一种显示肥大细胞的好方法--六胺银法
http://www.100md.com
2004年8月20日
王涛 修贺明 徐铮 贲长恩 2004-8-2 20:34:13 解剖科学进展 2000年第2期第6卷 技术方法
在PASM染色的睾丸组织切片中，我们发现睾丸间质内一些细胞的颗粒能被六胺银很好的显示，并且特异性很好，只显示该种细胞的颗粒，而间质内的其它细胞均不着色。从组织学推测，睾丸间质内有颗粒的细胞只有肥大细胞，其它细胞内均无颗粒。为了证实这一推测，对大鼠的肠系膜铺片进行肥大细胞染色，分别采用六胺银法，六胺银和甲苯胺兰双重染色。结果六胺银显示的正是甲苯胺兰显示的那些颗粒，表明六胺银染的正是肥大细胞的颗粒。现将方法介绍如下：
方法一：按六胺银染色的经典方法操作。①冰冻切片经10%甲醛固定10min，然后入水；或石蜡切片常规脱蜡至水。②1%过碘酸氧化30min。③蒸馏水洗三次。④入新鲜配制的六胺银染液1h或稍长一些时间，镜下观察肥大细胞的颗粒呈黑色为止。⑤入蒸馏水洗三次。⑥0.2%氯化金溶液调色至组织呈银灰色时为止，约1min。⑦入5%海波液固定5min。⑧充分水洗后，蒸馏水洗2次。⑨复染或不复染。⑩常规脱水，透明，封固。
方法二：①冰冻切片经10%甲醛固定，然后入水或石蜡切片常规脱蜡至水。②入新鲜配制的六胺银染液染1小时或稍长一些时间，镜下观察肥大细胞颗粒显示清晰为止。③水洗后，常规脱水，透明，封片。
用六胺银法显示肥大细胞有以下优点：①适用范围较广，以睾丸组织为例，冰冻切片经福尔马林固定，或是经福尔马林或Bouin固定的石蜡切片都能很好的显示肥大细胞；②方法简单，易于掌握。尤其是方法二，更是简便易行；③染色较好，肥大细胞的颗粒显示得非常清晰；④用方法二染色后，六胺银还可起到媒染的作用，可用甲绿或其它染料更清楚地显示肥大细胞的轮郭。然而需要说明的是，目前介绍组织切片染色技术的书籍中尚未见六胺银法显示肥大细胞的论述，需要通过大量的实践来完善这一染色技术。该方法的适用范围及肥大细胞能被六胺银染色的机理尚有待进一步探讨。, http://www.100md.com
在PASM染色的睾丸组织切片中，我们发现睾丸间质内一些细胞的颗粒能被六胺银很好的显示，并且特异性很好，只显示该种细胞的颗粒，而间质内的其它细胞均不着色。从组织学推测，睾丸间质内有颗粒的细胞只有肥大细胞，其它细胞内均无颗粒。为了证实这一推测，对大鼠的肠系膜铺片进行肥大细胞染色，分别采用六胺银法，六胺银和甲苯胺兰双重染色。结果六胺银显示的正是甲苯胺兰显示的那些颗粒，表明六胺银染的正是肥大细胞的颗粒。现将方法介绍如下：
方法一：按六胺银染色的经典方法操作。①冰冻切片经10%甲醛固定10min，然后入水；或石蜡切片常规脱蜡至水。②1%过碘酸氧化30min。③蒸馏水洗三次。④入新鲜配制的六胺银染液1h或稍长一些时间，镜下观察肥大细胞的颗粒呈黑色为止。⑤入蒸馏水洗三次。⑥0.2%氯化金溶液调色至组织呈银灰色时为止，约1min。⑦入5%海波液固定5min。⑧充分水洗后，蒸馏水洗2次。⑨复染或不复染。⑩常规脱水，透明，封固。
方法二：①冰冻切片经10%甲醛固定，然后入水或石蜡切片常规脱蜡至水。②入新鲜配制的六胺银染液染1小时或稍长一些时间，镜下观察肥大细胞颗粒显示清晰为止。③水洗后，常规脱水，透明，封片。
用六胺银法显示肥大细胞有以下优点：①适用范围较广，以睾丸组织为例，冰冻切片经福尔马林固定，或是经福尔马林或Bouin固定的石蜡切片都能很好的显示肥大细胞；②方法简单，易于掌握。尤其是方法二，更是简便易行；③染色较好，肥大细胞的颗粒显示得非常清晰；④用方法二染色后，六胺银还可起到媒染的作用，可用甲绿或其它染料更清楚地显示肥大细胞的轮郭。然而需要说明的是，目前介绍组织切片染色技术的书籍中尚未见六胺银法显示肥大细胞的论述，需要通过大量的实践来完善这一染色技术。该方法的适用范围及肥大细胞能被六胺银染色的机理尚有待进一步探讨。, http://www.100md.com