99m Tc-BDI-1标记和人膀胱癌荷瘤裸鼠显像的研究(基金项目)
http://www.100md.com
基金项目:广东省深圳市科技计划资助项目(No.200204116)
【摘要】 目的 探讨 99m Tc-BDI-1的标记和人膀胱癌荷瘤裸鼠显像方法，为临床应用做好准备。方法 用亲和层析柱纯化的抗人膀胱癌单克隆抗体BDI-1。用2-巯基乙醇直接还原法标记 99m Tc-BDI-1。用薄层层析测定 99m Tc-BDI-1的放化纯度。用EJ细胞测定 99mTc-BDI-1标记抗体的免疫活性分数及亲和常数。用人膀胱癌荷瘤裸鼠进行 99m Tc-BDI-1显像。结果 99m Tc-BDI-1抗体标记率为70.1%，放射化学纯度92.1%，免疫活性分数80.5%。荷瘤裸鼠影像清晰、对比度良好， 99m Tc-BDI-1在瘤体部位的浓集明确，瘤体清晰可辨。结论 99m Tc-BDI-1能够穿过肿瘤组织中的血管壁进入肿瘤组织，并保留了抗体的亲合力和特异结合力。
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关键词 膀胱肿瘤 抗体 单克隆 放射性核素显像
【文献标识码】 A 【文章编号】 1726-7587(2004)06-0865-03
The study of labelled 99m Tc-BDI-1and the imaging
of nude mice with humanbladder neoplasm
Ye Jiongxian，Shi Yu，Hu Jinsen，et al.
Peking Univ.Shenzhen hospital，Guangdong518036.
【Abstract】 Objective To explore the labelled of 99m Tc-BDI-1and the method of imaging of nude mice with human bladder neoplasm，and preparing for the clinical apply.Methods Using affinity chromatography rarefied single clone antibody to human bladder neoplasm BDI-1.Labelled 99m Tc-BDI-1by deoxidizing2-mercapˉtoethanol directly.Measure the radio-chemical purity of 99m Tc-BDI-1by thin layer chromatograph.Measure the 99m Tc-BDI-1immunocompetence fraction and affinityconstant of labelled antibody by EJ cell.Use nude mice with human bladder neoplasm to process 99m Tc-BDI-1imaging.Results The rate of Labelled 99m Tc-BDI-1antibody is70.1%，the radio-chemical purity is92.1%，the immunocompetence fractionis80.5%.The images of nude mice with the tumor are clear with good contrast， 99m Tc-BDI-1dense in the body part of the tumor is definite，and the tuˉmor is clear.Conclusion 99m Tc-BDI-1can go through the tumor vessel wall and get into the tumor，and keep the antibody’s affinity and the special combining ability.
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Key words bladder neoplasms antibody monoclonal radionuclide imaging
