胃溃疡大鼠胃粘膜血流量与泌酸变化的研究
天津医学院第二附属医院 1外科 2病理科 天津市 300211
孙云，男，1953年7月16日生，医学硕士，主治医师. 自1976年始从事消化外科的临就床和实验研究工作，曾在期刊和国际、国内学术会议上发表多篇论文，其中二篇分别荣获第二届和第四届天津市优秀论文奖.
项目负责人：孙云，300211，天津市河西区平江道，天津医学院第二附属医院.
Tel.0086-22-284801. Ext 201
收稿日期 1993-03-18 修回日期 1993-05-25
Abstract34 male sprague_dawley rats were randomly separated into 3 groups. An experimental model of gastric ulcer by means of causing regurgitation of all duodenal content and that of healing gastric ulcer by diversion were established by operation. Gastric juice pH, the volume of gastric mucosal blood flow (GMBF), the density of G cell in antrum mucosa and the number of parietal cell were determined and histomorphological inspection was made. Compared with the control group it was shown that a chronic ulcer of 8.84±3.8(cm2)-3was developed in antrum on the lesser curvature of stomach, in the gastric ulcer group gastric juicepH was increased, the volume of GMBF decreased by an average of 22%, the density of G cell and the number of parietal cell increased respectively by 23% and 38%. In the healed gastric ulcer group, gastric juice pH was lower, the average increase of GMBF was 25%, the decrease in the densityof G of cell and the number of parietal cell were respectively 18% and 26% as compared with that of the gastric ulcer group. Mucosal anaemia and high peracidity may be important factors of causing ulcer. An increased mucosal blood supply and decreased gastric acid secretion may promote the healing of ulcer.
, http://www.100md.com
Subject headings stomach ulcer; gastric mucosa; gastric acid/secretion
SUN Y, LI QR, ZHAO XL.Study on the volume of gastric mucosal blood flow andchange of acid secretion in rats with gastric ulcer.
Xin Xiaohua BingxueZazhi. 1993;1(3);137-139
摘 要用手术将十二指肠内容物持续胃内反流制成大鼠胃溃疡及经转流后的溃疡愈合模型进行研究. 结果表明，溃疡组于胃窦小弯侧可见8.84(m2)-3±3.08(m2)-3的慢性溃疡形成，并显示胃粘膜血流量降低，G细胞密度、壁细胞数增加. 溃疡愈合组经转流后大部分溃疡已愈合，G细胞密度、壁细胞数降低，粘膜血流量增加. 本实验提示，泌酸细胞增多，泌酸量增加和胃粘膜缺血可能是溃疡形成的重要因素，增加胃粘膜的血液供应，降低胃酸分泌可促进溃疡愈合.
, 百拇医药
主题词 胃溃疡；胃粘膜；胃酸/分泌
孙云,李庆瑞,赵秀兰.胃溃疡大鼠胃粘膜血流量与泌酸变化的研究.新消化病学杂志，1993；1(3)：137-139
0 引言
胃溃疡的发病机制中胃粘膜屏障损害的研究较多[1]，但粘膜微循环动力及泌酸细胞变化与溃疡发生的关系少有报道，本文将对这一问题进行探讨.
1 材料和方法
1.1 实验动物及分组 ♂ 200g～250g Sprague Dawley大鼠34只，随机分成3组. 对照组13只，溃疡组12只，溃疡愈合组9只.
, 百拇医药
1.2 动物模型制作 禁食24h，随意饮水，用3%戍巴比妥钠腹腔注射麻醉(30mg/kg)，术后禁食3d，可饮水，d4开始普通饲料喂养. 溃疡组模型：开腹，将距Treitz韧带10cm处空肠侧壁与前胃部分的前壁侧侧吻合，4wk后再开腹将胆胰管开口部远端十二指肠切断，两断端分别包埋，以致全部的十二指肠内容物持续向胃内反流. 溃疡愈合组模型：胃肠吻合4wk后，切断胆胰管开口部远端十二指肠，待术后12wk再开腹，将近端十二指肠的远端与距胃肠吻合10cm的远端空肠进行侧侧吻合，并将十二指肠近端于临幽门处切断分别包埋，使十二指肠内容物转流直接进入空肠.
