津力达口服液治疗糖尿病实验研究
【文献标识码】 A 【文章编号】 1726-7587(2004)05-0609-05
津力达口服液系人参、黄精、苍术等中药组成复方，依据中医健脾运津、益气养阴的功能，主治消渴病(糖尿病)口渴多饮、消谷运津、尿多而甜、形体消瘦、体倦懒言等症。本研究皆在证实津力达口服液对实验性高血糖动物的治疗作用，以及对正常动物的影响。
1 实验材料
1.1 药物 津力达口服液，提取浸膏1.59g生药/ml，石家庄高新技术开发区医学研究所提供;盐酸苯乙双胍片(降糖灵)，25mg/片，批号:9304213，北京制药厂出品;优降糖片，2.5mg/片，批号:9502208，北京制药厂出品;0.1%盐酸肾上腺素注射液，批号:94100514，北京永康制药厂出品;四氧嘧啶(Alloxan)，Sigma公司;胰岛素药盒，北京北方免疫试剂研究所出品;黄嘌呤出口分装;黄嘌呤氧化酶Sigma公司出品;鲁米诺，德国Biegriger Mannheim公司出品。牛胰岛素(27.3U/mg)，Sigma I5500产品。牛血清γ-球蛋白，Sigma产品。 125 Ⅰ-胰岛素(比放射性135μCi/μg)，北京福瑞生物工程公司出品;Bio-Rad Protein Assay，美国产品;聚乙二醇(PEG)，进口分装，批号:930828，天津天泰精细化学品有限公司;氢氧化钾，二级，批号:790420，北京化工厂;三氯醋酸，化学纯，批号:900220，上海化学试剂三厂;冰醋酸，分析纯，批号:951204，北京化工厂;蒽酮，化学纯，批号:980818，北京金龙化学试剂有限公司;硫酸，分析纯，批号:950905，北京顺义县李遂化工厂;葡萄糖，分析纯，批号:971220，北京国华化学试剂厂。
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1.2 动物 Wistar种大白鼠，雄性，体重(180±20)g，中国医学科学院实验动物中心提供，合格证号:9209R018。昆明种小白鼠，雄性，体重(25±2)g，中国中医研究院实验动物中心提供，合格证号:京动字01-3064。
1.3 仪器 FT-630G全自动r计数仪(北京);55P-72超速离心机(日本);UV-365双重单色自动记录分光光度计(日本);XHF-1高速分散器(上海)。
2 实验方法
2.1 对高血糖大鼠模型的影响 大鼠经尾静脉注射2%四氧嘧啶溶液75mg/kg造成大鼠高血糖模型 [1，2] ，72h后选择血糖值为350～400mg/dl的动物用于试验，分为5组，每组10只。(1)空白对照组;(2)模型组;(3)津力达口服液5g/kg组;(4)津力达口服液1g/kg组;(5)降糖灵0.08g/kg组。灌胃给药每日1次，连续2周，分别于药后7、14天断尾取血，用血糖仪测定血糖值，并在第14天经腹主动脉取血按放射免疫法使用FT-630G全自动r计数仪测定胰岛素，用S.500P型半自动生化分析仪测定胆固醇、甘油三酯，用SH-1型生物化学发光仪测定血清超氧化物歧化酶等指标。试验分为空白对照组，模型组，津力达口服液5g/kg组，津力达口服液1g/kg组。灌胃给药每日1次，连续10天，对照组及模型组给予等体积蒸馏水。第10天，经腹主动脉取血，按NBT法测定糖化血清蛋白(果糖胺)mmol/L。
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2.2 对高血糖大鼠肝细胞膜受体的影响 试验分(1)空白对照组;(2)模型组;(3)津力达口服液5g/kg组，灌胃给药每日1次连续2周。
按严孝强等方法 [3] 进行肝细胞膜制备。大鼠断头处死，立即取肝在冰浴中去除结缔组织，匀浆20min，用5层纱布过滤，12000rpm离心40min，取其沉淀于冰浴中手动匀浆，收集样品液3.5ml，滴加70%蔗糖(W/W)使其浓度达48%。将样品液装入离心管底，在上层铺上蔗糖(W/W)45%、41%、37%各9ml、8ml、7ml，水平转头25000rpm离心3h，收集37%/41%界面的膜成分用1mMNaHCO 3 (pH值7.5)稀释后离心40min，收集其沉淀于冰浴手动匀浆，分装，置-40℃存放。按Coomassie blue法 [4] 测定膜蛋白浓度。
