直肠病变脱落细胞超微结构的研究
山东医科大学附属医院 山东省济南市 250012
蔡景龙，男，1964-08-26生，山东省苍山县人，汉族.1986年山东医科大学医学本科毕业，硕士学位.外科主治医师，发表论文16篇，获省厅级成果2项，本刊特邀通讯员.
项目负责人:济南市文化西路107号
Tel:0531-6921941-929
收稿日期:1994-08-06
Study on the ultrastructure of rectal exfoliative cells
Jing-Long Cai, Dian-Chang Zhao and Bo-Qing Li
, http://www.100md.com
Department of General Surgery, Affiliated Hospital of ShangdongMedical University, Jinan 250012 China
AbstractAIMS The characteristics of etiology and pathology of rectal diseases were revealed by study on the ultrastructure of rectal exfoliative cells.
METHODS Rectal exfoliative cells were collected by digitalexamination sticking small pieces of corundum cloth in 18 patients with rectal diseases. Lively cells were extracted and examined by electron microscope.
, 百拇医药
RESULTS All the rectal exfoliative cells were divided intobright and dark cells. Malignant melanoma granules distributed in groups in bright cells, but scatter in pericellular region in dark cells. The development of villous adenoma and its malignant change associated with bacterial infection.
CONCLUSIONS Electromicroscopy can get more detailed biology of rectal diseases than light microscopy.
, 百拇医药 Keywords rectum;disease;exfoliative cell;ultrastructure
Cai JL, Zhao DC,Li BQ.Study on the ultrastructure of rectal exfoliativecells.Xin Xiaohuabingxue Zazhi,1995；3(3)：142-144
摘要目的 通过直肠病变脱落细胞超微结构的研究，揭示直肠疾病的病因病理特征.
方法 用砂片指套作指诊，采集18例直肠病变脱落活细胞，按序制作超薄切片染色，电镜下观察拍照.
结果 直肠炎症、腺癌、绒毛状腺瘤及其癌变、恶性黑色素瘤细胞的超微结构各有其特征，在电镜下均可分为亮细胞和暗细胞2种；恶性黑色素瘤细胞内黑色素颗粒在亮细胞多成团分布，在暗细胞多散在分布于细胞边缘；绒毛状腺瘤及其癌变的发生可能和细菌感染有关.
, 百拇医药
结论 直肠病变脱落细胞超微结构的研究，能更加深入地了解直肠疾病的生物学特征.
关键词 直肠疾病;脱落细胞;超微结构
蔡景龙,赵殿昌,李伯勤.直肠病变脱落细胞超微结构的研究.新消化病学杂志，1995；3(3)：142-144
1991年4月-1994年6月，我们对18例直肠病变脱落细胞进行了超微结构的研究，发现了一些新现象，报告如下.
1 对象和方法
1.1 对象 男8例，女10例；年龄21-68岁，平均48.8岁；主诉为大便带血，肛门下坠感，腹痛及腹泻等；病程1个月-10年，平均19.6个月.经活检或术后病理证实为炎症6例，高分化腺癌5例，低分化腺癌2例，绒毛状腺瘤2例，绒毛状腺瘤癌变2例，恶性黑色素瘤1例.
, 百拇医药
1.2 方法 将钢玉砂布100井剪成1.2cm×0.8cm大小的椭园形砂片，用502速凝胶粘于普通橡皮手套中指末节指腹处，做成砂片指套[1].检查前1d晚上潘泻叶10-30g代茶饮.检查时先用食指作普通指诊并摸除粘膜或病变表面的粘液，后用中指带砂片指诊，指诊时以中指指背靠近肛管壁缓慢插入肛门进入直肠，在病变部位稍用力重点摩擦1-2次，之后以指背靠近肛管壁退出中指.将采集的细胞用生理盐水冲入青霉素小瓶中，对同一患者分别采集细胞2-3次.1h内用无Ca+2，Mg+2 Hanks液冲洗2次，离心后弃上清液，沉淀悬于10%牛血清RPMI 1640培养液中，层加于双层淋巴细胞分离液之间，以2000r/min离心15-20min后吸出中间富含活细胞层，再用Hanks液洗2次，将活细胞离心沉淀于尖底小管中，加入2.5%的戊二醛液固定，1个月内按序进行清洗、1%锇酸后固定、脱水、环氧丙烷浸透、EPON812包埋、超薄切片及染色，在JEOL1200型TEM下观察拍照.
