生殖道细胞涂片检查沙眼衣原体
【文献标识码】 B 【文章编号】 1726-7587(2004)06-0828-02
沙眼衣原体引起的泌尿生殖系统感染在我国有较高的流行率 [1] 。衣原体的生活周期分细胞外有传染性的显微镜下难以看到的原体期和细胞内有繁殖性的显微镜下可见的始体、网状体、包涵体期。我们采用姬姆萨染色、革兰氏染色及直接涂片镜检,检测了60例泌尿生殖系统感染的标本,对结果进行比较,分析如下。
1 材料与方法
1.1 病例来源 均采自于我院性病门诊疑似NGU的患者,其中男37例,女23例。(NGU的诊断标准按文献)
1.2 实验材料 (1)标本采集:用无菌拭子伸入男性尿道2~4cm或女性宫颈1.5cm处,转动拭子一周后轻轻退出,制作细胞涂片及在玻片上滚动涂片(DFA法)。(2)试剂:姬姆萨染液,革兰氏染液,衣原体荧光单克隆抗体诊断试剂盒(DFA法),购自军事医学科学院微生物检验研究中心。(3)设备:多功能显微镜,型号为OLYMPUS CX31。
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1.3 方法 (1)姬姆萨染色,将储存液用蒸馏水1:20稀释,涂片用甲醛固定后行姬姆萨染色30min,依次经蒸馏水、95%乙醇,蒸馏水冲洗,干燥后,显微镜油镜检查放大1.5万倍。(2)革兰氏染色,涂片快速火焰固定后,显微镜油镜检查放大1.5万倍。(3)衣原体荧光单克隆抗体检测,使用OLYMPUS荧光显微镜,其操作规程见文献 [2] 。在每个标本片中看到10个以上的与阳性对照相同的苹果绿色的均匀颗粒荧光为阳性。
2 实验结果
在60例疑似NGU的患者中,测得30例DFA为阳性。细胞涂片,姬姆萨染色镜检,均见细胞内有内涵物:紫红、紫蓝、灰白蓝相间,数量不等,大小不一,边缘清晰的点状、圆形、椭圆形、网状、不规则等多种形态,有的包涵物较大,充满胞质,包涵物的染色和形态与文献报道基本一致。革兰氏染色镜检,未见其他微生物,均见细胞内有包涵 物,其染色和形态与姬姆萨染色结果基本一致。直接镜检,未见其他微生物,均见细胞内有包涵物,折光,大小不一,边缘清晰,数量不等的点状、圆形、椭圆形、网状、不规则形等多种形态。
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3 讨论
细胞内包涵物的多少,有包涵物细胞的多少与炎症程度,治疗过程与疾病复发呈正相关 [3] 。炎症重细胞内包涵物多,症状轻细胞内包涵物减少,症状消失细胞内包涵物明显减少甚至消失。通过实验证明 [4] :生殖道细胞涂片镜检细胞内包涵物,仅适合于细胞内衣原体包涵体期的检查。不适于细胞外衣原体原体期的检查。因此,患者做生殖道细胞涂片染色和直接涂片镜检的同时须做尿道拭子衣原体抗原检测 [5] ,以保证细胞外原体期的检测,以防漏诊。与革兰氏染色相比,姬姆萨染色直接镜检结果相对稳定。
参考文献
1 卫生部防疫司.性病防治手册.第二版.南京:江苏科技出版社,1994,53.
2 叶顺章.性传播疾病的实验室诊断.北京:科学出版社,2001,73-83.
3 王钊.性病爱滋病防治培训教材.北京:北京医科大学出版社,1999,45-57.
4 张晓明.医学免疫学和微生物学.北京:军事医学科学出版社,1998,1973.
5 刘鸿玲.男性尿道炎患者尿道细胞涂片检查衣原体.临床检验杂志,2003,(5):473.