在冰浴中分别加入试管0、0.1、0.3、1、3、10、30、100、300、1000ng/ml不同浓度的牛胰岛素，随即加入 125 Ⅰ-胰岛素100pg的无钙3%BSA-KRB50μl( 125 Ⅰ-胰岛素比放射性135μCi/μg)，解冻的膜蛋白100μl，加入0.1%BSA-KRB至最终浓度体积250μl，混匀4℃放置24h。
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反应终止时，加15.8%聚乙二醇0.8ml，0.3%牛血清γ-球蛋白0.1ml，混匀4℃放置20min，2000rpm离心15min，取沉淀进行计数。
实验数据按Scatchard分析获得高低亲和常数k 1 、k 2 (mol/L)和受体数R 1 、R 2 (mol/mg膜蛋白)。
2.3 对高血糖小鼠肝糖原合成的影响 经尾静脉注射1% 四氧嘧啶溶液90mg/kg造成小鼠高血糖模型，72h后选择血糖值为350～400mg/dl的动物用于实验，分为5组，每组9只，(1)空白对照组;(2)模型组;(3)津力达口服液7g/kg组;(4)津力达口服液1.4g/kg组;(5)降糖灵0.2g/kg组。灌胃给药，每日1次，连续7日，空白对照组、模型组给予等容积的蒸馏水。动物禁食，给药1h后腹腔注射葡萄糖2.0g/kg，注射后1h处死动物，取适量肝脏，加入5%三氯醋酸制成5mg/ml的肝匀浆，离心取上清液1ml，置于10ml刻度试管中，加入10mol/L氢氧化钾1ml，煮沸1h。冷却后加0.5ml冰醋酸中和过量碱，并用蒸馏水补足至10ml。取此液1ml，加入2ml蒽酮试剂，迅速将试管浸入冰水浴中冷却。随后再煮沸10min。取出冷却后进行比色，测定光密度值(λ=650nm)，根据标准曲线计算肝糖原含量(mg/g肝)。实验数据进行统计学处理t检验。
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2.4 降血糖作用时效实验 [1] 四氧嘧啶高血糖大鼠20只分为对照组和津力达口服液5g/kg组，测定药前空腹血糖作为药前值，灌胃给药7天，对照组给予等量蒸馏水。禁食3h后给药，测定0、2、4、6h血糖值与药前比较，其变化百分率进行组间比较，进行统计学处理t检验，并绘制作用时效曲线。
2.5 对正常大鼠糖耐量的影响 将大鼠40只随机分为4组，每组10只，(1)空白对照组;(2)津力达口服液5g/kg组;(3)津力达口服液1g/kg组;(4)优降糖0.1g/kg组。试验前动物禁食12h，各给药组灌胃给药，对照组给予等体积蒸馏水。1h后腹腔注射葡萄糖2g/kg，分别测定0、0.5、1、2h的血糖值，绘制葡萄糖耐量曲线，计算曲线下面积 [5] 。
2.6 对正常大鼠血糖、血清胰岛素的影响 将大鼠随机分为5组，每组10只，(1)空白对照组;(2)津力达口服液5g/kg 组;(3)津力达口服液2.5g/kg组;(4)津力达口服液1g/kg组。分别测定药前空腹血糖值(mg/dl)，灌胃给药7天后再次测定空腹血糖值(mg/dl)，经腹主动脉取血，按放射免疫法测定血清胰岛素含量(μIU/ml)。
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3 实验结果
3.1 对四氧嘧啶型高血糖大鼠血糖的影响 注射四氧嘧啶72h后大鼠血糖升高呈现持续高血糖状态，与对照组比较差异有非常显著性(P<0.01)。津力达口服液5g/kg组 在药后第7天血糖值下降25.56%，第14天下降了29.2%，与模型组比较差异均有非常显著性(P<0.01);1g/kg组药后7天血糖值下降8.09%，14天下降8.36%，与模型组比较无统计学差异(P>0.05)。阳性对照药降糖灵在药后第7、14天血糖值明显下降，与药前比较血糖值分别下降28.84%、36.6%，与模型组比较差异均有非常显著性(P<0.01)。
3.2 对高血糖大鼠血糖胰岛素、胆固醇、甘油三酯及血清超氧化物歧化酶的影响 动物静脉注射四氧嘧啶后血中胰岛素、胆固醇、SOD含量与对照组比较明显下降(P<0.01)，甘油三酯则高于对照组(P<0.01)。津力达口服液5g/kg、1g/kg剂量组均能明显提高血中SOD含量与模型组比较差异有显著性(P<0.01、P<0.05)，但对胰岛素、胆固醇、甘油三酯无明显影响(P>0.05)。降糖灵可使血中胰岛素水平明显恢复(P<0.01)。见表2。