, 百拇医药
图1 直肠高分化腺癌亮细胞，核异型，核仁大，胞膜众多胞突，细胞器丰富(×4000)
图2 直肠中分化腺癌细胞间平滑连接，可见髓样体(×5000)
图3 直肠低分化腺癌长梭形细胞，核大，胞浆少，细胞间连结疏松(×6000)
图4 绒毛状腺瘤细胞内外有较多细菌(×6000)
图5 恶性黑色素瘤亮细胞，核异型，黑色素颗粒成团分布(×10800)
图6 恶性黑色素瘤暗细胞，核异型显著，黑色素颗粒散在分布于细胞边缘(×7500)
, 百拇医药
2 结果
2.1 炎性上皮细胞6例 特点为：①细胞可分为亮细胞及暗细胞2种，其比例约1:1.暗细胞表面比亮细胞有较多的微绒毛，微绒毛长短多少不一致，其表面有较长的细胞衣丝.胞质中均有较丰富的线粒体、高尔基体、微丝、糖原颗粒、内质网及电子密度高低不一的泡状结构.在轻度炎症时细胞器基本正常，在重度炎症时细胞器变性明显，如线粒体肿胀、部分嵴缺失、部分髓样变.④核电子密度高.⑤相邻细胞间极性一致，可见连接复合体，桥粒及镶嵌连接，连接紧密.
2.2 癌性上皮细胞7例 高分化腺癌5例，特征是：细胞分亮、暗细胞2种，以暗细胞为多，其电子密度接近于RBC.细胞表面有密集的微绒毛及细胞伪足，微绒毛中央有清晰的纵行微丝插入胞质中.胞质内有丰富的线粒体、内质网、高尔基体、微丝及分泌囊泡，细胞器有变性畸形. 核畸形明显，核仁大，核孔增宽(图1).细胞间以平滑肌连接为主，散在颗粒连接细胞间隙中可见到髓样体(图2).低分化腺癌2例，特点是细胞长梭形，表面有胞突，微绒毛少，胞浆少，胞核大，核电子密度高，细胞间连接更为疏松，细胞亦分亮、暗2型(图3).
, 百拇医药
2.3 绒毛状腺瘤及癌变上皮细胞各2例 共同特点是：①细胞均分为亮、暗2种.细胞内外均分布着较多细菌，且位于细胞膜表面的细菌似泡饮状嵌入细胞(图4).淋巴细胞含量明显增多，其与上皮细胞间有胞突紧密相连.不同点是：核的形态不同，绒毛状腺瘤核小，且多位于细胞一侧，而癌变上皮核大，异型性明显.细胞表面结构不同，绒毛状腺瘤细胞表面有较多微绒毛，胞膜平滑，而癌变细胞微绒毛较少，胞膜向外延伸出许多伪足.细胞器含量癌变细胞比绒毛状腺瘤细胞丰富.
2.4 恶性黑色素瘤上皮细胞1例 特点是：①细胞亦分亮、暗2型，以暗细胞为多，其细胞内细胞器发达，黑色素颗粒多.细胞表面可见伪足及稀少弯曲的微绒毛.胞质内有许多黑色素颗粒，呈细小叠层岩样结构，电子密度高，其在亮细胞多聚集成团，后者又分为亮团和暗团2种(图5)，在暗细胞多散在分布于细胞边缘(图6).可见双核结构，核异型性显著；⑤细胞多散在，少见细胞间连接.