1.3 检测项目 对照组、溃疡组均于十二指肠切断术后12wk，溃疡愈合组于转流手术后10wk进行各项检测.
1.3.1 胃液pH值测定 开腹后于大鼠前胃部分的前壁穿剌吸取空腹胃液，离心15min(3000r/min)，用CG 817型微电极pH计(Tokat Irika Co. Ltd日本)测定其上清液的pH值.
, 百拇医药
1.3.2 胃粘膜血流量测定 于腺胃前壁剪一小口，探测电极分别向小弯、大弯方向剌入腺胃粘膜，用RBF-2型电解式组织血流计(Biomedical science Co Ltd日本)分别测定二个部位的粘膜血流量，其均值为胃粘膜血流量.
1.3. 3 大体形态和组织学检查 将胃取下，沿大弯剪开，冲洗去除胃内容物，观察胃粘膜病变，溃疡面积(mss2)-3=12ab(a=溃疡最大直径，b=最小直径). 平行割取胃窦小弯及胃体前壁组织标本，取与粘膜垂直的厚为5m-6的边连续切片，HE染色，进行组织学检查.
1.3.4 G细胞密度测定 用过氧化物酶抗过氧化物酶(PAP) 法进行G细胞染色. 将1 2m-3目镜测微器于ML-4M型显微镜放大200倍条件下，依次计算每个单位长度(222m-6)内粘膜肌层到表层内含有的全部G细胞数，其均值表示该切片单位长度内的G细胞密度，同组中全部切片G细胞密度的均值为该组的G细胞密度.
, 百拇医药
1.3.5 壁细胞计数 用HE染色切片每222m-6计算一个单位长度(44m-6)内全部的有核壁细胞数，再以同组内的所有切片单位长度内有核壁细胞数的平均值为该组的壁细胞计数.
2 结果
2.1 胃液pH值、胃粘膜血流量、G细胞密度和壁细胞数的测定结果 1.
表1 大鼠溃疡组和溃疡愈合组胃粘膜血流量、G细胞和壁细胞数 (x-±s)
, 百拇医药
bP<0.01与对照组比较；dP<0.01与溃疡组比较.
2.2 大体形态及组织学检查 溃疡组在胃窦小弯侧均可见到单发的溃疡(平均为8.84(m2)-3±3.08(m2)-3，粘膜水肿增厚. 镜下可见溃疡表层有炎性渗出物、坏死组织，深面为肉芽及疤痕，其中小动脉壁增厚，内膜呈增生性炎症，可见神经节细胞变性. 溃疡愈合组粘膜略有增厚. 1例标本仍可见到7.5(m2)-3的溃疡未愈合，镜下显示粘膜肌层紊乱，较多的新生腺管及炎细胞浸润.
3 讨论
胃粘膜屏障损害在胃溃疡发病中的作用已有较多的临床和实验研究. 近20a来胃粘膜血流量与胃溃疡发生的关系逐渐被人们所认识. 胃粘膜血流在维持正常粘膜功能、调节胃酸分泌中起重要作用，更是粘膜防御功能的主要因素[2]. 本实验溃疡组胃粘膜血流量明显减少，提示粘膜缺血对溃疡的形成有一定作用. 粘膜缺血可防碍胃粘膜组织的氧合功能和能量代谢，削弱了抗损伤能力[3]，使胃粘膜缓冲和移除反流进组织中的H+的能力降低，导致H+的聚集，粘膜酸化形成溃疡. 粘膜血流量的增加是组织修复的需要. 本实验溃疡愈合组粘膜血流量比溃疡组增加了25%. 1例溃疡未愈合，粘膜血流量只增加4%，与Kamade[4]的报告相近. Wright[5]认为在溃疡愈合期胃粘膜血流的增加可能是前列腺素E在溃疡边缘区域合成增多. 本实验结果提示粘膜血流量增加即预示溃疡趋向愈合期，而在溃疡愈合期血流量不增加则预示溃疡难以治愈. 溃疡组胃窦粘膜G细胞密度明显增加，壁细胞数增多，预示着酸分泌量增加，其机制可能是由于碱性十二指肠内容物反流使胃内pH值增高，刺激胃窦G细胞增生，同时碱反流抑制胃窦D细胞分泌生长抑素，致使促胃液素释放增多，促使溃疡形成[6]. 由本研究提示泌酸量增加和胃粘膜血流量减少可能是溃疡形成的重要因素. 本实验采用的通过十二指肠内容物胃内反流所产生的胃溃疡模型与人类的胃溃疡相似，符号消化性溃疡的常见部位和病理形态特征，更符合于溃疡形成的自然发展过程，是一种较适宜的动物模型.