膀胱癌是泌尿系统发病率最高的恶性肿瘤。Bamias等 [1] 标记 111 In抗膀胱癌单克隆抗体AUA1成功地进行肿瘤显像，引起广泛关注。抗人膀胱癌单克隆抗体BDI-1也能和人膀胱相关抗原特异性结合 [2～3] ， 131 I-BDI-1标记物人体膀胱癌的实验性显像较为清晰 [4，5]，而且 99m Tc-BDI-1人体膀胱癌放射免疫显像剂也成功试用于人体 [6～9] 。为了使99m Tc-BDI-1显像剂更好地用于临床研究，本文对其标记方法和荷瘤裸鼠显像进行了探讨。报告如下。
1 材料与方法
1.1 细胞株和裸鼠 人膀胱癌EJ细胞株由北京大学泌尿外科研究所提供，常规方法传代培养。EJ细胞用于测定 99m Tc-BDI-1标记抗体的免疫活性分数及亲和常数。ICR来源的裸小鼠，6～8周龄，由中山大学实验动物中心提供。
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1.2 方法
1.2.1 BDI-1单克隆抗体的纯化 向Balb/c小鼠腹腔注射抗人膀胱杂交瘤细胞5×10 6 个，10天后收集腹水，经饱和硫酸铵沉淀后过ProteinG-agarose(德国Boehringer Mannheim公司提供)亲和层析柱，获得纯化的抗人膀胱癌单克隆抗体BDI-1(IgG)。经浓缩、鉴定后分装-80℃保存，待用。
1.2.2 99m Tc-BDI-1的标记和纯化 首先，用2-巯基乙醇(德国Boehringer Mannheim公司提供)直接还原BDI-1 [8] 。在内含150μg BDI-1抗体的溶液中加入2-巯基乙醇5μl，摇匀，30℃水浴中孵育30min，加入Sephadex-G50柱(7mm×8mm)中分离，用pH7.0的0.2mol/L磷酸盐缓冲液洗脱，收集第一峰。然后标记和纯化 99m Tc-BDI-1。 99 Mo- 99 Tc m 发生器为中国原子能科学研究院提供。注射用亚锡亚甲二磷酸盐(MDP)冻干品(批号:20031212)亦由中国原子能科学研究院提供，每支含MDP5mg，SCI 2 ·2H 2 O0.5mg。用2ml生理盐水溶解MDP，取40μl加入上述还原后的BDI-1抗体反应瓶内。再加入 99m TcO 4 -185MBq/0.5ml，室温下摇动反应15min。将反应产物移入Sephadex-G50柱(10mm×150mm)中分离，用pH7.4的0.2mol/L磷酸盐缓冲液洗脱，收集到的第一峰即为 99m Tc-BDI-1。
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1.2.3 99m Tc-BDI-1抗体的鉴定 99m Tc-BDI-1的放化纯度测定按文献 [9] 方法，以硅胶板为支持物，以生理盐水为展开剂，行薄层层析分析。 99m Tc-BDI-1标记抗体的免疫活性分数及亲和常数的测定按文献 [10] ，同一浓度的标记抗体与不同浓度的E-J细胞在室温下反应3h后测定每管的cpm值(T值)及细胞结合的cpm值(B值)。以细胞浓度的倒数为横坐标，T/B为纵坐标，作图计算出标记抗体的免疫活性分数。
1.2.4 荷瘤裸鼠培育和 99m Tc-BDI-1显像 ICR裸小鼠15只，肩部皮下接种5×10 6 个EJ细胞，4周后长成直径1cm的人膀胱癌肿物。将荷瘤裸鼠分5组，经尾静脉分别注射不同量的99m Tc-BDI-1标记抗体，即6.0MBq/0.3ml、12.0MBq/0.3ml、18.0MBq/0.3ml、24.0MBq/0.3ml、30.0MBq/0.3ml。分别在注射后4h、8h、16h和24h进行显像。
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显像设备是SIEMESN E.CAM/ICON双探头SEPET仪，探头配置低能通用型准直器。采集静态影像，采集条件:Zoom=3.20，256×256矩阵，能窗宽度20%(峰位140keV)。采集时间8min。然后勾画感兴趣区，提取计数，定量测定肿瘤内摄取 99m Tc-BDI-1标记抗体的数量和活性。
2 结果
2.1 标记率及放化纯度 99m Tc-BDI-1抗体标记率为70.1%;标记物经Sephadex-G50分离纯化后，用薄层层析法测定放射化学纯度。放射化学纯度>92.1%。
