大鼠脾阴虚证病理模型的建立
南京医科大学第一临床医学院中医教研室 江苏省南京市 210029
江苏省教委自然科学基金资助(No.91014)
陈德珍，女，1939-12-27生，江苏省海门市人，汉族.1965年南京医学院本科毕业，副教授，副主任医师，主要从事中西医结合脾胃病的临床和实验研究，发表论文20篇
项目负责人:江苏省南京市广州路300号
Tel:025-3714511-560 Fax:025-3724440
收稿日期:1995-10-18 接受日期:1996-01-04
Preliminary study on the pathological model of Piyinxu in rats
, 百拇医药
De-Zhen Chen and Mu-Xin Wei
Department of Traditional Chinese Medicine, The First College of Clinical Medicine, Nanjing Medical University, Nanjing 210029, Jiangsu Province, China
Abstract
AIM To study the method of making pathologic model of Piyin xu (spleen_yin deficiency) by using SD rats and to preliminarily observe this model.
, 百拇医药
METHODS Folium sennae 08?g and tabellae thyroidi 80mg were given daily by stomach_feeding to each rat for 12 days to establish the pathologic model of Piyinxu. The activity of the rats, the character of stool and so on were observed.
RESULTS Not only the symptoms of Pixu, such as diarrhea, poor appetite, distention of the abdomen, weight loss and so forth, but also Yinxu neire(endogenous heat), such as increment in drinking water, nervousness and restlessness appeared. All these were different from the control group of Piyinxu (spleen_yang deficiency).
, 百拇医药
CONCLUSION Combination of folium sennae and tabellae thyroi di is an effective method to establish a pathologic model of Piyinxu.
Subject headings Spleen asthenia/pathology;Spleen-yin;Disease models, animal
Chen DZ,Wei MX.Preliminary study on the pathological model of Piyinxu inrats.Xin Xiaohuabingxue Zazhi,1997；5(1)：8-10
, 百拇医药 摘要
目的 探讨脾阴虚证大鼠病理模型的造型方法，并对这种模型进行初步观察.
方法 每天给SD大鼠胃饲番泻叶0.8g，甲状腺片80mg，共12d造成类脾阴虚证病理模型，观察造型前后各阶段实验动物活动状况、大便性状等有关指标.
结果 该模型既出现了稀烂便，食少，腹胀，体重下降等脾虚运化失司症状，又有饮水量增加，燥动不安等阴虚内热病机的表现.有别于脾阳虚对照组.
结论 番泻片与甲状腺片合用，是建立脾阴虚证病理模型的有效方法.
主题词 脾虚/病理学;脾阴;疾病模型，动物
, 百拇医药
陈德珍,魏睦新.大鼠脾阴虚证病理模型的建立.新消化病学杂志,1997；5(1)：8-10
中医病证动物模型的建立，对突破传统中医经验医学模式，导入生物科学作为中医学发展的 基础之一，推动中医现代化有重要意义.近年来这方面的研究取得了很大的成绩，尤其是脾虚模型的研究，参加者有百余家之多[1].这些模型一般认为接近中医脾阳(气)虚证.与此同时，近年来在脾胃病的理论和临床研究方面，不仅局限于阳气虚证，人们对脾阴虚证病因病理、临床证治也进行了广泛的研究[2，3].但脾阴虚证病理模型至今尚未见有报道.为加深对脾阴虚证的理解，现探讨在SD大鼠建立脾阴虚证病理模型的方法.
1 材料和方法
1.1 材料 实验动物为健康SD大鼠32只，45d龄，雌雄各半，体重190-220g，由江苏省实验动物中心提供.适应性饲养3d后，随机分为对照组(8只)，脾阳虚造型组(12只)和脾阴虚造型组(12只).均自由饮水、进食，饲料由该中心供应.番泻叶(由本院药剂科提供)浸液：番泻叶加入适量蒸馏水，浸泡1h后，急火煮沸5min，继续浸泡2h后，取得滤液.调终浓度至1ml含1g原药，4冰箱保存备用.甲状腺片粉：由浙江金华生物化学制药厂(Lot 19930713)供应.
