血清结合胆汁酸诊断脂肪肝
上海第二医科大学附属新 华医院消化科 上海市 200092
潘志红，女，1952-03-07生，浙江省宁波市人，汉族.1982年上海第二医科大学医学系本科毕业，学士，副主任医师，主要从事老年病学研究，发表论文5篇
项目负责人 潘志红,200092 上海市控江路1665号,上海市,上海第二医科大学附属新华医院消化科
Tel: 021-65454630-4231，Fax: 021-65125173收搞日期 1995-05-02 接收日期 1995-05-19
Serum conjugated bile acids in the diagnosis of patients with fatty liver
, http://www.100md.com
Zhi-Hong Pan, Ru-Tao Wang, Lei-Ming Xu, Xiu-Ling Wang, Ding-Guo Li, Wen-Zheng Xu,Dong-Xia Li and Ji-Hong Mi
Department of Gastroenterology Xinhua Hospital, Shanghai Second Medical University, Shanghai 200092 China
Abstract
AIMS To study the serum inthe conjugated bile acids in the diagnosis of patients with fatty liver.
, 百拇医药
METHODS By using high performance liqid chromatography (HPLC) with ultraviolet, seven serum conjugated bile acids in 30 patients with fatty liver were measured, and compared with 30 patients with out fatty liver as controls.
RESULTS Seven serum conjugated bile acids in patients with fatty liver were significantly increased as compared to that in
controls (P<0.01).
, http://www.100md.com
CONCLUSIONS Serum conjugated bile acid is a sensitive index and provides basis for early diagnosis and therapy.
Subject headings fatty liver/blood bile acids and salles/blood chromatography, high pressure liquid
Pan ZH, Wang RT, Xu LM, Wang XL, Li DG, Xu WZ, Li DX,Mi JH.Serum conjugated bile acids in the diagnosis of patients with fatty liver.Xin Xiaohuabingxue Zazhi,1996；4(7)：371-372
, 百拇医药
摘要
目的 为脂肪肝患者实验室检查诊断提供有效的依据.
方法 采用反相高效液相色谱法(HPLC)检测30例脂肪肝患者的血清7种结合胆汁酸，并以30例无脂肪肝者作为对照.
结果 脂肪肝患者血清7种结合胆汁酸均高于无脂肪肝者(P<0.01).
结论 血清结合胆汁酸有助于了解脂肪肝患者肝细胞病变程度，为早期诊治提供依据.
主题词 脂肪肝/血液;胆汁酸类和盐类/血液;色谱法，高压液相
潘志红,王如涛,徐雷鸣,王秀玲,李定国,徐文正,李冬霞,宓继红.血清结合胆汁酸诊断脂肪肝.新消化病学杂志，1996；4(7)：371-372
, 百拇医药
脂肪肝确诊仍赖于肝活检.作者试图通过对脂肪肝患者与无脂肪肝者的血清7种结合胆汁酸测定进行比较，为脂肪肝患者实验室检查诊断提供有效依据.
1 对象和方法
1.1 对象 ①对照组30例，其中男19例，女11例；年龄52-71岁，平均62.5±6.5岁.所有对象均经详细询问病史、体格检查、B超及CT等检查排除脂肪肝、糖尿病、高血脂、肥胖及其他肝胆疾病.②脂肪肝组30例，其中男22例，女8例；年龄52-72岁，平均63.5±6.9岁.其中高脂血症17例，糖尿病11例，均经B超及CT证实为脂肪肝患者.两组在性别、年龄等方面无显著性差异.
1.2 仪器 高效液相色谱仪(岛津LC-4A)，波长190-540μm紫外检测，测定波长202mm.色谱柱：内径3.9mm，长25mm，为ODS原料C18柱(Woters公司)，柱度5μm.灵敏度：0.01，纸速0.4cm/min.柱温：30℃.
, 百拇医药
1.3 试剂 标准样品为7种结合胆汁酸钠盐，为Sigma公司产品.流动相：甲醇/水为75/25V/V，甲醇(上海化学试剂厂产品)，纯水(上海化学试剂厂产品)，针筒式滤器，0.22μm薄膜(H)(上海医药工业研究院产品)，Sep-pak C18小柱(天津津杨滤材厂产品).用磷酸二氢钠调整至pH 4.1，检测时以适量流动相溶解.