2.2 标记抗体的免疫活性分数及亲和常数测定 标记抗体的免疫活性分数为80.5%;不同稀释度的标记抗体与同一浓度的细胞室温下反应3h后，以Scatchard作图法检测出标记抗体 99m Tc-BDI-1对EJ细胞膜表面抗原的亲和常数为1.31×10 -9 M -1 。
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2.3 荷瘤裸鼠培育和 99m Tc-BDI-1显像 99m Tc-BDI-1经荷瘤裸鼠尾静脉注射后分别在4、16、22h显像。获得的影像清晰、对比度良好，随着时间的延长，本底逐渐降低， 99mTc-BDI-1在瘤体部位的浓集量增多，22h时瘤体清晰可辨。显像结果表明 99m Tc-BDI-1能够穿过肿瘤组织中的血管壁进入肿瘤组织，并保留了抗体的亲合和特异结合力。
3 讨论
膀胱肿瘤是泌尿生殖系统中最常见的肿瘤，其中上皮性肿瘤占98%，而移行细胞癌(BTCC)占上皮肿瘤的90%以上，临床上占有重要的地位。特点是发病率高、复发率高、治疗较复杂，单纯TUR术的初发膀胱癌1年复发率达43%，复发性膀胱癌1年再发率高达70%，大多数复发于6～12个月内 [12] 。因此，提高生存率、预防复发一直是临床关注的热点之一。免疫疗法在预防膀胱癌复发中取得了一定的疗效，但由于免疫毒素作为一种异种蛋白，进入血流后可很快产生抗免疫毒素的抗体，因而限制了免疫毒素经血液的应用，成为免疫毒素治疗肿瘤的一大障碍。
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膀胱是一个与外界相通的腔形器官，免疫毒素通过灌注进入膀胱，由于不经过血循环，多次灌注没有产生抗免疫毒素抗体的机会。但免疫毒素使用量大、对于较大的肿瘤效果不佳。Bamias等 [1] 用放射性核素成功地标记膀胱癌相关单克隆抗体经膀胱灌注，不但为治疗膀胱癌提供了新的方法，而且在体外可以用影像设备显示浓集在靶点病灶的数量、停留时间，并可以计算出靶点病灶接受的辐射剂量。BDI-1是一种抗人膀胱癌单克隆抗体 [2] ，特异地和膀胱癌细胞结合，它可以作为膀胱癌特异的导向载体，制备多种免疫偶物，用于肿瘤的诊断、治疗及预防复发。放射性核素标记的BDI-1单克隆抗体已被用于膀胱癌的诊断和治疗，并见多篇报道 [2～10] ，特别是用放射性核素标记BDI-1 单克隆抗体治疗膀胱癌前景非常乐观 [13～15] ，所以倍受关注。但是，由于放射性核素标记的BDI-1单克隆抗体技术存有一些难点，尚未在临床中广为应用。为此，本研究在复习文献的基础上，进一步研究和验证 99m Tc-BDI-1的标记技术和靶点病灶的分布，旨在为临床应用前做好必要的技术准备。本研究按照文献 [16] 的方法成功地制备了 99m Tc-BDI-1，其免疫活性分数、亲和常数、放化纯度及标记率和文献报道基本相同， 99m Tc-BDI-1的放化纯度大于90%，免疫活性分数为81%。人膀胱癌荷瘤裸鼠体内分布及肿瘤显像结果表明， 99m Tc-BDI-1标记抗体能特异集中在肿瘤部位。本研究再次证明 99m Tc-BDI-1能够较好地显示人膀胱癌，作为一种无创伤性诊断方法有前景，并为放射性核素导向治疗提供了较好的载体。
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膀胱癌中70%～80%为表浅性，膀胱是一个与外界相通的腔形器官，将抗膀胱癌单克隆抗体与放射性核素偶联后膀胱灌注可以进行放射免疫显像和治疗。由于抗体直接灌注膀胱内不会进入血流，反复灌注也不产生抗抗体。放射性核素标记的单克隆抗体除了定位，还可同时进行治疗，早期诊断肿瘤的潜力超过B超、CT及MRI。膀胱癌的治疗多采用经尿道电切术和开放性手术。若将抗膀胱癌单克隆抗体偶联生物毒素、化疗药物和放射性核素，进行膀胱灌注导向治疗，患者将免受多次复发后的手术之苦。目前，已经分离出多种膀胱癌的相关单克隆抗体 [17] ，相信对于膀胱癌的免疫学诊断和治疗将有较大的突破。
参考文献
1 Bamias A，Keane P，Krausz T，et al.Intravesical administration of radioˉlabelled antitumor monoclonal antibody in bladder carcinoma.Cancer Res，1991，51:724-728.
, 百拇医药
2 马爱红，俞莉章.抗人膀胱癌单克隆抗体的制备与鉴定.中华泌尿外科杂志，1990，11:195.