, 百拇医药
1.2 方法 大鼠分组后，继续饲养5?d，观察记录各有关指标.第6天起，每日每只胃饲造型药物1.5ml，其内容为：脾阴虚组含番泻叶1g；空白对照组则用生理盐水替代.分上下午两次给药.使用造型药物后共观察记录12d.①一般项目：各组每天观察活动状况，大便性状，肛门污染程度及被毛色泽变化.饮水量及食量：用计残量的方法每天分笼统计每只平均饮水量和食量.体重：用电子称(感量0.5g)于每日上午定时称量体重.血清蛋白：于造型处理后12d眼底静脉丛采血，用全自动生化分析仪分别测定总蛋白、白蛋白和球蛋白含量.主要脏器光镜检查：造型12d采血后，颈椎脱臼处死，立刻摘取心、肝、脾、肾、小肠和胃，甲醛固定后作光镜检查. 统计学处理 每天3组体重、肛温数据及血清蛋白量作方差分析，并用Secheffe法或Fisher PLSD法进一步作两两比较.体重变化进一步用曲线配合求得回归方程.食量，饮水量因是分笼饲养的，以各组均值统计造型处理前后t检验，及同期3组方差分析.显著性检验界值均定为P<0.05.
2 结果
, 百拇医药
2.1 一般情况 造型前各组大便正常.造型开始后的前4d，两个实验组大便逐渐变软烂，但还成形，肛周稍有污染.5d后，笼内鼠屎粘满木屑，大便变稀烂，肛周污染成黄褐色.这种现象持续至造型结束.在此期间，对照组大便一直未见异常.造型前及造型后1，2d，各组活动正常.3d后，脾阳虚组活动减少，脾阴虚组显得比较活跃，两组腹部均稍有鼓起，用手触摸时挣扎反抗.5?d后脾阳虚组经常偎挤在一起.脾阴虚大鼠不时地在笼内奔跑、抓爬笼罩，频繁直立搓前爪.8d后，脾阳虚组活动进一步减少、闭目垂首、目光无神，而脾阴虚组仍显得烦燥不安，在胃饲、测温时尖叫抵抗明显.此阶段，两个造型组均出现被毛散乱、毛色无泽现象.
2.2 食量 对照组，脾阳虚组和脾阴虚组大鼠造型前5d每只每日平均食量分别为26.60±0.82(x-±s,下同)，29.20±0.86和28.4±1.08g，3组间无显著性差 异.造型处理后12d平均食量分别为24.17±0.69，22.13±0.56和21.68±0.68g，3组间差异显著(F=3.887,P<0.05),脾阳虚组和脾阴虚组均显著低于对照组(P<0.05)，但这两组间无显著差异.造型处理前后各组自身对照，对照组P>0.05，脾阳虚组和脾阴虚组P<0.01.
, 百拇医药
2.3 饮水量 对照组，脾阳虚组和脾阴虚组造型前5d每只每日平均饮水量分别为30.20±2.96，33.72±4.59和31.20±3.59ml，3组间无显著性差异.造型处理的12d期间，平均饮水量3组分别为32.38±0.87，37.32±2.81和44.17±1.34ml(F=10.06, P <0.01)，对照组、脾阳虚组间无显著性差异(P=0.07),脾阴虚组高于这两组(P<0.01和0.05)，造型前后各组自身对照t检验，脾阴虚组明显上升(P<0.01)，其它2组无显著性差异，但从每天统计的数据可以看出脾阳虚组9d后，饮水量有急剧下降的趋势(图1).