, http://www.100md.com
4 参考文献1 Du plessis DJ.pathogenesis of gastric ulcerationa Lancet,1965；1：974-978
2 Cheung LY. Gastric mucosal blood flow: its measurement and importance inmucosal defense mechanisms.
J SurgRes,1984;36:282-286
3 Menguy R. Role of gastric mucosal energy metabolism in the etiology of stress ulceration.
World J Surg, 1981；5：175-179
, http://www.100md.com
4 Kamade T, Kawano S, Sato N, et al. Gastric mucosal blood distributionand its changes in the healing process of
gastric ulcer. Gastroenterology,1983;84:1541-1548
5 Wright JP, Young GO, Klaff LJ, et al. Gastric mucosal prostglandin Elevels in patient with gastric ulcer disease and carcinoma.
Gastroenterology,1982;82:263-272
6 Thomas WEG. Duodeno gastric reflux A common factor in patho enesis of gastric and duodenal ulcer.
Lancet,1980;11:1166-1167, 百拇医药
孙云，男，1953年7月16日生，医学硕士，主治医师. 自1976年始从事消化外科的临就床和实验研究工作，曾在期刊和国际、国内学术会议上发表多篇论文，其中二篇分别荣获第二届和第四届天津市优秀论文奖.
项目负责人：孙云，300211，天津市河西区平江道，天津医学院第二附属医院.
Tel.0086-22-284801. Ext 201
收稿日期 1993-03-18 修回日期 1993-05-25
Abstract34 male sprague_dawley rats were randomly separated into 3 groups. An experimental model of gastric ulcer by means of causing regurgitation of all duodenal content and that of healing gastric ulcer by diversion were established by operation. Gastric juice pH, the volume of gastric mucosal blood flow (GMBF), the density of G cell in antrum mucosa and the number of parietal cell were determined and histomorphological inspection was made. Compared with the control group it was shown that a chronic ulcer of 8.84±3.8(cm2)-3was developed in antrum on the lesser curvature of stomach, in the gastric ulcer group gastric juicepH was increased, the volume of GMBF decreased by an average of 22%, the density of G cell and the number of parietal cell increased respectively by 23% and 38%. In the healed gastric ulcer group, gastric juice pH was lower, the average increase of GMBF was 25%, the decrease in the densityof G of cell and the number of parietal cell were respectively 18% and 26% as compared with that of the gastric ulcer group. Mucosal anaemia and high peracidity may be important factors of causing ulcer. An increased mucosal blood supply and decreased gastric acid secretion may promote the healing of ulcer.
, http://www.100md.com
Subject headings stomach ulcer; gastric mucosa; gastric acid/secretion
SUN Y, LI QR, ZHAO XL.Study on the volume of gastric mucosal blood flow andchange of acid secretion in rats with gastric ulcer.
Xin Xiaohua BingxueZazhi. 1993;1(3);137-139
摘 要用手术将十二指肠内容物持续胃内反流制成大鼠胃溃疡及经转流后的溃疡愈合模型进行研究. 结果表明，溃疡组于胃窦小弯侧可见8.84(m2)-3±3.08(m2)-3的慢性溃疡形成，并显示胃粘膜血流量降低，G细胞密度、壁细胞数增加. 溃疡愈合组经转流后大部分溃疡已愈合，G细胞密度、壁细胞数降低，粘膜血流量增加. 本实验提示，泌酸细胞增多，泌酸量增加和胃粘膜缺血可能是溃疡形成的重要因素，增加胃粘膜的血液供应，降低胃酸分泌可促进溃疡愈合.
