强力宁对慢性肝病患者ADA活力的影响
上海医科大学中山医院内科 上海市 200032
李昌平，男，1965-01-27生.四川重庆市人，汉族.1994年上海医科大学消化内科硕士，泸州医学院附院消化内科副主任，主治医师.发表论文10篇
项目负责人 李昌平，200032 上海市,上海医科大学中山医院内科
Tel: 0830-2392712-6014收搞日期 1995-05-02 接收日期 1995-05-19
Effects of potenlin on PBMC and plasma ADA activities in patients with chronic liver diseases
, 百拇医药
Chang-Ping Li, Hou-Yu Liu, Kang Zhou and De-Chang Hu
Department of Medicine, Zhongshan Hospital Shanghai Medicial Univerisity, Shanghai 200032 China
Abstract
AIMS To study the effect of potenlin (main component is glycyrrhize) of adenosine deaminase(ADA) activities in patients with chronic hepatitis(CH) and liver cirrhosis(LC).
, 百拇医药
METHODS ADA activities in plasma and peripherial blood mononuclear cells(PBMC) were determined with Guisti′s colorimetry.
RESULTS Plasma ADA activty in 26 patients with CH and 20 with LC(47.5±15.9 and 39.2±10.3mmol NH3/L) was significantly higher than that of normal control(27±6.7mmol NH3/L, P<0.01); whereas PBMC ADA activity in both groups(21.7±7.6 and 18.4±7.5mmol NH3/107 cells) was lower than normal control (29±5.7mmolNH3/107 cells, P<0.01). After 8 weeks of potenlin therapy in 14 patients with CH, PBMC ADA activity increased significantly and almost reached normal level.
, 百拇医药
CONCLUSIONS In patients with CH and LC, potenlin results in immunological regulation by the recovery of PBMC ADA activity.
Subject headings hepatitis B/enzymology adenosine deaminase/blood liver cirrhosis/enzymology glycyrrchizin/therapentic use drug combinations
Li CP, Liu HY, Zhou K,Hu DC.Effects of potenlin on PBMC and plasma ADA activities in patients with chronic liver diseases.
, 百拇医药
Xin Xiaohuabingxue Zazhi,1996；4(7)：390-391
摘要
目的 研究慢性肝炎(CH)及肝硬变(LC)患者强力宁对腺苷脱氨酶(ADA)的影响.
方法 用Giusti比色法检测CH 26例， LC 20例患者血浆及外周血单个核细胞(PBMC)的ADA活力.
结果 CH及LC患者血浆ADA活力(47.5±15.9及39.2±10.3 mmolNH /L)明显高于正常人(27±6.7 mmol NH 3/L， P<0.01)；PBMC ADA活力(21.7±7.6及18.4±7.5mmol NH 3/10 7cells)较正常人(29±5.7 mmol NH 3/10 7cells，P<0.01)为低. PBMC ADA活力与血浆ADA活力不相关. 强力宁治疗8周后，PBMC ADA活力明显升高(P<0.01，与正常人接近.
, 百拇医药
结论 强力宁可能通过恢复PBMC ADA活力而发挥其免疫调节作用.
主题词 肝炎，乙型/酶学;腺苷脱氨酶/血液;肝硬化/酶学;甘草甜素/治疗应用;复方合剂
李昌平，刘厚钰，周康，胡德昌.强力宁对慢性肝病患者ADA活力的影响.新消化病学杂志，1996；4(7)：390-391
腺苷脱氨酶(ADA)是催化腺苷(或脱氧腺苷)水解脱氨的酶.在外周血中，淋巴细胞及单核细胞ADA活力明显高于其它细胞，而T淋巴细胞ADA活力最高.为探索ADA在CH和LC中的作用及强力宁的影响，作者对26例CH和20例LC患者PBMC ADA及血浆ADA活力进行了检测.