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表1 对四氧嘧啶型高血糖大鼠血糖的影响 (略)
表2 对高血糖大鼠胰岛素、胆固醇、甘油三酯及SOD的影响 (略)
3.3 对高血糖大鼠糖化血清蛋白(果糖胺) 模型组糖化血清蛋白值明显升高，与对照组比较差异有显著性(P<0.01)，津力达口服液5g/kg组糖化血清蛋白值明显低于模型组(P<0.05)，1g/kg组呈下降趋势，但差异无显著性(P>0.05)。见表3。
3.4 对高血糖大鼠肝细胞膜胰岛素受体的影响 模型组肝细胞膜胰岛素受体数目明显高于对照组(P<0.01)，与秦光彩等 [6] 文献报道相似，亲和常数与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。津力达口服液治疗性给药2周可明显增加胰岛素受体数目，与模型组比较差异有显著性(P< 0.01)，而对高低亲和常数无明显影响。见表4。
表3 对高血糖大鼠糖化血清蛋白(果糖胺)的影响 (略)
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表4 对大鼠肝细胞膜胰岛素受体的影响 (略)
3.5 对高血糖小鼠肝糖原合成的影响 模型组肝糖原含量明显低于空白对照组(P<0.01)，表明高血糖小鼠糖代谢异常，肝糖原合成减少;津力达口服液5g/kg、1g/kg剂量组肝糖原含量均明显高于模型组(P<0.01)，表明津力达口服液具有促进肝糖原合成的作用。见表5。
3.6 降血糖作用时效实验 见表6，图1。如图表所示，津力达口服液在药后2h血糖值开始下降，4h下降了28.58%，与对照组相比差异有显著性(P<0.01)，6h后有所回升，但与对照组比较差异仍有显著性(P<0.05)，表明津力达口服液降血糖作用在药后2～6h，4h达高峰。
表5 对高血糖小鼠肝糖原合成的影响 (略)
表6 津力达降血糖作用的时效关系 (略)
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图1 略
3.7 对正常大鼠糖耐量的影响 见表7、8，图2。由图表可见，对照组腹腔注射葡萄糖0.5h后血糖值达高峰，津力达口服液5g/kg组在以上四个时段血糖值均低于对照组，尤其在0.5h、1h降血糖作用更为明显(P<0.05、P<0.01);津力达口服液1g/kg组各时间点血糖值较对照组降低，但无统计学差异(P>0.05)。阳性药优降糖在0h、0.5h、1h、2h血糖值均低于对照组，统计学处理差异呈显著性(P<0.05、P<0.05、P<0.01、P<0.01)。提示津力达口服液对糖耐量有明显改善作用。
表7 对正常大鼠糖耐量的影响 (略)
表8 糖耐量面积 (略)
3.8 对正常大鼠血糖、血清胰岛素的影响 见表9。实验结果表明，对照组给药前后血糖值差异无显著性(P>0.05);津力达口服液给药后血糖值略有降低，但差异无显著性(P>0.05)，血清胰岛素较对照组有升高趋势，但差异无显著性(P>0.05)。提示津力达口服液对正常大鼠血糖和血清胰岛素无影响。
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4 讨论
2型糖尿病是以成年人发生高血糖、高胰岛素血症及胰岛素抵抗为特征，病因及病理生理主要表现为:胰岛素分
图2 糖耐量曲线略
表9 对正常大鼠血糖、血清胰岛素的影响 (略)
子结构异常，异常胰岛素及前胰岛素不能执行胰岛素的正常功能，反而在引起机体病理反馈方面起作用，这可能是形成胰岛素抵抗的因素之一;胰岛素受体结构及机能障碍，结构变异，结合力改变均与胰岛素抵抗有关;胰岛素释放调控因子;受体后环节的影响，如葡萄糖转运蛋白系统的缺陷和葡萄糖激酶活力变化直接影响正常糖代谢，肌糖原合成障碍是形成胰岛素抵抗的一个重要成因 [7] 。胰岛素抵抗主要是受体和受体后缺陷所致，受体缺陷包括受体数目减少和亲和力改变 [8] 。另外，肝糖原的合成与分解直接控制血糖浓度，糖代谢紊乱，糖原合成减少，分解加速亦是血糖升高原因之一 [9] 。