2.4 体重 各组体重增长曲线图2，作曲线配合后，对照组呈S型，显示了体重正常上升的趋势(回规方程和相关系数分别为：Y=191.820+0.106X+0.438χ2-0.020χ3 r=0.95)，脾阳虚组(Y=188.710+9.550χ-0.734χ2+0.012χ3 r=0.81)和脾阴虚组(Y=182.210+8.b5qχ-0.940χ2+0.018χ3 r=0.88)则呈抛物线型，造型前体重也呈上升趋势，造型处理后体重增加缓慢后期反而逐渐下降.方差分析结果：从观察开始至造型7d时，各组 每日平均体重无显著差异.8-12d时差异有显著性意义，脾阴虚组低于对照组(P <0.05)，最后2d也低于脾阳虚组(P<0.01)；脾阳虚组虽也 低于对照组，但仅8-10d时有统计学意义(P<0.01).
, 百拇医药
2.5 血清蛋白 部分标本因血量太少无法测定，最终实测标本对照组4例，脾阳虚组5例，脾阴虚组6例.结 果血清总蛋白阳虚组低于对照组(P<0.05)，脾阴虚组低于其它两组(P<0.01).白蛋白3组间的差异也有显著性意义(F=7.725, P<0.01)，脾阴虚组低于对照组(P<0.01)，脾阳虚组虽有降低趋势，但无统计学意义.球蛋白3组间的差异无显著性意义(图3).A/G对照组，脾阳虚组，脾阴虚组分别为1.24±0.054， 0.92±0.121和0.48±0.049，造型组都呈倒置现象，脾阴虚组尤著.
图1 各组造型前后每日平均饮水量
图2 各组造型前后体重变化(x-±S x-)
aP<0.05，vs对照组；bP<0.01，vs脾阳虚组.
, 百拇医药
图3 造型后各组血清蛋白比较(x-±S x-)
aP<0.05，bP<0.01，vs对照组；cP<0.01，vs 脾阳虚组.
2.6 脏器光镜检查 两个实验组小肠有轻度炎症改变，但对照组也有不同程度炎症改变.其他脏器各组在光镜下均未发现明显异常.
3 讨论
综合脾虚和阴虚模型的方法[4]，作者摸索出了运用番泻叶和甲状腺素复合导致类 脾阴虚模型的方法，该模型既出现了与脾阳虚模型相一致的稀烂便，食少，腹胀，体重下降及血清总蛋白和白蛋白下降等类似临床脾虚运化失司，水谷精微生化乏源的表现，又有完全不同于脾阳虚模型的饮水量增加、燥动不安等类似临床阴虚内热病机的表现，我们的另一项观察还发现该模型肛温和皮温上升的客观改变.提示这种模型能在症状和病机方面，较好的模拟脾阴虚证[5].这些效应的出现，推测一方面可能与药理剂量的甲状腺素导致实验动物细胞代谢持续亢进有关；另一方面与番泻叶的苦寒代谢，泄下通便，导致水谷精微耗散过多有关. 脾阳虚证患者存在低蛋白血症，笔者等已有报道[6]，本文两个实验组总蛋白均低于对照组，A/G呈倒置现象，且程度上脾阳虚组更甚，与临床一致，似乎反映了脾虚精微不足这一特性.主要脏器光镜检查未发现明显异常，提示本文脾虚模型的病理改变，属于功能性障碍，尚未导致器质性病变.虽然从临床症状体征角度初步成功地模拟了脾阴虚证，但实验例数尚不够多，模型停药后能维持多少时间以及对相应补脾药物的效应还有待于进一步探讨.