1 对象和方法
, 百拇医药
1.1 对象 1993年4月-1994年3月我院住院治疗CH 26例，其中17例经肝穿剌病理证实.男19例，女7例，年龄21-40(33±18.2)岁；全部为乙肝患者.LC 20例，其中男12例，女6例；平均年龄41.2±14.7(24-65)岁.20例LC中，乙型肝炎4例，乙肝合并丙肝2例，单纯丙肝4例.无饮酒史，诊断主要靠临床、门脉高压体征，食道静脉曲张X线征及肝功能检查等.所有LC患者均无感染、出血等并发症.正常对照13例，主要为体检健康的本实验室工作人员及研究生.男7人，女6人，年龄21-55(39±9)岁.将26例CH随机分为强力宁治疗组和对照组.对照组给予一般保肝药物如益肝灵、VitC等治疗；治疗组在保肝药物基础上给予强力宁80ml/d(浙江海宁制药厂产品)治疗，肝功好转后减量，疗程共8周.强力宁组和对照组均在治疗8周后抽血测定血浆及PBMC ADA活力.未接受任何免疫抑制剂治疗.
1.2 方法 新鲜静脉血5ml置于硅化抗凝试管，在2000r/min离心5min，吸取上层血浆0.5ml于-30℃冰箱保存以备测定ADA.剩余全血用等量生理盐水稀释后，置于盛有3mlFico11-Hypaque试管的液面上，在1200r/min离心20min，将PBMC层吸入尖底刻度离心管，用白细胞计数法计数PBMC.经台盼兰染色判断细胞存活率皆大于97%，将PBMC悬液经3次快速冰融及超声使细胞完全裂解(显微镜证实)，所得细胞匀浆在20000r/min离心10min，吸取上清液置于-30℃冰箱保存，待测PBMC ADA.
, 百拇医药
ADA的测定方法 采用Giusti比色计.在光波620nm比色，根据以生成的氨量来推算酶的活力.血浆ADA活力以37℃(mmol NH3/L)表示；PBMC ADA活力以37℃(mmol NH3/107 cells)表示.本法在室温下至少在30min内结果稳定，血浆ADA灵敏度为4-6/L，PBMC ADA灵敏度为2-4/107 cells且不受胆红素、肌苷等代谢产物的影响.
统计学处理 采用配对与非配对t检验，以P<0.05判断差异有统计意义.
2 结果
2.1 ADA活力 与正常对照相比，LC及CH血浆ADA活力明显升高，而PBMC ADA活力降低(P<0.01，表1).
, http://www.100md.com
表1 慢性肝病患者ADA活力 (x-±s)
bP<0.01，与正常对照相比.
, 百拇医药
2.2 强力宁对ADA活力的影响 将26例CH患者分为2组，发现经治疗8周后，强力宁组与对照组血浆ADA活力明显下降(P<0.01)， 接近正常人(P>0.05)；治疗组与对照组血浆ADA活力差别无显著意义(P>0.05).然而PBMC ADA活力经强力宁治疗8周后明显升高(P<0.01)，与正常对照相近(P>0.05)，而对照组PBMC ADA活力在治疗期间无明显变化(P>0.05)；治疗组与对照组间PBMC ADA活力差别有显著意义(P<0.05)，表2.
表2 强力宁对CH PBMC ADA活力的影响 (x-±s)
, http://www.100md.com
bP<0.01，与治疗前比较；aP<0.05，与对照组比较.
3 讨论
我们测定了CH和LC患者血浆ADA活力，发现其高于正常人1.4-1.7倍，其增高机制可能是由于肝细胞病变时细胞浆内的酶释放入血所致.为了解LC和CAH患者PBMC ADA活力，Noradiello等[1]检测了14例CH和LC患者PBMC ADA活力，结果显著低于正常，与本文结果一致.CH及LC患者的PBMC ADA活力下降的原因尚不清楚.Kobayoshi等[2]测定了CH患者血浆ADA同功酶，结果CAH时ADA2活力和ADA2/ADA比值明显升高，认为血浆ADA升高不是由于外周血和肝组织淋巴细胞活化的结果.推测CH和LC患者PBMC ADA活力降低可能与某个单个核细胞亚群免疫功能的下降有关，也可能是因为某一含酶量高的单个核细胞亚群的数量减少而使平均PBMC ADA的活力下降所致[3].以上资料表明PBMC ADA活力测定有助于判断CAH及LC患者的细胞免疫状态.关于血浆ADA与PBMC ADA的关系研究较少.我们在治疗CH过程中发现强力宁组和对照组血浆ADA活力均下降；强力宁组PBMC ADA活力明显升高，而对照组PBMC ADA活力则无变化，提示血浆ADA活力变化与PBMC-ADA无关，进一定证实了上述观点.