3 俞莉章，张春丽，谢蜀生，等.抗人膀胱癌单克隆抗体对载瘤裸鼠放射免疫显像的实验研究.中华泌尿外科杂志，1991，12:83.
4 赵，谢蜀生，龙振洲，等.抗人膀胱癌免疫毒素的构建和体外杀伤活性.中华肿瘤杂志，1992，14:109.
5 俞莉章，顾方六，韩铁山，等.抗膀胱癌单克隆抗体膀胱内灌注放射免疫显像诊断.中华泌尿外科杂志，1993，14:252-253.
6 张春丽，俞莉章，赵，等. 131 Ⅰ-抗膀胱癌单克隆抗体对荷瘤裸鼠的放射免疫治疗研究.中华泌尿外科杂志，1994，15:3-5.
7 布卡，俞莉章，张春丽，等.抗人膀胱癌单克隆抗体的 99m Tc标记及荷瘤裸鼠放射免疫显像.中华外科杂志，1996，34:10-12.
, 百拇医药
8 李宁忱，俞莉章，张春丽，等. 99m Tc标记单克隆抗体膀胱内灌注诊断膀胱癌.中华外科杂志，1998，36:54-56.
9 Wang RF.Clinical application of radioimmunoimaging with 99m Tc-BDI-1in the diagnosis of bladder cancer.Chin Med J，2000，113:136-139.
10 Schwarz A，Steinstrabber A.A novel approach to 99m Tc labelled monoˉclonal antibody.J Nucl Med，1987，28:721.
11 Stephen J，Paik CH.Reduction method technetium-99m labeling of monoclonalantibodies.J Nucl Med，1990，31:692.
, 百拇医药
12 Lindmo T，Boven E，Cuttitta F，et al.Determination of the immunoreacˉtive fraction of radiolabeled monoclonal antibodies by linear extrapolaˉtion to binding at infinite antigen exess.J Immunol Methods，1984，72:77.
13 Herr HW，Wartinger DD，Fair WR，et al.Bacillus Calmette-Guerin Therapy for superficial bladdercancer:a10-year follow up.J Urol1992，147:1020-1023.
14 郭义峰，俞莉章，潘柏年. 188 Re在膀胱癌诊断和治疗中的应用前景.中华泌尿科杂志，2000，21:56-57.
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15 Wang RF.Radiochemical synthesis and preliminary evaluation of anti-bladder cancer monoclonal antibody BDI-1labeled with rhenium-18.Journal of labeled compounds and radiopharmaceuticals，2001，44: 437-444.
16 Wang RF.Preparation of anti bladder cancer monoclonal antibody BDI-1labeled with Rhenium-188.Synthesis and application of isotopiˉcally labeled compounds，2001，7:399-402.
17 Simms MS，Murray A，Denton G，et al.Production and characterisation of a C595antibody- 99m Tc conjugate for immunoscintigraphy of bladder cancer.Urol Res，2001，29:13-19.
作者单位:518036广东深圳北京大学深圳医院
(收稿日期:2004-02-14)
(编辑李 阳), http://www.100md.com
【摘要】 目的 探讨 99m Tc-BDI-1的标记和人膀胱癌荷瘤裸鼠显像方法，为临床应用做好准备。方法 用亲和层析柱纯化的抗人膀胱癌单克隆抗体BDI-1。用2-巯基乙醇直接还原法标记 99m Tc-BDI-1。用薄层层析测定 99m Tc-BDI-1的放化纯度。用EJ细胞测定 99mTc-BDI-1标记抗体的免疫活性分数及亲和常数。用人膀胱癌荷瘤裸鼠进行 99m Tc-BDI-1显像。结果 99m Tc-BDI-1抗体标记率为70.1%，放射化学纯度92.1%，免疫活性分数80.5%。荷瘤裸鼠影像清晰、对比度良好， 99m Tc-BDI-1在瘤体部位的浓集明确，瘤体清晰可辨。结论 99m Tc-BDI-1能够穿过肿瘤组织中的血管壁进入肿瘤组织，并保留了抗体的亲合力和特异结合力。
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关键词 膀胱肿瘤 抗体 单克隆 放射性核素显像
【文献标识码】 A 【文章编号】 1726-7587(2004)06-0865-03
The study of labelled 99m Tc-BDI-1and the imaging
of nude mice with humanbladder neoplasm
Ye Jiongxian，Shi Yu，Hu Jinsen，et al.