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本研究显示，津力达口服液对高血糖动物模型有明显降低血糖作用，治疗性给药10天糖化血清蛋白含量明显下降，给药2周血糖值下降了29.2%，表明其降血糖作用比较平稳;津力达口服液虽然对正常和高血糖动物模型的血清胰岛素分泌没有明显促进作用，但是却能增加胰岛素受体数目和促进肝糖原合成。由此我们推测，该药降血糖作用机制可能是通过逐渐修复胰岛素受体缺陷，改善受体自身机能障碍，促进受体有效数目增加，提高胰岛素和受体的结合率，以恢复胰岛素的正常功能;与此同时，促进肝糖原合成，减少外周血液葡萄糖含量。另一方面，通过提高超氧化物歧化酶(SOD)的活性，清除氧自由基，以达到保护机体的作用。
中医中药治疗消渴病(糖尿病)历史悠久，通过中医理进行辨证论治，因人而异整体调节，中药降血糖作用平稳，在降低血糖的同时又有改善临床症状作用。津力达口服液为中药复方，本实验系统研究了其药理学作用从而证实了临床疗效的可靠性。
参考文献
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2 陈奇.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社，1993，719，815-817，824.
3 严孝强.肝细胞膜胰岛素受体放射分析法的研究.中华核医学杂志，1986，6(2):91.
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5 M·吉伯尔，D·佩里尔.药理动力学.北京:科学出版社，1987，412-416.
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6 秦光彩.链脲佐菌素糖尿病大鼠肝细胞膜胰岛素受体的研究.中华内分泌代谢杂志，1993，9(2):102.
7 霍玉书.防治2型糖尿病中药药效学实验原理与方法学设计(内 部资料).
8 康有厚，池芝盛.胰岛素抵抗和非胰岛素依赖型糖尿病.中华内科杂志，1992，31(1):42.
9 沈同，王镜岩，赵邦悌.生物化学(下册).北京:人民教育出版社，1980，450，486.
作者单位:100091中国中医研究院西苑医院基础研究室
(收稿日期:2004-01-18)
(编辑 小川), 百拇医药
津力达口服液系人参、黄精、苍术等中药组成复方，依据中医健脾运津、益气养阴的功能，主治消渴病(糖尿病)口渴多饮、消谷运津、尿多而甜、形体消瘦、体倦懒言等症。本研究皆在证实津力达口服液对实验性高血糖动物的治疗作用，以及对正常动物的影响。
1 实验材料
1.1 药物 津力达口服液，提取浸膏1.59g生药/ml，石家庄高新技术开发区医学研究所提供;盐酸苯乙双胍片(降糖灵)，25mg/片，批号:9304213，北京制药厂出品;优降糖片，2.5mg/片，批号:9502208，北京制药厂出品;0.1%盐酸肾上腺素注射液，批号:94100514，北京永康制药厂出品;四氧嘧啶(Alloxan)，Sigma公司;胰岛素药盒，北京北方免疫试剂研究所出品;黄嘌呤出口分装;黄嘌呤氧化酶Sigma公司出品;鲁米诺，德国Biegriger Mannheim公司出品。牛胰岛素(27.3U/mg)，Sigma I5500产品。牛血清γ-球蛋白，Sigma产品。 125 Ⅰ-胰岛素(比放射性135μCi/μg)，北京福瑞生物工程公司出品;Bio-Rad Protein Assay，美国产品;聚乙二醇(PEG)，进口分装，批号:930828，天津天泰精细化学品有限公司;氢氧化钾，二级，批号:790420，北京化工厂;三氯醋酸，化学纯，批号:900220，上海化学试剂三厂;冰醋酸，分析纯，批号:951204，北京化工厂;蒽酮，化学纯，批号:980818，北京金龙化学试剂有限公司;硫酸，分析纯，批号:950905，北京顺义县李遂化工厂;葡萄糖，分析纯，批号:971220，北京国华化学试剂厂。