, 百拇医药
强力宁的主要有效成份是甘草甜素(GL)，其主要药理作用是增强单核巨噬细胞、NK细胞活性，促进IL-1释放，诱生r-干扰素等多种免疫调节作用[4].本研究结果显示经治疗8周后，强力宁组PBMC ADA活力在治疗期间有明显变化，提示强力宁除具有上述作用外，可能尚通过使CH PBMC ADA活力恢复正常而发挥免疫调节作用.
4 参考文献
1 Nardiello S, Russo M, Pizzella T, et al. . Different levels of lymphocyte adenosine deaminase in active and inactive forms of chronic
liver disease. J Clin Lab Immunol, 1993;11(2):177-180
, http://www.100md.com
2 Kobayoshi F, Ikeda T, Marumu F, et al. Adenosine deaminase isoenzymes in liver disease. Am J Gastroenterol, 1993;88(2):266-2713 Schuurman HJ, Van Laarhaven JPRMI, Broekhuizen R, et al. Purine metablism in human thymocyte subset: relevance for
lymphocyte differation. Adv Exp Med Biol, 1984;165(1):99-106
4 吴伟根，章太佳.强力宁的临床应用.新医学，1990;21(12)：645-647, 百拇医药(李昌平 刘厚钰 周康 胡德昌)
李昌平，男，1965-01-27生.四川重庆市人，汉族.1994年上海医科大学消化内科硕士，泸州医学院附院消化内科副主任，主治医师.发表论文10篇
项目负责人 李昌平，200032 上海市,上海医科大学中山医院内科
Tel: 0830-2392712-6014收搞日期 1995-05-02 接收日期 1995-05-19
Effects of potenlin on PBMC and plasma ADA activities in patients with chronic liver diseases
, 百拇医药
Chang-Ping Li, Hou-Yu Liu, Kang Zhou and De-Chang Hu
Department of Medicine, Zhongshan Hospital Shanghai Medicial Univerisity, Shanghai 200032 China
Abstract
AIMS To study the effect of potenlin (main component is glycyrrhize) of adenosine deaminase(ADA) activities in patients with chronic hepatitis(CH) and liver cirrhosis(LC).
, 百拇医药
METHODS ADA activities in plasma and peripherial blood mononuclear cells(PBMC) were determined with Guisti′s colorimetry.
RESULTS Plasma ADA activty in 26 patients with CH and 20 with LC(47.5±15.9 and 39.2±10.3mmol NH3/L) was significantly higher than that of normal control(27±6.7mmol NH3/L, P<0.01); whereas PBMC ADA activity in both groups(21.7±7.6 and 18.4±7.5mmol NH3/107 cells) was lower than normal control (29±5.7mmolNH3/107 cells, P<0.01). After 8 weeks of potenlin therapy in 14 patients with CH, PBMC ADA activity increased significantly and almost reached normal level.
, 百拇医药
CONCLUSIONS In patients with CH and LC, potenlin results in immunological regulation by the recovery of PBMC ADA activity.
Subject headings hepatitis B/enzymology adenosine deaminase/blood liver cirrhosis/enzymology glycyrrchizin/therapentic use drug combinations
Li CP, Liu HY, Zhou K,Hu DC.Effects of potenlin on PBMC and plasma ADA activities in patients with chronic liver diseases.
, 百拇医药
Xin Xiaohuabingxue Zazhi,1996；4(7)：390-391
摘要
目的 研究慢性肝炎(CH)及肝硬变(LC)患者强力宁对腺苷脱氨酶(ADA)的影响.
方法 用Giusti比色法检测CH 26例， LC 20例患者血浆及外周血单个核细胞(PBMC)的ADA活力.