Peking Univ.Shenzhen hospital，Guangdong518036.
【Abstract】 Objective To explore the labelled of 99m Tc-BDI-1and the method of imaging of nude mice with human bladder neoplasm，and preparing for the clinical apply.Methods Using affinity chromatography rarefied single clone antibody to human bladder neoplasm BDI-1.Labelled 99m Tc-BDI-1by deoxidizing2-mercapˉtoethanol directly.Measure the radio-chemical purity of 99m Tc-BDI-1by thin layer chromatograph.Measure the 99m Tc-BDI-1immunocompetence fraction and affinityconstant of labelled antibody by EJ cell.Use nude mice with human bladder neoplasm to process 99m Tc-BDI-1imaging.Results The rate of Labelled 99m Tc-BDI-1antibody is70.1%，the radio-chemical purity is92.1%，the immunocompetence fractionis80.5%.The images of nude mice with the tumor are clear with good contrast， 99m Tc-BDI-1dense in the body part of the tumor is definite，and the tuˉmor is clear.Conclusion 99m Tc-BDI-1can go through the tumor vessel wall and get into the tumor，and keep the antibody’s affinity and the special combining ability.
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膀胱癌是泌尿系统发病率最高的恶性肿瘤。Bamias等 [1] 标记 111 In抗膀胱癌单克隆抗体AUA1成功地进行肿瘤显像，引起广泛关注。抗人膀胱癌单克隆抗体BDI-1也能和人膀胱相关抗原特异性结合 [2～3] ， 131 I-BDI-1标记物人体膀胱癌的实验性显像较为清晰 [4，5]，而且 99m Tc-BDI-1人体膀胱癌放射免疫显像剂也成功试用于人体 [6～9] 。为了使99m Tc-BDI-1显像剂更好地用于临床研究，本文对其标记方法和荷瘤裸鼠显像进行了探讨。报告如下。
1 材料与方法
1.1 细胞株和裸鼠 人膀胱癌EJ细胞株由北京大学泌尿外科研究所提供，常规方法传代培养。EJ细胞用于测定 99m Tc-BDI-1标记抗体的免疫活性分数及亲和常数。ICR来源的裸小鼠，6～8周龄，由中山大学实验动物中心提供。
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1.2 方法
1.2.1 BDI-1单克隆抗体的纯化 向Balb/c小鼠腹腔注射抗人膀胱杂交瘤细胞5×10 6 个，10天后收集腹水，经饱和硫酸铵沉淀后过ProteinG-agarose(德国Boehringer Mannheim公司提供)亲和层析柱，获得纯化的抗人膀胱癌单克隆抗体BDI-1(IgG)。经浓缩、鉴定后分装-80℃保存，待用。