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1.2 动物 Wistar种大白鼠，雄性，体重(180±20)g，中国医学科学院实验动物中心提供，合格证号:9209R018。昆明种小白鼠，雄性，体重(25±2)g，中国中医研究院实验动物中心提供，合格证号:京动字01-3064。
1.3 仪器 FT-630G全自动r计数仪(北京);55P-72超速离心机(日本);UV-365双重单色自动记录分光光度计(日本);XHF-1高速分散器(上海)。
2 实验方法
2.1 对高血糖大鼠模型的影响 大鼠经尾静脉注射2%四氧嘧啶溶液75mg/kg造成大鼠高血糖模型 [1，2] ，72h后选择血糖值为350～400mg/dl的动物用于试验，分为5组，每组10只。(1)空白对照组;(2)模型组;(3)津力达口服液5g/kg组;(4)津力达口服液1g/kg组;(5)降糖灵0.08g/kg组。灌胃给药每日1次，连续2周，分别于药后7、14天断尾取血，用血糖仪测定血糖值，并在第14天经腹主动脉取血按放射免疫法使用FT-630G全自动r计数仪测定胰岛素，用S.500P型半自动生化分析仪测定胆固醇、甘油三酯，用SH-1型生物化学发光仪测定血清超氧化物歧化酶等指标。试验分为空白对照组，模型组，津力达口服液5g/kg组，津力达口服液1g/kg组。灌胃给药每日1次，连续10天，对照组及模型组给予等体积蒸馏水。第10天，经腹主动脉取血，按NBT法测定糖化血清蛋白(果糖胺)mmol/L。
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2.2 对高血糖大鼠肝细胞膜受体的影响 试验分(1)空白对照组;(2)模型组;(3)津力达口服液5g/kg组，灌胃给药每日1次连续2周。
按严孝强等方法 [3] 进行肝细胞膜制备。大鼠断头处死，立即取肝在冰浴中去除结缔组织，匀浆20min，用5层纱布过滤，12000rpm离心40min，取其沉淀于冰浴中手动匀浆，收集样品液3.5ml，滴加70%蔗糖(W/W)使其浓度达48%。将样品液装入离心管底，在上层铺上蔗糖(W/W)45%、41%、37%各9ml、8ml、7ml，水平转头25000rpm离心3h，收集37%/41%界面的膜成分用1mMNaHCO 3 (pH值7.5)稀释后离心40min，收集其沉淀于冰浴手动匀浆，分装，置-40℃存放。按Coomassie blue法 [4] 测定膜蛋白浓度。
在冰浴中分别加入试管0、0.1、0.3、1、3、10、30、100、300、1000ng/ml不同浓度的牛胰岛素，随即加入 125 Ⅰ-胰岛素100pg的无钙3%BSA-KRB50μl( 125 Ⅰ-胰岛素比放射性135μCi/μg)，解冻的膜蛋白100μl，加入0.1%BSA-KRB至最终浓度体积250μl，混匀4℃放置24h。
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反应终止时，加15.8%聚乙二醇0.8ml，0.3%牛血清γ-球蛋白0.1ml，混匀4℃放置20min，2000rpm离心15min，取沉淀进行计数。
实验数据按Scatchard分析获得高低亲和常数k 1 、k 2 (mol/L)和受体数R 1 、R 2 (mol/mg膜蛋白)。
2.3 对高血糖小鼠肝糖原合成的影响 经尾静脉注射1% 四氧嘧啶溶液90mg/kg造成小鼠高血糖模型，72h后选择血糖值为350～400mg/dl的动物用于实验，分为5组，每组9只，(1)空白对照组;(2)模型组;(3)津力达口服液7g/kg组;(4)津力达口服液1.4g/kg组;(5)降糖灵0.2g/kg组。灌胃给药，每日1次，连续7日，空白对照组、模型组给予等容积的蒸馏水。动物禁食，给药1h后腹腔注射葡萄糖2.0g/kg，注射后1h处死动物，取适量肝脏，加入5%三氯醋酸制成5mg/ml的肝匀浆，离心取上清液1ml，置于10ml刻度试管中，加入10mol/L氢氧化钾1ml，煮沸1h。冷却后加0.5ml冰醋酸中和过量碱，并用蒸馏水补足至10ml。取此液1ml，加入2ml蒽酮试剂，迅速将试管浸入冰水浴中冷却。随后再煮沸10min。取出冷却后进行比色，测定光密度值(λ=650nm)，根据标准曲线计算肝糖原含量(mg/g肝)。实验数据进行统计学处理t检验。