, http://www.100md.com
4 参考文献1 陈小野.脾虚证动物模型的造模思路.中医杂志，1995；36(4)：239-241
2 魏睦新，贝叔英.脾阴虚证植物神经机能状态初探.中西医结合杂志，1988；8(4)：202-203
3 汤一新，安浚.中医脾阴学说研究.第1版.北京：科学技术文献出版社，1992：120-140
4 上海中医学院正常人体学教研组.阳虚、阴虚造型以及某些助阳药和滋阴药作用的初步研究.新医药杂志，1977；(9)：33-34
5 魏睦新，贝叔英.脾阴虚证患者消化系统功能的初步观察.上海中医药杂志，1988；(2)：8-9
6 魏睦新，贝叔英.脾阴虚体液免疫机能初探.南京医学院学报，1988；8(1)：53-54, http://www.100md.com
江苏省教委自然科学基金资助(No.91014)
陈德珍，女，1939-12-27生，江苏省海门市人，汉族.1965年南京医学院本科毕业，副教授，副主任医师，主要从事中西医结合脾胃病的临床和实验研究，发表论文20篇
项目负责人:江苏省南京市广州路300号
Tel:025-3714511-560 Fax:025-3724440
收稿日期:1995-10-18 接受日期:1996-01-04
Preliminary study on the pathological model of Piyinxu in rats
, 百拇医药
De-Zhen Chen and Mu-Xin Wei
Department of Traditional Chinese Medicine, The First College of Clinical Medicine, Nanjing Medical University, Nanjing 210029, Jiangsu Province, China
Abstract
AIM To study the method of making pathologic model of Piyin xu (spleen_yin deficiency) by using SD rats and to preliminarily observe this model.
, 百拇医药
METHODS Folium sennae 08?g and tabellae thyroidi 80mg were given daily by stomach_feeding to each rat for 12 days to establish the pathologic model of Piyinxu. The activity of the rats, the character of stool and so on were observed.
RESULTS Not only the symptoms of Pixu, such as diarrhea, poor appetite, distention of the abdomen, weight loss and so forth, but also Yinxu neire(endogenous heat), such as increment in drinking water, nervousness and restlessness appeared. All these were different from the control group of Piyinxu (spleen_yang deficiency).
, 百拇医药
CONCLUSION Combination of folium sennae and tabellae thyroi di is an effective method to establish a pathologic model of Piyinxu.
Subject headings Spleen asthenia/pathology;Spleen-yin;Disease models, animal
Chen DZ,Wei MX.Preliminary study on the pathological model of Piyinxu inrats.Xin Xiaohuabingxue Zazhi,1997；5(1)：8-10
, 百拇医药 摘要
目的 探讨脾阴虚证大鼠病理模型的造型方法，并对这种模型进行初步观察.
方法 每天给SD大鼠胃饲番泻叶0.8g，甲状腺片80mg，共12d造成类脾阴虚证病理模型，观察造型前后各阶段实验动物活动状况、大便性状等有关指标.
结果 该模型既出现了稀烂便，食少，腹胀，体重下降等脾虚运化失司症状，又有饮水量增加，燥动不安等阴虚内热病机的表现.有别于脾阳虚对照组.
结论 番泻片与甲状腺片合用，是建立脾阴虚证病理模型的有效方法.
主题词 脾虚/病理学;脾阴;疾病模型，动物
, 百拇医药
陈德珍,魏睦新.大鼠脾阴虚证病理模型的建立.新消化病学杂志,1997；5(1)：8-10
中医病证动物模型的建立，对突破传统中医经验医学模式，导入生物科学作为中医学发展的 基础之一，推动中医现代化有重要意义.近年来这方面的研究取得了很大的成绩，尤其是脾虚模型的研究，参加者有百余家之多[1].这些模型一般认为接近中医脾阳(气)虚证.与此同时，近年来在脾胃病的理论和临床研究方面，不仅局限于阳气虚证，人们对脾阴虚证病因病理、临床证治也进行了广泛的研究[2，3].但脾阴虚证病理模型至今尚未见有报道.为加深对脾阴虚证的理解，现探讨在SD大鼠建立脾阴虚证病理模型的方法.
1 材料和方法
1.1 材料 实验动物为健康SD大鼠32只，45d龄，雌雄各半，体重190-220g，由江苏省实验动物中心提供.适应性饲养3d后，随机分为对照组(8只)，脾阳虚造型组(12只)和脾阴虚造型组(12只).均自由饮水、进食，饲料由该中心供应.番泻叶(由本院药剂科提供)浸液：番泻叶加入适量蒸馏水，浸泡1h后，急火煮沸5min，继续浸泡2h后，取得滤液.调终浓度至1ml含1g原药，4冰箱保存备用.甲状腺片粉：由浙江金华生物化学制药厂(Lot 19930713)供应.