1.2.2 99m Tc-BDI-1的标记和纯化 首先，用2-巯基乙醇(德国Boehringer Mannheim公司提供)直接还原BDI-1 [8] 。在内含150μg BDI-1抗体的溶液中加入2-巯基乙醇5μl，摇匀，30℃水浴中孵育30min，加入Sephadex-G50柱(7mm×8mm)中分离，用pH7.0的0.2mol/L磷酸盐缓冲液洗脱，收集第一峰。然后标记和纯化 99m Tc-BDI-1。 99 Mo- 99 Tc m 发生器为中国原子能科学研究院提供。注射用亚锡亚甲二磷酸盐(MDP)冻干品(批号:20031212)亦由中国原子能科学研究院提供，每支含MDP5mg，SCI 2 ·2H 2 O0.5mg。用2ml生理盐水溶解MDP，取40μl加入上述还原后的BDI-1抗体反应瓶内。再加入 99m TcO 4 -185MBq/0.5ml，室温下摇动反应15min。将反应产物移入Sephadex-G50柱(10mm×150mm)中分离，用pH7.4的0.2mol/L磷酸盐缓冲液洗脱，收集到的第一峰即为 99m Tc-BDI-1。
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1.2.3 99m Tc-BDI-1抗体的鉴定 99m Tc-BDI-1的放化纯度测定按文献 [9] 方法，以硅胶板为支持物，以生理盐水为展开剂，行薄层层析分析。 99m Tc-BDI-1标记抗体的免疫活性分数及亲和常数的测定按文献 [10] ，同一浓度的标记抗体与不同浓度的E-J细胞在室温下反应3h后测定每管的cpm值(T值)及细胞结合的cpm值(B值)。以细胞浓度的倒数为横坐标，T/B为纵坐标，作图计算出标记抗体的免疫活性分数。
1.2.4 荷瘤裸鼠培育和 99m Tc-BDI-1显像 ICR裸小鼠15只，肩部皮下接种5×10 6 个EJ细胞，4周后长成直径1cm的人膀胱癌肿物。将荷瘤裸鼠分5组，经尾静脉分别注射不同量的99m Tc-BDI-1标记抗体，即6.0MBq/0.3ml、12.0MBq/0.3ml、18.0MBq/0.3ml、24.0MBq/0.3ml、30.0MBq/0.3ml。分别在注射后4h、8h、16h和24h进行显像。
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显像设备是SIEMESN E.CAM/ICON双探头SEPET仪，探头配置低能通用型准直器。采集静态影像，采集条件:Zoom=3.20，256×256矩阵，能窗宽度20%(峰位140keV)。采集时间8min。然后勾画感兴趣区，提取计数，定量测定肿瘤内摄取 99m Tc-BDI-1标记抗体的数量和活性。
2 结果
2.1 标记率及放化纯度 99m Tc-BDI-1抗体标记率为70.1%;标记物经Sephadex-G50分离纯化后，用薄层层析法测定放射化学纯度。放射化学纯度>92.1%。
2.2 标记抗体的免疫活性分数及亲和常数测定 标记抗体的免疫活性分数为80.5%;不同稀释度的标记抗体与同一浓度的细胞室温下反应3h后，以Scatchard作图法检测出标记抗体 99m Tc-BDI-1对EJ细胞膜表面抗原的亲和常数为1.31×10 -9 M -1 。
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2.3 荷瘤裸鼠培育和 99m Tc-BDI-1显像 99m Tc-BDI-1经荷瘤裸鼠尾静脉注射后分别在4、16、22h显像。获得的影像清晰、对比度良好，随着时间的延长，本底逐渐降低， 99mTc-BDI-1在瘤体部位的浓集量增多，22h时瘤体清晰可辨。显像结果表明 99m Tc-BDI-1能够穿过肿瘤组织中的血管壁进入肿瘤组织，并保留了抗体的亲合和特异结合力。
3 讨论
膀胱肿瘤是泌尿生殖系统中最常见的肿瘤，其中上皮性肿瘤占98%，而移行细胞癌(BTCC)占上皮肿瘤的90%以上，临床上占有重要的地位。特点是发病率高、复发率高、治疗较复杂，单纯TUR术的初发膀胱癌1年复发率达43%，复发性膀胱癌1年再发率高达70%，大多数复发于6～12个月内 [12] 。因此，提高生存率、预防复发一直是临床关注的热点之一。免疫疗法在预防膀胱癌复发中取得了一定的疗效，但由于免疫毒素作为一种异种蛋白，进入血流后可很快产生抗免疫毒素的抗体，因而限制了免疫毒素经血液的应用，成为免疫毒素治疗肿瘤的一大障碍。