结果 CH及LC患者血浆ADA活力(47.5±15.9及39.2±10.3 mmolNH /L)明显高于正常人(27±6.7 mmol NH 3/L， P<0.01)；PBMC ADA活力(21.7±7.6及18.4±7.5mmol NH 3/10 7cells)较正常人(29±5.7 mmol NH 3/10 7cells，P<0.01)为低. PBMC ADA活力与血浆ADA活力不相关. 强力宁治疗8周后，PBMC ADA活力明显升高(P<0.01，与正常人接近.
, 百拇医药
结论 强力宁可能通过恢复PBMC ADA活力而发挥其免疫调节作用.
主题词 肝炎，乙型/酶学;腺苷脱氨酶/血液;肝硬化/酶学;甘草甜素/治疗应用;复方合剂
李昌平，刘厚钰，周康，胡德昌.强力宁对慢性肝病患者ADA活力的影响.新消化病学杂志，1996；4(7)：390-391
腺苷脱氨酶(ADA)是催化腺苷(或脱氧腺苷)水解脱氨的酶.在外周血中，淋巴细胞及单核细胞ADA活力明显高于其它细胞，而T淋巴细胞ADA活力最高.为探索ADA在CH和LC中的作用及强力宁的影响，作者对26例CH和20例LC患者PBMC ADA及血浆ADA活力进行了检测.
1 对象和方法
, 百拇医药
1.1 对象 1993年4月-1994年3月我院住院治疗CH 26例，其中17例经肝穿剌病理证实.男19例，女7例，年龄21-40(33±18.2)岁；全部为乙肝患者.LC 20例，其中男12例，女6例；平均年龄41.2±14.7(24-65)岁.20例LC中，乙型肝炎4例，乙肝合并丙肝2例，单纯丙肝4例.无饮酒史，诊断主要靠临床、门脉高压体征，食道静脉曲张X线征及肝功能检查等.所有LC患者均无感染、出血等并发症.正常对照13例，主要为体检健康的本实验室工作人员及研究生.男7人，女6人，年龄21-55(39±9)岁.将26例CH随机分为强力宁治疗组和对照组.对照组给予一般保肝药物如益肝灵、VitC等治疗；治疗组在保肝药物基础上给予强力宁80ml/d(浙江海宁制药厂产品)治疗，肝功好转后减量，疗程共8周.强力宁组和对照组均在治疗8周后抽血测定血浆及PBMC ADA活力.未接受任何免疫抑制剂治疗.
1.2 方法 新鲜静脉血5ml置于硅化抗凝试管，在2000r/min离心5min，吸取上层血浆0.5ml于-30℃冰箱保存以备测定ADA.剩余全血用等量生理盐水稀释后，置于盛有3mlFico11-Hypaque试管的液面上，在1200r/min离心20min，将PBMC层吸入尖底刻度离心管，用白细胞计数法计数PBMC.经台盼兰染色判断细胞存活率皆大于97%，将PBMC悬液经3次快速冰融及超声使细胞完全裂解(显微镜证实)，所得细胞匀浆在20000r/min离心10min，吸取上清液置于-30℃冰箱保存，待测PBMC ADA.
, 百拇医药
ADA的测定方法 采用Giusti比色计.在光波620nm比色，根据以生成的氨量来推算酶的活力.血浆ADA活力以37℃(mmol NH3/L)表示；PBMC ADA活力以37℃(mmol NH3/107 cells)表示.本法在室温下至少在30min内结果稳定，血浆ADA灵敏度为4-6/L，PBMC ADA灵敏度为2-4/107 cells且不受胆红素、肌苷等代谢产物的影响.
统计学处理 采用配对与非配对t检验，以P<0.05判断差异有统计意义.
2 结果
2.1 ADA活力 与正常对照相比，LC及CH血浆ADA活力明显升高，而PBMC ADA活力降低(P<0.01，表1).
, http://www.100md.com
表1 慢性肝病患者ADA活力 (x-±s)
| 组别 | n | 血浆ADA活力(mmol NH3/L) | PBMC ADA活力(mmol NH3/107 cells) |
| CH | 26 | 47.5±15.9b | 21.7±7.6b |
| LC | 20 | 39.2±10.3b | 18.4±7.5b |
| 正常 | 13 | 27.0±6.7 | 29.0±5.7 |
bP<0.01，与正常对照相比.