3 讨论
, http://www.100md.com
关于大肠脱落细胞学超微结构的研究文献罕见[2]，国内未见报告.从本组资料看：①直肠炎性上皮、腺癌性上皮、绒毛状腺瘤及其癌变上皮、恶性黑色素瘤上皮脱落细胞在电镜下均可分为亮细胞及暗细胞2种，与组织学超微结构的观察一致[3，4].电镜观察比光镜更深入，恶性黑色素瘤脱落细胞光镜下仅见到胞浆内许多淡黄色的颗粒，而在电镜下可以详细观察到这些颗粒的结构及分布特征，能为光镜下定性困难的病例提供更细致的形态学资料.直肠恶性黑色素瘤细胞内黑色素颗粒的分布具有特征性，与其他部位的恶性黑色素瘤特点不同，可鉴别黑色素肉瘤的起源.关于黑色素颗粒如此分布的机制与临床意义尚不清楚，有待于进一步研究.④电镜下观察发现绒毛状腺瘤及其癌变上皮脱落细胞内外均分布着众多细菌，淋巴细胞含量增多，且其与上皮细胞间有密切的联系，表明绒毛状腺瘤及其癌变的发生均可能和细菌感染有一定的关系.
4 参考文献1 蔡景龙.对直肠乙状结肠炎性病变脱落细胞的形态学观察.中国肛肠病杂志，1992；7(3)：10-12
2 Shamsuddin AM, Phelps PC, Trump BF. Human large intestinal epithelium:Light microscopy,histochemistry and ultrastructure. Hum Pathol,1982;13(9):790-803
3 陈通，张子强，石元和，等.大肠癌超微结构的观察.实用肿瘤杂志，1989；4(2)：84-87
4 彭麟，刘建伟，王鸿烈，等.人大肠粘膜上皮和大肠癌细胞超微结构的对比观察.中华肿瘤杂志，1985；7(4)：271-273, http://www.100md.com
蔡景龙，男，1964-08-26生，山东省苍山县人，汉族.1986年山东医科大学医学本科毕业，硕士学位.外科主治医师，发表论文16篇，获省厅级成果2项，本刊特邀通讯员.
项目负责人:济南市文化西路107号
Tel:0531-6921941-929
收稿日期:1994-08-06
Study on the ultrastructure of rectal exfoliative cells
Jing-Long Cai, Dian-Chang Zhao and Bo-Qing Li
, http://www.100md.com
Department of General Surgery, Affiliated Hospital of ShangdongMedical University, Jinan 250012 China
AbstractAIMS The characteristics of etiology and pathology of rectal diseases were revealed by study on the ultrastructure of rectal exfoliative cells.
METHODS Rectal exfoliative cells were collected by digitalexamination sticking small pieces of corundum cloth in 18 patients with rectal diseases. Lively cells were extracted and examined by electron microscope.
, 百拇医药
RESULTS All the rectal exfoliative cells were divided intobright and dark cells. Malignant melanoma granules distributed in groups in bright cells, but scatter in pericellular region in dark cells. The development of villous adenoma and its malignant change associated with bacterial infection.
CONCLUSIONS Electromicroscopy can get more detailed biology of rectal diseases than light microscopy.
, 百拇医药 Keywords rectum;disease;exfoliative cell;ultrastructure
Cai JL, Zhao DC,Li BQ.Study on the ultrastructure of rectal exfoliativecells.Xin Xiaohuabingxue Zazhi,1995；3(3)：142-144
摘要目的 通过直肠病变脱落细胞超微结构的研究，揭示直肠疾病的病因病理特征.
方法 用砂片指套作指诊，采集18例直肠病变脱落活细胞，按序制作超薄切片染色，电镜下观察拍照.