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2.4 降血糖作用时效实验 [1] 四氧嘧啶高血糖大鼠20只分为对照组和津力达口服液5g/kg组，测定药前空腹血糖作为药前值，灌胃给药7天，对照组给予等量蒸馏水。禁食3h后给药，测定0、2、4、6h血糖值与药前比较，其变化百分率进行组间比较，进行统计学处理t检验，并绘制作用时效曲线。
2.5 对正常大鼠糖耐量的影响 将大鼠40只随机分为4组，每组10只，(1)空白对照组;(2)津力达口服液5g/kg组;(3)津力达口服液1g/kg组;(4)优降糖0.1g/kg组。试验前动物禁食12h，各给药组灌胃给药，对照组给予等体积蒸馏水。1h后腹腔注射葡萄糖2g/kg，分别测定0、0.5、1、2h的血糖值，绘制葡萄糖耐量曲线，计算曲线下面积 [5] 。
2.6 对正常大鼠血糖、血清胰岛素的影响 将大鼠随机分为5组，每组10只，(1)空白对照组;(2)津力达口服液5g/kg 组;(3)津力达口服液2.5g/kg组;(4)津力达口服液1g/kg组。分别测定药前空腹血糖值(mg/dl)，灌胃给药7天后再次测定空腹血糖值(mg/dl)，经腹主动脉取血，按放射免疫法测定血清胰岛素含量(μIU/ml)。
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3 实验结果
3.1 对四氧嘧啶型高血糖大鼠血糖的影响 注射四氧嘧啶72h后大鼠血糖升高呈现持续高血糖状态，与对照组比较差异有非常显著性(P<0.01)。津力达口服液5g/kg组 在药后第7天血糖值下降25.56%，第14天下降了29.2%，与模型组比较差异均有非常显著性(P<0.01);1g/kg组药后7天血糖值下降8.09%，14天下降8.36%，与模型组比较无统计学差异(P>0.05)。阳性对照药降糖灵在药后第7、14天血糖值明显下降，与药前比较血糖值分别下降28.84%、36.6%，与模型组比较差异均有非常显著性(P<0.01)。
3.2 对高血糖大鼠血糖胰岛素、胆固醇、甘油三酯及血清超氧化物歧化酶的影响 动物静脉注射四氧嘧啶后血中胰岛素、胆固醇、SOD含量与对照组比较明显下降(P<0.01)，甘油三酯则高于对照组(P<0.01)。津力达口服液5g/kg、1g/kg剂量组均能明显提高血中SOD含量与模型组比较差异有显著性(P<0.01、P<0.05)，但对胰岛素、胆固醇、甘油三酯无明显影响(P>0.05)。降糖灵可使血中胰岛素水平明显恢复(P<0.01)。见表2。
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表1 对四氧嘧啶型高血糖大鼠血糖的影响 (略)
表2 对高血糖大鼠胰岛素、胆固醇、甘油三酯及SOD的影响 (略)
3.3 对高血糖大鼠糖化血清蛋白(果糖胺) 模型组糖化血清蛋白值明显升高，与对照组比较差异有显著性(P<0.01)，津力达口服液5g/kg组糖化血清蛋白值明显低于模型组(P<0.05)，1g/kg组呈下降趋势，但差异无显著性(P>0.05)。见表3。
3.4 对高血糖大鼠肝细胞膜胰岛素受体的影响 模型组肝细胞膜胰岛素受体数目明显高于对照组(P<0.01)，与秦光彩等 [6] 文献报道相似，亲和常数与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。津力达口服液治疗性给药2周可明显增加胰岛素受体数目，与模型组比较差异有显著性(P< 0.01)，而对高低亲和常数无明显影响。见表4。
表3 对高血糖大鼠糖化血清蛋白(果糖胺)的影响 (略)
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表4 对大鼠肝细胞膜胰岛素受体的影响 (略)
3.5 对高血糖小鼠肝糖原合成的影响 模型组肝糖原含量明显低于空白对照组(P<0.01)，表明高血糖小鼠糖代谢异常，肝糖原合成减少;津力达口服液5g/kg、1g/kg剂量组肝糖原含量均明显高于模型组(P<0.01)，表明津力达口服液具有促进肝糖原合成的作用。见表5。