, 百拇医药
主题词 胃溃疡；胃粘膜；胃酸/分泌
孙云,李庆瑞,赵秀兰.胃溃疡大鼠胃粘膜血流量与泌酸变化的研究.新消化病学杂志，1993；1(3)：137-139
0 引言
胃溃疡的发病机制中胃粘膜屏障损害的研究较多[1]，但粘膜微循环动力及泌酸细胞变化与溃疡发生的关系少有报道，本文将对这一问题进行探讨.
1 材料和方法
1.1 实验动物及分组 ♂ 200g～250g Sprague Dawley大鼠34只，随机分成3组. 对照组13只，溃疡组12只，溃疡愈合组9只.
, 百拇医药
1.2 动物模型制作 禁食24h，随意饮水，用3%戍巴比妥钠腹腔注射麻醉(30mg/kg)，术后禁食3d，可饮水，d4开始普通饲料喂养. 溃疡组模型：开腹，将距Treitz韧带10cm处空肠侧壁与前胃部分的前壁侧侧吻合，4wk后再开腹将胆胰管开口部远端十二指肠切断，两断端分别包埋，以致全部的十二指肠内容物持续向胃内反流. 溃疡愈合组模型：胃肠吻合4wk后，切断胆胰管开口部远端十二指肠，待术后12wk再开腹，将近端十二指肠的远端与距胃肠吻合10cm的远端空肠进行侧侧吻合，并将十二指肠近端于临幽门处切断分别包埋，使十二指肠内容物转流直接进入空肠.
1.3 检测项目 对照组、溃疡组均于十二指肠切断术后12wk，溃疡愈合组于转流手术后10wk进行各项检测.
1.3.1 胃液pH值测定 开腹后于大鼠前胃部分的前壁穿剌吸取空腹胃液，离心15min(3000r/min)，用CG 817型微电极pH计(Tokat Irika Co. Ltd日本)测定其上清液的pH值.
, 百拇医药
1.3.2 胃粘膜血流量测定 于腺胃前壁剪一小口，探测电极分别向小弯、大弯方向剌入腺胃粘膜，用RBF-2型电解式组织血流计(Biomedical science Co Ltd日本)分别测定二个部位的粘膜血流量，其均值为胃粘膜血流量.
1.3. 3 大体形态和组织学检查 将胃取下，沿大弯剪开，冲洗去除胃内容物，观察胃粘膜病变，溃疡面积(mss2)-3=12ab(a=溃疡最大直径，b=最小直径). 平行割取胃窦小弯及胃体前壁组织标本，取与粘膜垂直的厚为5m-6的边连续切片，HE染色，进行组织学检查.
1.3.4 G细胞密度测定 用过氧化物酶抗过氧化物酶(PAP) 法进行G细胞染色. 将1 2m-3目镜测微器于ML-4M型显微镜放大200倍条件下，依次计算每个单位长度(222m-6)内粘膜肌层到表层内含有的全部G细胞数，其均值表示该切片单位长度内的G细胞密度，同组中全部切片G细胞密度的均值为该组的G细胞密度.
, 百拇医药
1.3.5 壁细胞计数 用HE染色切片每222m-6计算一个单位长度(44m-6)内全部的有核壁细胞数，再以同组内的所有切片单位长度内有核壁细胞数的平均值为该组的壁细胞计数.
2 结果
2.1 胃液pH值、胃粘膜血流量、G细胞密度和壁细胞数的测定结果 1.