1.4 方法 全部受试者均于清晨空腹抽取静脉血3ml.根据7种结合胆汁酸标准品的混和液，作出标准色谱图：出峰顺序(按保留时间)依次为：TCA(牛磺胆酸)-TCDCA(牛磺鹅脱氧胆酸)-TDCA(牛磺脱氧胆酸)-TLCA(牛磺石胆酸)-GCA(甘氨胆酸)-GCDCA(甘氨鹅脱氧胆酸)-GDCA(甘氨脱氧胆酸).然后，在用10ml甲醇，20ml蒸馏水冲洗Sep-pak C18 小柱后，加入血清0.5ml以0.1ml/min流速，再用10ml蒸馏水、10%乙晴3ml冲洗、甲醇3ml洗脱，通过0.22μmH膜针筒式滤器，滤液在80℃中水浴1.5h，余液用N2吹干.测定时加适量流动相，振荡、离心，取上清10ml进样.测定结果以μmol/L表示.
, 百拇医药
2 结果
脂肪肝组的7种血清结合胆汁酸值均高于对照组(表1，P<0.01).
表1 脂肪肝患者7种血清结合胆汁酸 (x-±s, μmol/L, n=30)
, 百拇医药
3 讨论
胆汁酸是胆汁的主要成分，也是胆固醇在体内代谢的最终产物，占胆汁总固体量的50%-70%.胆汁酸仅在肝脏合成，在人体中主要有胆酸(cholic acid, CA)、鹅脱氧胆酸(chenodeoxy cholic acid, CDCA)，脱氧胆酸(deoxy cholic acid, DCA)及少量石胆酸(lithocholic acid, LCA)、熊脱氧胆酸(ursodeoxycholic acid, UDCA)和别胆酸(allocholic acid).其中CA和CDCA由肝细胞合成，为初级胆汁酸，其余为次级胆汁酸.大部分胆汁酸通过肽键与甘氨酸或牛磺酸结合成为甘氨胆酸(G)或牛磺胆酸(T)，即为结合胆汁酸.结合胆汁酸为胆酸的主要形式[1].
在肝细胞内质网微粒体酶系统作用下，胆固醇在逐步转化成胆汁酸的过程中，胆固醇7α-羟化酶为限速酶.胆汁酸由肝细胞通过主动转运分泌入胆汁，到达小肠后约95%-98%的胆汁酸在回肠末端重吸收，经门静脉返回肝脏再利用，形成胆汁酸的肠肝循环，经门静脉回流的胆汁酸约80%被窦膜有效摄取，仅少量未被摄取的胆汁酸从肝脏血窦内逸出，通过肝静脉进入外周血液循环.返回肝脏的胆汁酸对肝细胞内的胆固醇7α-羟化酶的活性具有抑制作用，使胆汁酸的合成和分泌量维持在一定范围内，保持一个较为稳定的胆汁酸量，即所谓的胆汁酸池.
, 百拇医药
脂肪肝是由于肝脏摄取脂酸的能力超过其代谢转化及脂蛋白分泌所致[2]，其原因很多.从肝脏本身而言，在年龄50岁以后，其肝脏重量下降，细胞数减少，而细胞代偿增大，核增大，核数及核仁增多，核内膜内凹，胞浆固缩，线粒体数量减少，嵴更稠密，内质网增多，最终造成糖原减少，脂肪褐素增加.这可能是导致脂肪肝的重要内在原因.脂肪肝时，肝细胞内贮脂增加形成脂滴，构成内质网泡囊化，使肝细胞核偏边.大脂滴合成微脂囊肿，破裂后被巨噬细胞吞噬成为脂肪肉芽肿.由于肝细胞为脂滴所占，故肝实质受挤压时可引起门脉高压[1,2].脂肪肝时的一系列病理变化可导致肝细胞功能受损，合成胆汁酸能力下降，胆汁酸池体积缩小；为了维持其正常的胆汁酸肠肝循环，不得不增加肠肝循环的次数，造成胆汁酸的进一步丢失.此外，肝细胞功能受损，使胆汁酸经肝血窦进入血液内胆汁酸量增加；随着肠肝循环的增加，又使进入血液中的胆汁酸增多[3].由此可见，脂肪肝时患者外周血液内胆汁酸量增加是以结合胆汁酸为胆酸的主要形式，因此检测结合胆汁酸可反映肝脏功能.
, 百拇医药
4 参考文献
1 江绍基，姚光弼，巫协宁，等.临床肝胆系病学.第1版.上海：上海科学技术出版社，1992：28-488
2 沙文阁.脂肪肝的治疗.实用内科杂志，1989；9(2)：60-61
3 Shoda J, Tanaka N, Bin-Fang HE, et al. Alteractions of bile acid composition in gallstone bile and liver of patients with
hepatolithiasis and their etiological significance. Dig Dis Sci, 1993;38(11):2130-2141, 百拇医药(潘志红 王如涛 徐雷鸣 王秀玲 李定国 徐文正 李冬霞 宓继红)
潘志红，女，1952-03-07生，浙江省宁波市人，汉族.1982年上海第二医科大学医学系本科毕业，学士，副主任医师，主要从事老年病学研究，发表论文5篇
项目负责人 潘志红,200092 上海市控江路1665号,上海市,上海第二医科大学附属新华医院消化科
Tel: 021-65454630-4231，Fax: 021-65125173收搞日期 1995-05-02 接收日期 1995-05-19
Serum conjugated bile acids in the diagnosis of patients with fatty liver
, http://www.100md.com
Zhi-Hong Pan, Ru-Tao Wang, Lei-Ming Xu, Xiu-Ling Wang, Ding-Guo Li, Wen-Zheng Xu,Dong-Xia Li and Ji-Hong Mi
Department of Gastroenterology Xinhua Hospital, Shanghai Second Medical University, Shanghai 200092 China
Abstract
AIMS To study the serum inthe conjugated bile acids in the diagnosis of patients with fatty liver.
