血浆或血清样本中丙型肝炎病毒抗原的检测
http://www.100md.com
2004年8月19日
孟淑芳 李秀华 尹红章 李德富 2004-8-8 15:17:43 中华微生物学和免疫学杂志 1999年第1期第19卷 免疫检测
为控制HCV的血源传播，世界各国均已开展对献血员HCV抗体的检测。但尽管如此输血后HCV感染仍时有发生，为此研制并建立HCV抗原检测方法非常必要，有关这方面的工作国内外报道的还很少。
自1990年起我们开展了抗HCV单克隆抗体的研制工作，至今已获得了抗HCV不同区段的多株单抗，利用HRP标记及未标记的抗HCV核心区及NS3区的多株单抗分别进行了同区单抗间及不同区单抗间的多种交叉组合试验，构建了以核心区C39及NS3区C7-6(10μg/ml)为包被抗体，以HRP-结合的C39及NS3区C7-57(1∶600 )为标记抗体的夹心模式。以NS3区免疫原C7为抗原，此方法可测至5ng/ml。348份义务献血员样本的检测均值为0.0915，SD值为0.0824，以阴性对照均值加3倍SD值(0.25 )定为此检测方法的Cut off值。
其后，分析了大量样本中HCV的检出情况，其中包括685份抗HCV 阳性血浆样本(Abbott 抗体检测试剂盒筛查为阳性)，1 469份高危人群血浆样本(华美公司HCV抗体检测试剂初筛，Abbott试剂复查为抗HCV阴性)，1 196份临床输血用样本(为AKZ0试剂复查为抗HCV阴性)。结果表明，685份抗HCV阳性样本中，87份为HCV抗原反应阳性(12.70%)；1 469份高危人群血浆样本中，46份(3.13%)HCV抗原阳性；1 196份临床输血用样本中有44份(3.68%)HCV抗原阳性。
对于这些抗原反应阳性样本，又进行了套式HCV PCR的确证。检测结果表明， 20份抗HCV阳性的HCV抗原反应阳性样本中，18份(90.0%)为HCV RNA 阳性；抗原反应阳性而抗HCV阴性的42份高危人群样本及44份临床输血用样本中分别有19 份(45.2%)及10份(22.7%)为HCV RNA阳性。
上述结果表明，用抗HCV特异性单克隆抗体所构建的HCV抗原检测方法直接测定血浆样本仍可测得HCV抗原,并经HCV PCR所证实，提示直接在血浆中检测HCV抗原是可行的。目前正在对抗原阳性样本的受供血者进行追踪研究。, http://www.100md.com
为控制HCV的血源传播，世界各国均已开展对献血员HCV抗体的检测。但尽管如此输血后HCV感染仍时有发生，为此研制并建立HCV抗原检测方法非常必要，有关这方面的工作国内外报道的还很少。
自1990年起我们开展了抗HCV单克隆抗体的研制工作，至今已获得了抗HCV不同区段的多株单抗，利用HRP标记及未标记的抗HCV核心区及NS3区的多株单抗分别进行了同区单抗间及不同区单抗间的多种交叉组合试验，构建了以核心区C39及NS3区C7-6(10μg/ml)为包被抗体，以HRP-结合的C39及NS3区C7-57(1∶600 )为标记抗体的夹心模式。以NS3区免疫原C7为抗原，此方法可测至5ng/ml。348份义务献血员样本的检测均值为0.0915，SD值为0.0824，以阴性对照均值加3倍SD值(0.25 )定为此检测方法的Cut off值。
其后，分析了大量样本中HCV的检出情况，其中包括685份抗HCV 阳性血浆样本(Abbott 抗体检测试剂盒筛查为阳性)，1 469份高危人群血浆样本(华美公司HCV抗体检测试剂初筛，Abbott试剂复查为抗HCV阴性)，1 196份临床输血用样本(为AKZ0试剂复查为抗HCV阴性)。结果表明，685份抗HCV阳性样本中，87份为HCV抗原反应阳性(12.70%)；1 469份高危人群血浆样本中，46份(3.13%)HCV抗原阳性；1 196份临床输血用样本中有44份(3.68%)HCV抗原阳性。
对于这些抗原反应阳性样本，又进行了套式HCV PCR的确证。检测结果表明， 20份抗HCV阳性的HCV抗原反应阳性样本中，18份(90.0%)为HCV RNA 阳性；抗原反应阳性而抗HCV阴性的42份高危人群样本及44份临床输血用样本中分别有19 份(45.2%)及10份(22.7%)为HCV RNA阳性。
上述结果表明，用抗HCV特异性单克隆抗体所构建的HCV抗原检测方法直接测定血浆样本仍可测得HCV抗原,并经HCV PCR所证实，提示直接在血浆中检测HCV抗原是可行的。目前正在对抗原阳性样本的受供血者进行追踪研究。, http://www.100md.com