欣.吸烟与体重的关系.中国初级卫生保健，1993，7(6):38-41.
8 王淑玲，宗圣和.吸烟对雄性小鼠生殖内分泌系统的影响.郑州大学学报(医学版)，2002，37(2):164-167.
作者单位:241001安徽芜湖皖南医学院药理学教研室(通讯作者)
(编辑秋 实), 百拇医药