结果 直肠炎症、腺癌、绒毛状腺瘤及其癌变、恶性黑色素瘤细胞的超微结构各有其特征，在电镜下均可分为亮细胞和暗细胞2种；恶性黑色素瘤细胞内黑色素颗粒在亮细胞多成团分布，在暗细胞多散在分布于细胞边缘；绒毛状腺瘤及其癌变的发生可能和细菌感染有关.
, 百拇医药
结论 直肠病变脱落细胞超微结构的研究，能更加深入地了解直肠疾病的生物学特征.
关键词 直肠疾病;脱落细胞;超微结构
蔡景龙,赵殿昌,李伯勤.直肠病变脱落细胞超微结构的研究.新消化病学杂志，1995；3(3)：142-144
1991年4月-1994年6月，我们对18例直肠病变脱落细胞进行了超微结构的研究，发现了一些新现象，报告如下.
1 对象和方法
1.1 对象 男8例，女10例；年龄21-68岁，平均48.8岁；主诉为大便带血，肛门下坠感，腹痛及腹泻等；病程1个月-10年，平均19.6个月.经活检或术后病理证实为炎症6例，高分化腺癌5例，低分化腺癌2例，绒毛状腺瘤2例，绒毛状腺瘤癌变2例，恶性黑色素瘤1例.
, 百拇医药
1.2 方法 将钢玉砂布100井剪成1.2cm×0.8cm大小的椭园形砂片，用502速凝胶粘于普通橡皮手套中指末节指腹处，做成砂片指套[1].检查前1d晚上潘泻叶10-30g代茶饮.检查时先用食指作普通指诊并摸除粘膜或病变表面的粘液，后用中指带砂片指诊，指诊时以中指指背靠近肛管壁缓慢插入肛门进入直肠，在病变部位稍用力重点摩擦1-2次，之后以指背靠近肛管壁退出中指.将采集的细胞用生理盐水冲入青霉素小瓶中，对同一患者分别采集细胞2-3次.1h内用无Ca+2，Mg+2 Hanks液冲洗2次，离心后弃上清液，沉淀悬于10%牛血清RPMI 1640培养液中，层加于双层淋巴细胞分离液之间，以2000r/min离心15-20min后吸出中间富含活细胞层，再用Hanks液洗2次，将活细胞离心沉淀于尖底小管中，加入2.5%的戊二醛液固定，1个月内按序进行清洗、1%锇酸后固定、脱水、环氧丙烷浸透、EPON812包埋、超薄切片及染色，在JEOL1200型TEM下观察拍照.
, 百拇医药
图1 直肠高分化腺癌亮细胞，核异型，核仁大，胞膜众多胞突，细胞器丰富(×4000)
图2 直肠中分化腺癌细胞间平滑连接，可见髓样体(×5000)
图3 直肠低分化腺癌长梭形细胞，核大，胞浆少，细胞间连结疏松(×6000)
图4 绒毛状腺瘤细胞内外有较多细菌(×6000)
图5 恶性黑色素瘤亮细胞，核异型，黑色素颗粒成团分布(×10800)
图6 恶性黑色素瘤暗细胞，核异型显著，黑色素颗粒散在分布于细胞边缘(×7500)
, 百拇医药
2 结果
2.1 炎性上皮细胞6例 特点为：①细胞可分为亮细胞及暗细胞2种，其比例约1:1.暗细胞表面比亮细胞有较多的微绒毛，微绒毛长短多少不一致，其表面有较长的细胞衣丝.胞质中均有较丰富的线粒体、高尔基体、微丝、糖原颗粒、内质网及电子密度高低不一的泡状结构.在轻度炎症时细胞器基本正常，在重度炎症时细胞器变性明显，如线粒体肿胀、部分嵴缺失、部分髓样变.④核电子密度高.⑤相邻细胞间极性一致，可见连接复合体，桥粒及镶嵌连接，连接紧密.