, 百拇医药
2.2 强力宁对ADA活力的影响 将26例CH患者分为2组，发现经治疗8周后，强力宁组与对照组血浆ADA活力明显下降(P<0.01)， 接近正常人(P>0.05)；治疗组与对照组血浆ADA活力差别无显著意义(P>0.05).然而PBMC ADA活力经强力宁治疗8周后明显升高(P<0.01)，与正常对照相近(P>0.05)，而对照组PBMC ADA活力在治疗期间无明显变化(P>0.05)；治疗组与对照组间PBMC ADA活力差别有显著意义(P<0.05)，表2.
表2 强力宁对CH PBMC ADA活力的影响 (x-±s)
| 组别 | n | 血浆ADA活力(mmol NH3/L) | PBMC ADA活力(mmol NH3/107 cells) | ||
| 治疗前 | 治疗8周后 | 治疗前 | 治疗8周后 | ||
| 强力宁 | 16 | 48.1±13.2 | 28.2±5.9b | 21.0±7.2 | 31.2±7.8ba |
| 对 照 | 10 | 46.9±14.3 | 30.1±10.2b | 22.3±5.6 | 24.0±8.3 |
| 正 常 | 13 | 27.0±6.7 | -- | 29.0±5.7 | -- |
, http://www.100md.com
bP<0.01，与治疗前比较；aP<0.05，与对照组比较.
3 讨论
我们测定了CH和LC患者血浆ADA活力，发现其高于正常人1.4-1.7倍，其增高机制可能是由于肝细胞病变时细胞浆内的酶释放入血所致.为了解LC和CAH患者PBMC ADA活力，Noradiello等[1]检测了14例CH和LC患者PBMC ADA活力，结果显著低于正常，与本文结果一致.CH及LC患者的PBMC ADA活力下降的原因尚不清楚.Kobayoshi等[2]测定了CH患者血浆ADA同功酶，结果CAH时ADA2活力和ADA2/ADA比值明显升高，认为血浆ADA升高不是由于外周血和肝组织淋巴细胞活化的结果.推测CH和LC患者PBMC ADA活力降低可能与某个单个核细胞亚群免疫功能的下降有关，也可能是因为某一含酶量高的单个核细胞亚群的数量减少而使平均PBMC ADA的活力下降所致[3].以上资料表明PBMC ADA活力测定有助于判断CAH及LC患者的细胞免疫状态.关于血浆ADA与PBMC ADA的关系研究较少.我们在治疗CH过程中发现强力宁组和对照组血浆ADA活力均下降；强力宁组PBMC ADA活力明显升高，而对照组PBMC ADA活力则无变化，提示血浆ADA活力变化与PBMC-ADA无关，进一定证实了上述观点.
, 百拇医药
强力宁的主要有效成份是甘草甜素(GL)，其主要药理作用是增强单核巨噬细胞、NK细胞活性，促进IL-1释放，诱生r-干扰素等多种免疫调节作用[4].本研究结果显示经治疗8周后，强力宁组PBMC ADA活力在治疗期间有明显变化，提示强力宁除具有上述作用外，可能尚通过使CH PBMC ADA活力恢复正常而发挥免疫调节作用.
4 参考文献
1 Nardiello S, Russo M, Pizzella T, et al. . Different levels of lymphocyte adenosine deaminase in active and inactive forms of chronic
liver disease. J Clin Lab Immunol, 1993;11(2):177-180
, http://www.100md.com
2 Kobayoshi F, Ikeda T, Marumu F, et al. Adenosine deaminase isoenzymes in liver disease. Am J Gastroenterol, 1993;88(2):266-2713 Schuurman HJ, Van Laarhaven JPRMI, Broekhuizen R, et al. Purine metablism in human thymocyte subset: relevance for
lymphocyte differation. Adv Exp Med Biol, 1984;165(1):99-106
4 吴伟根，章太佳.强力宁的临床应用.新医学，1990;21(12)：645-647, 百拇医药(李昌平 刘厚钰 周康 胡德昌)