, 百拇医药
1.2 方法 大鼠分组后，继续饲养5?d，观察记录各有关指标.第6天起，每日每只胃饲造型药物1.5ml，其内容为：脾阴虚组含番泻叶1g；空白对照组则用生理盐水替代.分上下午两次给药.使用造型药物后共观察记录12d.①一般项目：各组每天观察活动状况，大便性状，肛门污染程度及被毛色泽变化.饮水量及食量：用计残量的方法每天分笼统计每只平均饮水量和食量.体重：用电子称(感量0.5g)于每日上午定时称量体重.血清蛋白：于造型处理后12d眼底静脉丛采血，用全自动生化分析仪分别测定总蛋白、白蛋白和球蛋白含量.主要脏器光镜检查：造型12d采血后，颈椎脱臼处死，立刻摘取心、肝、脾、肾、小肠和胃，甲醛固定后作光镜检查. 统计学处理 每天3组体重、肛温数据及血清蛋白量作方差分析，并用Secheffe法或Fisher PLSD法进一步作两两比较.体重变化进一步用曲线配合求得回归方程.食量，饮水量因是分笼饲养的，以各组均值统计造型处理前后t检验，及同期3组方差分析.显著性检验界值均定为P<0.05.
2 结果
, 百拇医药
2.1 一般情况 造型前各组大便正常.造型开始后的前4d，两个实验组大便逐渐变软烂，但还成形，肛周稍有污染.5d后，笼内鼠屎粘满木屑，大便变稀烂，肛周污染成黄褐色.这种现象持续至造型结束.在此期间，对照组大便一直未见异常.造型前及造型后1，2d，各组活动正常.3d后，脾阳虚组活动减少，脾阴虚组显得比较活跃，两组腹部均稍有鼓起，用手触摸时挣扎反抗.5?d后脾阳虚组经常偎挤在一起.脾阴虚大鼠不时地在笼内奔跑、抓爬笼罩，频繁直立搓前爪.8d后，脾阳虚组活动进一步减少、闭目垂首、目光无神，而脾阴虚组仍显得烦燥不安，在胃饲、测温时尖叫抵抗明显.此阶段，两个造型组均出现被毛散乱、毛色无泽现象.
2.2 食量 对照组，脾阳虚组和脾阴虚组大鼠造型前5d每只每日平均食量分别为26.60±0.82(x-±s,下同)，29.20±0.86和28.4±1.08g，3组间无显著性差 异.造型处理后12d平均食量分别为24.17±0.69，22.13±0.56和21.68±0.68g，3组间差异显著(F=3.887,P<0.05),脾阳虚组和脾阴虚组均显著低于对照组(P<0.05)，但这两组间无显著差异.造型处理前后各组自身对照，对照组P>0.05，脾阳虚组和脾阴虚组P<0.01.
, 百拇医药
2.3 饮水量 对照组，脾阳虚组和脾阴虚组造型前5d每只每日平均饮水量分别为30.20±2.96，33.72±4.59和31.20±3.59ml，3组间无显著性差异.造型处理的12d期间，平均饮水量3组分别为32.38±0.87，37.32±2.81和44.17±1.34ml(F=10.06, P <0.01)，对照组、脾阳虚组间无显著性差异(P=0.07),脾阴虚组高于这两组(P<0.01和0.05)，造型前后各组自身对照t检验，脾阴虚组明显上升(P<0.01)，其它2组无显著性差异，但从每天统计的数据可以看出脾阳虚组9d后，饮水量有急剧下降的趋势(图1).