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膀胱是一个与外界相通的腔形器官，免疫毒素通过灌注进入膀胱，由于不经过血循环，多次灌注没有产生抗免疫毒素抗体的机会。但免疫毒素使用量大、对于较大的肿瘤效果不佳。Bamias等 [1] 用放射性核素成功地标记膀胱癌相关单克隆抗体经膀胱灌注，不但为治疗膀胱癌提供了新的方法，而且在体外可以用影像设备显示浓集在靶点病灶的数量、停留时间，并可以计算出靶点病灶接受的辐射剂量。BDI-1是一种抗人膀胱癌单克隆抗体 [2] ，特异地和膀胱癌细胞结合，它可以作为膀胱癌特异的导向载体，制备多种免疫偶物，用于肿瘤的诊断、治疗及预防复发。放射性核素标记的BDI-1单克隆抗体已被用于膀胱癌的诊断和治疗，并见多篇报道 [2～10] ，特别是用放射性核素标记BDI-1 单克隆抗体治疗膀胱癌前景非常乐观 [13～15] ，所以倍受关注。但是，由于放射性核素标记的BDI-1单克隆抗体技术存有一些难点，尚未在临床中广为应用。为此，本研究在复习文献的基础上，进一步研究和验证 99m Tc-BDI-1的标记技术和靶点病灶的分布，旨在为临床应用前做好必要的技术准备。本研究按照文献 [16] 的方法成功地制备了 99m Tc-BDI-1，其免疫活性分数、亲和常数、放化纯度及标记率和文献报道基本相同， 99m Tc-BDI-1的放化纯度大于90%，免疫活性分数为81%。人膀胱癌荷瘤裸鼠体内分布及肿瘤显像结果表明， 99m Tc-BDI-1标记抗体能特异集中在肿瘤部位。本研究再次证明 99m Tc-BDI-1能够较好地显示人膀胱癌，作为一种无创伤性诊断方法有前景，并为放射性核素导向治疗提供了较好的载体。
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膀胱癌中70%～80%为表浅性，膀胱是一个与外界相通的腔形器官，将抗膀胱癌单克隆抗体与放射性核素偶联后膀胱灌注可以进行放射免疫显像和治疗。由于抗体直接灌注膀胱内不会进入血流，反复灌注也不产生抗抗体。放射性核素标记的单克隆抗体除了定位，还可同时进行治疗，早期诊断肿瘤的潜力超过B超、CT及MRI。膀胱癌的治疗多采用经尿道电切术和开放性手术。若将抗膀胱癌单克隆抗体偶联生物毒素、化疗药物和放射性核素，进行膀胱灌注导向治疗，患者将免受多次复发后的手术之苦。目前，已经分离出多种膀胱癌的相关单克隆抗体 [17] ，相信对于膀胱癌的免疫学诊断和治疗将有较大的突破。
参考文献
1 Bamias A，Keane P，Krausz T，et al.Intravesical administration of radioˉlabelled antitumor monoclonal antibody in bladder carcinoma.Cancer Res，1991，51:724-728.
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3 俞莉章，张春丽，谢蜀生，等.抗人膀胱癌单克隆抗体对载瘤裸鼠放射免疫显像的实验研究.中华泌尿外科杂志，1991，12:83.
4 赵，谢蜀生，龙振洲，等.抗人膀胱癌免疫毒素的构建和体外杀伤活性.中华肿瘤杂志，1992，14:109.
5 俞莉章，顾方六，韩铁山，等.抗膀胱癌单克隆抗体膀胱内灌注放射免疫显像诊断.中华泌尿外科杂志，1993，14:252-253.
6 张春丽，俞莉章，赵，等. 131 Ⅰ-抗膀胱癌单克隆抗体对荷瘤裸鼠的放射免疫治疗研究.中华泌尿外科杂志，1994，15:3-5.
7 布卡，俞莉章，张春丽，等.抗人膀胱癌单克隆抗体的 99m Tc标记及荷瘤裸鼠放射免疫显像.中华外科杂志，1996，34:10-12.
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8 李宁忱，俞莉章，张春丽，等. 99m Tc标记单克隆抗体膀胱内灌注诊断膀胱癌.中华外科杂志，1998，36:54-56.
9 Wang RF.Clinical application of radioimmunoimaging with 99m Tc-BDI-1in the diagnosis of bladder cancer.Chin Med J，2000，113:136-139.
10 Schwarz A，Steinstrabber A.A novel approach to 99m Tc labelled monoˉclonal antibody.J Nucl Med，1987，28:721.
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作者单位:518036广东深圳北京大学深圳医院
(收稿日期:2004-02-14)
(编辑李 阳), http://www.100md.com