作者单位:255036山东省淄博市中心医院检验科
(收稿日期:2004-01-05)
(编辑小 川), http://www.100md.com
沙眼衣原体引起的泌尿生殖系统感染在我国有较高的流行率 [1] 。衣原体的生活周期分细胞外有传染性的显微镜下难以看到的原体期和细胞内有繁殖性的显微镜下可见的始体、网状体、包涵体期。我们采用姬姆萨染色、革兰氏染色及直接涂片镜检,检测了60例泌尿生殖系统感染的标本,对结果进行比较,分析如下。
1 材料与方法
1.1 病例来源 均采自于我院性病门诊疑似NGU的患者,其中男37例,女23例。(NGU的诊断标准按文献)
1.2 实验材料 (1)标本采集:用无菌拭子伸入男性尿道2~4cm或女性宫颈1.5cm处,转动拭子一周后轻轻退出,制作细胞涂片及在玻片上滚动涂片(DFA法)。(2)试剂:姬姆萨染液,革兰氏染液,衣原体荧光单克隆抗体诊断试剂盒(DFA法),购自军事医学科学院微生物检验研究中心。(3)设备:多功能显微镜,型号为OLYMPUS CX31。
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1.3 方法 (1)姬姆萨染色,将储存液用蒸馏水1:20稀释,涂片用甲醛固定后行姬姆萨染色30min,依次经蒸馏水、95%乙醇,蒸馏水冲洗,干燥后,显微镜油镜检查放大1.5万倍。(2)革兰氏染色,涂片快速火焰固定后,显微镜油镜检查放大1.5万倍。(3)衣原体荧光单克隆抗体检测,使用OLYMPUS荧光显微镜,其操作规程见文献 [2] 。在每个标本片中看到10个以上的与阳性对照相同的苹果绿色的均匀颗粒荧光为阳性。
2 实验结果
在60例疑似NGU的患者中,测得30例DFA为阳性。细胞涂片,姬姆萨染色镜检,均见细胞内有内涵物:紫红、紫蓝、灰白蓝相间,数量不等,大小不一,边缘清晰的点状、圆形、椭圆形、网状、不规则等多种形态,有的包涵物较大,充满胞质,包涵物的染色和形态与文献报道基本一致。革兰氏染色镜检,未见其他微生物,均见细胞内有包涵 物,其染色和形态与姬姆萨染色结果基本一致。直接镜检,未见其他微生物,均见细胞内有包涵物,折光,大小不一,边缘清晰,数量不等的点状、圆形、椭圆形、网状、不规则形等多种形态。
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3 讨论
细胞内包涵物的多少,有包涵物细胞的多少与炎症程度,治疗过程与疾病复发呈正相关 [3] 。炎症重细胞内包涵物多,症状轻细胞内包涵物减少,症状消失细胞内包涵物明显减少甚至消失。通过实验证明 [4] :生殖道细胞涂片镜检细胞内包涵物,仅适合于细胞内衣原体包涵体期的检查。不适于细胞外衣原体原体期的检查。因此,患者做生殖道细胞涂片染色和直接涂片镜检的同时须做尿道拭子衣原体抗原检测 [5] ,以保证细胞外原体期的检测,以防漏诊。与革兰氏染色相比,姬姆萨染色直接镜检结果相对稳定。
参考文献
1 卫生部防疫司.性病防治手册.第二版.南京:江苏科技出版社,1994,53.
2 叶顺章.性传播疾病的实验室诊断.北京:科学出版社,2001,73-83.
3 王钊.性病爱滋病防治培训教材.北京:北京医科大学出版社,1999,45-57.
4 张晓明.医学免疫学和微生物学.北京:军事医学科学出版社,1998,1973.
5 刘鸿玲.男性尿道炎患者尿道细胞涂片检查衣原体.临床检验杂志,2003,(5):473.
作者单位:255036山东省淄博市中心医院检验科
(收稿日期:2004-01-05)
(编辑小 川), http://www.100md.com