3.6 降血糖作用时效实验 见表6，图1。如图表所示，津力达口服液在药后2h血糖值开始下降，4h下降了28.58%，与对照组相比差异有显著性(P<0.01)，6h后有所回升，但与对照组比较差异仍有显著性(P<0.05)，表明津力达口服液降血糖作用在药后2～6h，4h达高峰。
表5 对高血糖小鼠肝糖原合成的影响 (略)
表6 津力达降血糖作用的时效关系 (略)
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图1 略
3.7 对正常大鼠糖耐量的影响 见表7、8，图2。由图表可见，对照组腹腔注射葡萄糖0.5h后血糖值达高峰，津力达口服液5g/kg组在以上四个时段血糖值均低于对照组，尤其在0.5h、1h降血糖作用更为明显(P<0.05、P<0.01);津力达口服液1g/kg组各时间点血糖值较对照组降低，但无统计学差异(P>0.05)。阳性药优降糖在0h、0.5h、1h、2h血糖值均低于对照组，统计学处理差异呈显著性(P<0.05、P<0.05、P<0.01、P<0.01)。提示津力达口服液对糖耐量有明显改善作用。
表7 对正常大鼠糖耐量的影响 (略)
表8 糖耐量面积 (略)
3.8 对正常大鼠血糖、血清胰岛素的影响 见表9。实验结果表明，对照组给药前后血糖值差异无显著性(P>0.05);津力达口服液给药后血糖值略有降低，但差异无显著性(P>0.05)，血清胰岛素较对照组有升高趋势，但差异无显著性(P>0.05)。提示津力达口服液对正常大鼠血糖和血清胰岛素无影响。
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4 讨论
2型糖尿病是以成年人发生高血糖、高胰岛素血症及胰岛素抵抗为特征，病因及病理生理主要表现为:胰岛素分
图2 糖耐量曲线略
表9 对正常大鼠血糖、血清胰岛素的影响 (略)
子结构异常，异常胰岛素及前胰岛素不能执行胰岛素的正常功能，反而在引起机体病理反馈方面起作用，这可能是形成胰岛素抵抗的因素之一;胰岛素受体结构及机能障碍，结构变异，结合力改变均与胰岛素抵抗有关;胰岛素释放调控因子;受体后环节的影响，如葡萄糖转运蛋白系统的缺陷和葡萄糖激酶活力变化直接影响正常糖代谢，肌糖原合成障碍是形成胰岛素抵抗的一个重要成因 [7] 。胰岛素抵抗主要是受体和受体后缺陷所致，受体缺陷包括受体数目减少和亲和力改变 [8] 。另外，肝糖原的合成与分解直接控制血糖浓度，糖代谢紊乱，糖原合成减少，分解加速亦是血糖升高原因之一 [9] 。
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本研究显示，津力达口服液对高血糖动物模型有明显降低血糖作用，治疗性给药10天糖化血清蛋白含量明显下降，给药2周血糖值下降了29.2%，表明其降血糖作用比较平稳;津力达口服液虽然对正常和高血糖动物模型的血清胰岛素分泌没有明显促进作用，但是却能增加胰岛素受体数目和促进肝糖原合成。由此我们推测，该药降血糖作用机制可能是通过逐渐修复胰岛素受体缺陷，改善受体自身机能障碍，促进受体有效数目增加，提高胰岛素和受体的结合率，以恢复胰岛素的正常功能;与此同时，促进肝糖原合成，减少外周血液葡萄糖含量。另一方面，通过提高超氧化物歧化酶(SOD)的活性，清除氧自由基，以达到保护机体的作用。
中医中药治疗消渴病(糖尿病)历史悠久，通过中医理进行辨证论治，因人而异整体调节，中药降血糖作用平稳，在降低血糖的同时又有改善临床症状作用。津力达口服液为中药复方，本实验系统研究了其药理学作用从而证实了临床疗效的可靠性。
参考文献
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7 霍玉书.防治2型糖尿病中药药效学实验原理与方法学设计(内 部资料).
8 康有厚，池芝盛.胰岛素抵抗和非胰岛素依赖型糖尿病.中华内科杂志，1992，31(1):42.
9 沈同，王镜岩，赵邦悌.生物化学(下册).北京:人民教育出版社，1980，450，486.
作者单位:100091中国中医研究院西苑医院基础研究室
(收稿日期:2004-01-18)
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