表1 大鼠溃疡组和溃疡愈合组胃粘膜血流量、G细胞和壁细胞数 (x-±s)
| 组别 | n | 胃液pH值 | 胃粘膜血流量(mL·kg-1/min) | G细胞密度(个/220m-6) | 壁细胞数(个/44m-6) |
| 溃疡组 | 12 | 5.4±1.6b | 46.7±8.6b | 9.4±1.3b | 30.6±1.8b |
| 溃疡愈合组 | 9 | 2.6±0.9d | 62.2±9.1d | 7.7±1.3d | 22.5±1.9d |
| 对照组 | 13 | 1.6±0.2 | 60.0±7.6 | 7.3±1.1 | 19.1±1.1 |
, 百拇医药
bP<0.01与对照组比较；dP<0.01与溃疡组比较.
2.2 大体形态及组织学检查 溃疡组在胃窦小弯侧均可见到单发的溃疡(平均为8.84(m2)-3±3.08(m2)-3，粘膜水肿增厚. 镜下可见溃疡表层有炎性渗出物、坏死组织，深面为肉芽及疤痕，其中小动脉壁增厚，内膜呈增生性炎症，可见神经节细胞变性. 溃疡愈合组粘膜略有增厚. 1例标本仍可见到7.5(m2)-3的溃疡未愈合，镜下显示粘膜肌层紊乱，较多的新生腺管及炎细胞浸润.
3 讨论
胃粘膜屏障损害在胃溃疡发病中的作用已有较多的临床和实验研究. 近20a来胃粘膜血流量与胃溃疡发生的关系逐渐被人们所认识. 胃粘膜血流在维持正常粘膜功能、调节胃酸分泌中起重要作用，更是粘膜防御功能的主要因素[2]. 本实验溃疡组胃粘膜血流量明显减少，提示粘膜缺血对溃疡的形成有一定作用. 粘膜缺血可防碍胃粘膜组织的氧合功能和能量代谢，削弱了抗损伤能力[3]，使胃粘膜缓冲和移除反流进组织中的H+的能力降低，导致H+的聚集，粘膜酸化形成溃疡. 粘膜血流量的增加是组织修复的需要. 本实验溃疡愈合组粘膜血流量比溃疡组增加了25%. 1例溃疡未愈合，粘膜血流量只增加4%，与Kamade[4]的报告相近. Wright[5]认为在溃疡愈合期胃粘膜血流的增加可能是前列腺素E在溃疡边缘区域合成增多. 本实验结果提示粘膜血流量增加即预示溃疡趋向愈合期，而在溃疡愈合期血流量不增加则预示溃疡难以治愈. 溃疡组胃窦粘膜G细胞密度明显增加，壁细胞数增多，预示着酸分泌量增加，其机制可能是由于碱性十二指肠内容物反流使胃内pH值增高，刺激胃窦G细胞增生，同时碱反流抑制胃窦D细胞分泌生长抑素，致使促胃液素释放增多，促使溃疡形成[6]. 由本研究提示泌酸量增加和胃粘膜血流量减少可能是溃疡形成的重要因素. 本实验采用的通过十二指肠内容物胃内反流所产生的胃溃疡模型与人类的胃溃疡相似，符号消化性溃疡的常见部位和病理形态特征，更符合于溃疡形成的自然发展过程，是一种较适宜的动物模型.
, http://www.100md.com
4 参考文献1 Du plessis DJ.pathogenesis of gastric ulcerationa Lancet,1965；1：974-978
2 Cheung LY. Gastric mucosal blood flow: its measurement and importance inmucosal defense mechanisms.
J SurgRes,1984;36:282-286
3 Menguy R. Role of gastric mucosal energy metabolism in the etiology of stress ulceration.
World J Surg, 1981；5：175-179
, http://www.100md.com
4 Kamade T, Kawano S, Sato N, et al. Gastric mucosal blood distributionand its changes in the healing process of
gastric ulcer. Gastroenterology,1983;84:1541-1548
5 Wright JP, Young GO, Klaff LJ, et al. Gastric mucosal prostglandin Elevels in patient with gastric ulcer disease and carcinoma.
Gastroenterology,1982;82:263-272
6 Thomas WEG. Duodeno gastric reflux A common factor in patho enesis of gastric and duodenal ulcer.
Lancet,1980;11:1166-1167, 百拇医药