, 百拇医药
METHODS By using high performance liqid chromatography (HPLC) with ultraviolet, seven serum conjugated bile acids in 30 patients with fatty liver were measured, and compared with 30 patients with out fatty liver as controls.
RESULTS Seven serum conjugated bile acids in patients with fatty liver were significantly increased as compared to that in
controls (P<0.01).
, http://www.100md.com
CONCLUSIONS Serum conjugated bile acid is a sensitive index and provides basis for early diagnosis and therapy.
Subject headings fatty liver/blood bile acids and salles/blood chromatography, high pressure liquid
Pan ZH, Wang RT, Xu LM, Wang XL, Li DG, Xu WZ, Li DX,Mi JH.Serum conjugated bile acids in the diagnosis of patients with fatty liver.Xin Xiaohuabingxue Zazhi,1996；4(7)：371-372
, 百拇医药
摘要
目的 为脂肪肝患者实验室检查诊断提供有效的依据.
方法 采用反相高效液相色谱法(HPLC)检测30例脂肪肝患者的血清7种结合胆汁酸，并以30例无脂肪肝者作为对照.
结果 脂肪肝患者血清7种结合胆汁酸均高于无脂肪肝者(P<0.01).
结论 血清结合胆汁酸有助于了解脂肪肝患者肝细胞病变程度，为早期诊治提供依据.
主题词 脂肪肝/血液;胆汁酸类和盐类/血液;色谱法，高压液相
潘志红,王如涛,徐雷鸣,王秀玲,李定国,徐文正,李冬霞,宓继红.血清结合胆汁酸诊断脂肪肝.新消化病学杂志，1996；4(7)：371-372
, 百拇医药
脂肪肝确诊仍赖于肝活检.作者试图通过对脂肪肝患者与无脂肪肝者的血清7种结合胆汁酸测定进行比较，为脂肪肝患者实验室检查诊断提供有效依据.
1 对象和方法
1.1 对象 ①对照组30例，其中男19例，女11例；年龄52-71岁，平均62.5±6.5岁.所有对象均经详细询问病史、体格检查、B超及CT等检查排除脂肪肝、糖尿病、高血脂、肥胖及其他肝胆疾病.②脂肪肝组30例，其中男22例，女8例；年龄52-72岁，平均63.5±6.9岁.其中高脂血症17例，糖尿病11例，均经B超及CT证实为脂肪肝患者.两组在性别、年龄等方面无显著性差异.
1.2 仪器 高效液相色谱仪(岛津LC-4A)，波长190-540μm紫外检测，测定波长202mm.色谱柱：内径3.9mm，长25mm，为ODS原料C18柱(Woters公司)，柱度5μm.灵敏度：0.01，纸速0.4cm/min.柱温：30℃.
, 百拇医药
1.3 试剂 标准样品为7种结合胆汁酸钠盐，为Sigma公司产品.流动相：甲醇/水为75/25V/V，甲醇(上海化学试剂厂产品)，纯水(上海化学试剂厂产品)，针筒式滤器，0.22μm薄膜(H)(上海医药工业研究院产品)，Sep-pak C18小柱(天津津杨滤材厂产品).用磷酸二氢钠调整至pH 4.1，检测时以适量流动相溶解.
1.4 方法 全部受试者均于清晨空腹抽取静脉血3ml.根据7种结合胆汁酸标准品的混和液，作出标准色谱图：出峰顺序(按保留时间)依次为：TCA(牛磺胆酸)-TCDCA(牛磺鹅脱氧胆酸)-TDCA(牛磺脱氧胆酸)-TLCA(牛磺石胆酸)-GCA(甘氨胆酸)-GCDCA(甘氨鹅脱氧胆酸)-GDCA(甘氨脱氧胆酸).然后，在用10ml甲醇，20ml蒸馏水冲洗Sep-pak C18 小柱后，加入血清0.5ml以0.1ml/min流速，再用10ml蒸馏水、10%乙晴3ml冲洗、甲醇3ml洗脱，通过0.22μmH膜针筒式滤器，滤液在80℃中水浴1.5h，余液用N2吹干.测定时加适量流动相，振荡、离心，取上清10ml进样.测定结果以μmol/L表示.