2.4 体重 各组体重增长曲线图2，作曲线配合后，对照组呈S型，显示了体重正常上升的趋势(回规方程和相关系数分别为：Y=191.820+0.106X+0.438χ2-0.020χ3 r=0.95)，脾阳虚组(Y=188.710+9.550χ-0.734χ2+0.012χ3 r=0.81)和脾阴虚组(Y=182.210+8.b5qχ-0.940χ2+0.018χ3 r=0.88)则呈抛物线型，造型前体重也呈上升趋势，造型处理后体重增加缓慢后期反而逐渐下降.方差分析结果：从观察开始至造型7d时，各组 每日平均体重无显著差异.8-12d时差异有显著性意义，脾阴虚组低于对照组(P <0.05)，最后2d也低于脾阳虚组(P<0.01)；脾阳虚组虽也 低于对照组，但仅8-10d时有统计学意义(P<0.01).
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2.5 血清蛋白 部分标本因血量太少无法测定，最终实测标本对照组4例，脾阳虚组5例，脾阴虚组6例.结 果血清总蛋白阳虚组低于对照组(P<0.05)，脾阴虚组低于其它两组(P<0.01).白蛋白3组间的差异也有显著性意义(F=7.725, P<0.01)，脾阴虚组低于对照组(P<0.01)，脾阳虚组虽有降低趋势，但无统计学意义.球蛋白3组间的差异无显著性意义(图3).A/G对照组，脾阳虚组，脾阴虚组分别为1.24±0.054， 0.92±0.121和0.48±0.049，造型组都呈倒置现象，脾阴虚组尤著.
图1 各组造型前后每日平均饮水量
图2 各组造型前后体重变化(x-±S x-)
aP<0.05，vs对照组；bP<0.01，vs脾阳虚组.
, 百拇医药
图3 造型后各组血清蛋白比较(x-±S x-)
aP<0.05，bP<0.01，vs对照组；cP<0.01，vs 脾阳虚组.
2.6 脏器光镜检查 两个实验组小肠有轻度炎症改变，但对照组也有不同程度炎症改变.其他脏器各组在光镜下均未发现明显异常.
3 讨论
综合脾虚和阴虚模型的方法[4]，作者摸索出了运用番泻叶和甲状腺素复合导致类 脾阴虚模型的方法，该模型既出现了与脾阳虚模型相一致的稀烂便，食少，腹胀，体重下降及血清总蛋白和白蛋白下降等类似临床脾虚运化失司，水谷精微生化乏源的表现，又有完全不同于脾阳虚模型的饮水量增加、燥动不安等类似临床阴虚内热病机的表现，我们的另一项观察还发现该模型肛温和皮温上升的客观改变.提示这种模型能在症状和病机方面，较好的模拟脾阴虚证[5].这些效应的出现，推测一方面可能与药理剂量的甲状腺素导致实验动物细胞代谢持续亢进有关；另一方面与番泻叶的苦寒代谢，泄下通便，导致水谷精微耗散过多有关. 脾阳虚证患者存在低蛋白血症，笔者等已有报道[6]，本文两个实验组总蛋白均低于对照组，A/G呈倒置现象，且程度上脾阳虚组更甚，与临床一致，似乎反映了脾虚精微不足这一特性.主要脏器光镜检查未发现明显异常，提示本文脾虚模型的病理改变，属于功能性障碍，尚未导致器质性病变.虽然从临床症状体征角度初步成功地模拟了脾阴虚证，但实验例数尚不够多，模型停药后能维持多少时间以及对相应补脾药物的效应还有待于进一步探讨.
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4 参考文献1 陈小野.脾虚证动物模型的造模思路.中医杂志，1995；36(4)：239-241
2 魏睦新，贝叔英.脾阴虚证植物神经机能状态初探.中西医结合杂志，1988；8(4)：202-203
3 汤一新，安浚.中医脾阴学说研究.第1版.北京：科学技术文献出版社，1992：120-140
4 上海中医学院正常人体学教研组.阳虚、阴虚造型以及某些助阳药和滋阴药作用的初步研究.新医药杂志，1977；(9)：33-34
5 魏睦新，贝叔英.脾阴虚证患者消化系统功能的初步观察.上海中医药杂志，1988；(2)：8-9
6 魏睦新，贝叔英.脾阴虚体液免疫机能初探.南京医学院学报，1988；8(1)：53-54, http://www.100md.com