2.2 癌性上皮细胞7例 高分化腺癌5例，特征是：细胞分亮、暗细胞2种，以暗细胞为多，其电子密度接近于RBC.细胞表面有密集的微绒毛及细胞伪足，微绒毛中央有清晰的纵行微丝插入胞质中.胞质内有丰富的线粒体、内质网、高尔基体、微丝及分泌囊泡，细胞器有变性畸形. 核畸形明显，核仁大，核孔增宽(图1).细胞间以平滑肌连接为主，散在颗粒连接细胞间隙中可见到髓样体(图2).低分化腺癌2例，特点是细胞长梭形，表面有胞突，微绒毛少，胞浆少，胞核大，核电子密度高，细胞间连接更为疏松，细胞亦分亮、暗2型(图3).
, 百拇医药
2.3 绒毛状腺瘤及癌变上皮细胞各2例 共同特点是：①细胞均分为亮、暗2种.细胞内外均分布着较多细菌，且位于细胞膜表面的细菌似泡饮状嵌入细胞(图4).淋巴细胞含量明显增多，其与上皮细胞间有胞突紧密相连.不同点是：核的形态不同，绒毛状腺瘤核小，且多位于细胞一侧，而癌变上皮核大，异型性明显.细胞表面结构不同，绒毛状腺瘤细胞表面有较多微绒毛，胞膜平滑，而癌变细胞微绒毛较少，胞膜向外延伸出许多伪足.细胞器含量癌变细胞比绒毛状腺瘤细胞丰富.
2.4 恶性黑色素瘤上皮细胞1例 特点是：①细胞亦分亮、暗2型，以暗细胞为多，其细胞内细胞器发达，黑色素颗粒多.细胞表面可见伪足及稀少弯曲的微绒毛.胞质内有许多黑色素颗粒，呈细小叠层岩样结构，电子密度高，其在亮细胞多聚集成团，后者又分为亮团和暗团2种(图5)，在暗细胞多散在分布于细胞边缘(图6).可见双核结构，核异型性显著；⑤细胞多散在，少见细胞间连接.
3 讨论
, http://www.100md.com
关于大肠脱落细胞学超微结构的研究文献罕见[2]，国内未见报告.从本组资料看：①直肠炎性上皮、腺癌性上皮、绒毛状腺瘤及其癌变上皮、恶性黑色素瘤上皮脱落细胞在电镜下均可分为亮细胞及暗细胞2种，与组织学超微结构的观察一致[3，4].电镜观察比光镜更深入，恶性黑色素瘤脱落细胞光镜下仅见到胞浆内许多淡黄色的颗粒，而在电镜下可以详细观察到这些颗粒的结构及分布特征，能为光镜下定性困难的病例提供更细致的形态学资料.直肠恶性黑色素瘤细胞内黑色素颗粒的分布具有特征性，与其他部位的恶性黑色素瘤特点不同，可鉴别黑色素肉瘤的起源.关于黑色素颗粒如此分布的机制与临床意义尚不清楚，有待于进一步研究.④电镜下观察发现绒毛状腺瘤及其癌变上皮脱落细胞内外均分布着众多细菌，淋巴细胞含量增多，且其与上皮细胞间有密切的联系，表明绒毛状腺瘤及其癌变的发生均可能和细菌感染有一定的关系.
4 参考文献1 蔡景龙.对直肠乙状结肠炎性病变脱落细胞的形态学观察.中国肛肠病杂志，1992；7(3)：10-12
2 Shamsuddin AM, Phelps PC, Trump BF. Human large intestinal epithelium:Light microscopy,histochemistry and ultrastructure. Hum Pathol,1982;13(9):790-803
3 陈通，张子强，石元和，等.大肠癌超微结构的观察.实用肿瘤杂志，1989；4(2)：84-87
4 彭麟，刘建伟，王鸿烈，等.人大肠粘膜上皮和大肠癌细胞超微结构的对比观察.中华肿瘤杂志，1985；7(4)：271-273, http://www.100md.com