, 百拇医药
2 结果
脂肪肝组的7种血清结合胆汁酸值均高于对照组(表1，P<0.01).
表1 脂肪肝患者7种血清结合胆汁酸 (x-±s, μmol/L, n=30)
| 项目 | 正常对照组 | 脂肪肝组 |
| GCA | 1.360±1.040 | 2.799±2.004 |
| TCA | 1.110±0.440 | 3.518±3.009 |
| GCDCA | 1.330±0.510 | 3.060±2.459 |
| TCDCA | 2.470±0.680 | 4.307±2.572 |
| GDCA | 1.380±0.710 | 2.614±1.280 |
| TDCA | 1.420±0.370 | 2.473±1.067 |
| TLCA | 0.650±0.210 | 1.233±0.601 |
, 百拇医药
3 讨论
胆汁酸是胆汁的主要成分，也是胆固醇在体内代谢的最终产物，占胆汁总固体量的50%-70%.胆汁酸仅在肝脏合成，在人体中主要有胆酸(cholic acid, CA)、鹅脱氧胆酸(chenodeoxy cholic acid, CDCA)，脱氧胆酸(deoxy cholic acid, DCA)及少量石胆酸(lithocholic acid, LCA)、熊脱氧胆酸(ursodeoxycholic acid, UDCA)和别胆酸(allocholic acid).其中CA和CDCA由肝细胞合成，为初级胆汁酸，其余为次级胆汁酸.大部分胆汁酸通过肽键与甘氨酸或牛磺酸结合成为甘氨胆酸(G)或牛磺胆酸(T)，即为结合胆汁酸.结合胆汁酸为胆酸的主要形式[1].
在肝细胞内质网微粒体酶系统作用下，胆固醇在逐步转化成胆汁酸的过程中，胆固醇7α-羟化酶为限速酶.胆汁酸由肝细胞通过主动转运分泌入胆汁，到达小肠后约95%-98%的胆汁酸在回肠末端重吸收，经门静脉返回肝脏再利用，形成胆汁酸的肠肝循环，经门静脉回流的胆汁酸约80%被窦膜有效摄取，仅少量未被摄取的胆汁酸从肝脏血窦内逸出，通过肝静脉进入外周血液循环.返回肝脏的胆汁酸对肝细胞内的胆固醇7α-羟化酶的活性具有抑制作用，使胆汁酸的合成和分泌量维持在一定范围内，保持一个较为稳定的胆汁酸量，即所谓的胆汁酸池.
, 百拇医药
脂肪肝是由于肝脏摄取脂酸的能力超过其代谢转化及脂蛋白分泌所致[2]，其原因很多.从肝脏本身而言，在年龄50岁以后，其肝脏重量下降，细胞数减少，而细胞代偿增大，核增大，核数及核仁增多，核内膜内凹，胞浆固缩，线粒体数量减少，嵴更稠密，内质网增多，最终造成糖原减少，脂肪褐素增加.这可能是导致脂肪肝的重要内在原因.脂肪肝时，肝细胞内贮脂增加形成脂滴，构成内质网泡囊化，使肝细胞核偏边.大脂滴合成微脂囊肿，破裂后被巨噬细胞吞噬成为脂肪肉芽肿.由于肝细胞为脂滴所占，故肝实质受挤压时可引起门脉高压[1,2].脂肪肝时的一系列病理变化可导致肝细胞功能受损，合成胆汁酸能力下降，胆汁酸池体积缩小；为了维持其正常的胆汁酸肠肝循环，不得不增加肠肝循环的次数，造成胆汁酸的进一步丢失.此外，肝细胞功能受损，使胆汁酸经肝血窦进入血液内胆汁酸量增加；随着肠肝循环的增加，又使进入血液中的胆汁酸增多[3].由此可见，脂肪肝时患者外周血液内胆汁酸量增加是以结合胆汁酸为胆酸的主要形式，因此检测结合胆汁酸可反映肝脏功能.
, 百拇医药
4 参考文献
1 江绍基，姚光弼，巫协宁，等.临床肝胆系病学.第1版.上海：上海科学技术出版社，1992：28-488
2 沙文阁.脂肪肝的治疗.实用内科杂志，1989；9(2)：60-61
3 Shoda J, Tanaka N, Bin-Fang HE, et al. Alteractions of bile acid composition in gallstone bile and liver of patients with
hepatolithiasis and their etiological significance. Dig Dis Sci, 1993;38(11):2130-2141, 百拇医药(潘志红 王如涛 徐雷鸣 王秀玲 李定国 徐文正 李冬霞 宓继红)