川芎嗪对肺癌患者外周血单个核细胞分泌IL-4、IL-6的影响
作者：张春玲 肖伟
单位：张春玲(青岛医院第二附属医院 山东青岛266042)；肖伟(山东医科大学附属医院)
关键词：
山东医药001821 川芎嗪(TTMP)是活血行气中药川芎的主要有效成分，在治疗心血管疾病方面有肯定的疗效，而且毒副反应小。研究发现TTMP对正常小鼠和肿瘤小鼠脾淋巴细胞增殖反应有双向调节作用[1]。本试验旨在探讨TTMP对正常人和肺癌病人PBMC分泌IL-4、IL-6的影响，以进一步了解其抗肿瘤作用的机理。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择17例健康成年人作为正常对照组，男13例，女4例；年龄42～70岁，中位数58岁；无心脑肝肾疾病。另取14例肺癌患者，男10例，女4例；年龄50～75岁，中位数61岁。病理证实为小细胞肺癌2例，鳞癌6例，腺癌5例，细支气管肺泡癌1例。按TNM分期标准[2]，Ⅱb2例，Ⅲa7例，Ⅲb3例，Ⅳ2例。均为初诊患者，未接受过有关治疗。川芎嗪(TTMP)由北京第四制药厂生产。RPMI-1640为日本Nissiui制药株式会社产品。IL-4、IL-6试剂盒为美国Gemzyme公司产品。
, 百拇医药
1.2 方法 ①标本的采集：清晨空腹抽取肝素抗凝静脉血10ml，分离PBMC，制备淋巴细胞悬液(浓度为1×107/ml)，即于24孔培养板中，分别加入100μl细胞悬液。用药组每孔加入1ml药液100μl，使其终浓度为100μg/ml；对照组加入RPMI-1640100μl。两组均设3复孔，置CO2培养箱中孵育72小时，收集上清液放于-70℃冻存待测。②上清液IL-4、IL-6的测定：采用酶联免疫吸附试验(ELISA)。分别记录其在紫外分光光度计40pcm处的吸光度，以标准品的浓度为横坐标，以相应的吸光度值为纵坐标，制作标准曲线；然后以待测上清液样品的吸光度值在标准曲线上查出相当的浓度值。按计量资料进行统计学处理，采用t检验。
2 结果
2.1 正常人和肺癌患者PBMC分泌IL-4、IL-6测定 见表1。
表1 两组PBMC上清液中IL-4与IL-6浓度对比分析(x±s)
, 百拇医药
n
IL-4
IL-6
正常组
肺癌组
t值
P值
17
14
3.17±0.98
29.73±7.52
2.771
0.016
, 百拇医药
44.16±14.86
340.16±109.56
5.477
0.0001
2.2 TTMP对正常人及肺癌患者PBMC分泌IL-4、IL-6的影响 见表2。
表2 TTMP对PBMC分泌IL-4、IL-6的影响(x±s)
用药
IL-4
IL-6
正常组
肺癌组
, 百拇医药
空白对照
TTMP(100μg/ml)
空白对照
TTMP(100μg/ml)
3.17±0.98
2.75±0.76
29.73±7.5
0.67±2.29?
44.16±14.86
36.12±10.18
340.16±109.56
, http://www.100md.com
90.11±80.15??
注：与正常组比较，?P<0.05，??P<0.01
3 讨论
Th1、Th2细胞为CD+4的Th细胞的两个功能性亚群。Th1主要分泌IL-2，IF-N-r。Th2主要分泌IL-4、IL-6、IL-k等。因此，通常将IL-2、IL-N-r代表Th1亚群，IL-4、IL-6代表Th2亚群。由表1可见，肺癌患者PBMC分泌IL-4、IL-6明显高于正常对照组，P值分别<0.05和<0.01，说明肺癌患者PBMCTh2类细胞因子占优势状态，这与Asselin-Paturel-C等[3]的最新研究一致。研究资料表明，肺癌患者体内Th2强势状态将引起宿主抗肿瘤细胞免疫发生偏离，抑制多种抗肿瘤免疫应答，保护肿瘤细胞免受特异性CTL的杀伤，促进肿瘤细胞的生长作用[4]。因此，促进Th1/Th2逆转是目前抗肿瘤免疫治疗的研究热点。本试验用活血化瘀中药TTMP与肺癌患者PBMC共培养后，发现其IL-4、IL-6的浓度明显低于对照组(P<0.05和0.01)。证明TTMP有促Th1/Th2逆转作用。由此看来，TTMP通过抑制Th2来调节机体细胞免疫功能是其增强机体抗肿瘤作用机理之一。
, 百拇医药
参考文献
1，刘锦蓉，强文安，毕松梅.川芎嗪对小鼠脾淋巴细胞增强反应的影响。华西医科大学学报，1995，26(2)：177～180.
2，吴怀中.肿瘤最新TNM分类和分期.中华肿瘤杂志，1998，20(5)：398.
3，Asselin-Paturel-C，Echakir-H，Carayol-G，et al.Quanti-tative analysis of Th1，Ths urel TGF-betal.Cytokine expression in tumor，TIL and PBC of non-smal cell lung Cancer patients.Int J Cancer，1998，11(1)：1～12.
4，张国安，刘小明，康德智，等.脑胶质瘤患者白细胞介素6和血小板促生长因子的变化.中华医学检验杂志，1996，19：1.
(2000-06-05收稿), 百拇医药
单位：张春玲(青岛医院第二附属医院 山东青岛266042)；肖伟(山东医科大学附属医院)
关键词：
山东医药001821 川芎嗪(TTMP)是活血行气中药川芎的主要有效成分，在治疗心血管疾病方面有肯定的疗效，而且毒副反应小。研究发现TTMP对正常小鼠和肿瘤小鼠脾淋巴细胞增殖反应有双向调节作用[1]。本试验旨在探讨TTMP对正常人和肺癌病人PBMC分泌IL-4、IL-6的影响，以进一步了解其抗肿瘤作用的机理。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择17例健康成年人作为正常对照组，男13例，女4例；年龄42～70岁，中位数58岁；无心脑肝肾疾病。另取14例肺癌患者，男10例，女4例；年龄50～75岁，中位数61岁。病理证实为小细胞肺癌2例，鳞癌6例，腺癌5例，细支气管肺泡癌1例。按TNM分期标准[2]，Ⅱb2例，Ⅲa7例，Ⅲb3例，Ⅳ2例。均为初诊患者，未接受过有关治疗。川芎嗪(TTMP)由北京第四制药厂生产。RPMI-1640为日本Nissiui制药株式会社产品。IL-4、IL-6试剂盒为美国Gemzyme公司产品。
, 百拇医药
1.2 方法 ①标本的采集：清晨空腹抽取肝素抗凝静脉血10ml，分离PBMC，制备淋巴细胞悬液(浓度为1×107/ml)，即于24孔培养板中，分别加入100μl细胞悬液。用药组每孔加入1ml药液100μl，使其终浓度为100μg/ml；对照组加入RPMI-1640100μl。两组均设3复孔，置CO2培养箱中孵育72小时，收集上清液放于-70℃冻存待测。②上清液IL-4、IL-6的测定：采用酶联免疫吸附试验(ELISA)。分别记录其在紫外分光光度计40pcm处的吸光度，以标准品的浓度为横坐标，以相应的吸光度值为纵坐标，制作标准曲线；然后以待测上清液样品的吸光度值在标准曲线上查出相当的浓度值。按计量资料进行统计学处理，采用t检验。
2 结果
2.1 正常人和肺癌患者PBMC分泌IL-4、IL-6测定 见表1。
表1 两组PBMC上清液中IL-4与IL-6浓度对比分析(x±s)
, 百拇医药
n
IL-4
IL-6
正常组
肺癌组
t值
P值
17
14
3.17±0.98
29.73±7.52
2.771
0.016
, 百拇医药
44.16±14.86
340.16±109.56
5.477
0.0001
2.2 TTMP对正常人及肺癌患者PBMC分泌IL-4、IL-6的影响 见表2。
表2 TTMP对PBMC分泌IL-4、IL-6的影响(x±s)
用药
IL-4
IL-6
正常组
肺癌组
, 百拇医药
空白对照
TTMP(100μg/ml)
空白对照
TTMP(100μg/ml)
3.17±0.98
2.75±0.76
29.73±7.5
0.67±2.29?
44.16±14.86
36.12±10.18
340.16±109.56
, http://www.100md.com
90.11±80.15??
注：与正常组比较，?P<0.05，??P<0.01
3 讨论
Th1、Th2细胞为CD+4的Th细胞的两个功能性亚群。Th1主要分泌IL-2，IF-N-r。Th2主要分泌IL-4、IL-6、IL-k等。因此，通常将IL-2、IL-N-r代表Th1亚群，IL-4、IL-6代表Th2亚群。由表1可见，肺癌患者PBMC分泌IL-4、IL-6明显高于正常对照组，P值分别<0.05和<0.01，说明肺癌患者PBMCTh2类细胞因子占优势状态，这与Asselin-Paturel-C等[3]的最新研究一致。研究资料表明，肺癌患者体内Th2强势状态将引起宿主抗肿瘤细胞免疫发生偏离，抑制多种抗肿瘤免疫应答，保护肿瘤细胞免受特异性CTL的杀伤，促进肿瘤细胞的生长作用[4]。因此，促进Th1/Th2逆转是目前抗肿瘤免疫治疗的研究热点。本试验用活血化瘀中药TTMP与肺癌患者PBMC共培养后，发现其IL-4、IL-6的浓度明显低于对照组(P<0.05和0.01)。证明TTMP有促Th1/Th2逆转作用。由此看来，TTMP通过抑制Th2来调节机体细胞免疫功能是其增强机体抗肿瘤作用机理之一。
, 百拇医药
参考文献
1，刘锦蓉，强文安，毕松梅.川芎嗪对小鼠脾淋巴细胞增强反应的影响。华西医科大学学报，1995，26(2)：177～180.
2，吴怀中.肿瘤最新TNM分类和分期.中华肿瘤杂志，1998，20(5)：398.
3，Asselin-Paturel-C，Echakir-H，Carayol-G，et al.Quanti-tative analysis of Th1，Ths urel TGF-betal.Cytokine expression in tumor，TIL and PBC of non-smal cell lung Cancer patients.Int J Cancer，1998，11(1)：1～12.
4，张国安，刘小明，康德智，等.脑胶质瘤患者白细胞介素6和血小板促生长因子的变化.中华医学检验杂志，1996，19：1.
(2000-06-05收稿), 百拇医药