CCl4，D-Gal，ANIT对化学性肝损伤小鼠血液生化指标的影响
1解放军北京医学高等专科学校药理教研室、病理教研室 北京市 100071
2解放军军事医学科学院附属307医院检验科 北京市 100850
黄正明，男，1949-09-03生，河南省商丘市人，1994年军事医学科学院硕士毕业，副教授，主要从事抗肝炎药物等研究，发表论文35篇.
项目负责人 黄正明，100071，北京市，解放军北京医学高等专科学校药理教研室、病理教研室，北京市丰台东大街8号.
基金资助 九五军队重点科研基金资助项目A类课题，[1996]卫科训字第96号.*Project supported by the fund for 95 key army scientific researches.
, 百拇医药
Correspondence to Zheng-Ming Huang, Department of Pharmacology, Chinese PLA Beijing Medical College, 8 Fengtai Dongdajie, Beijing 100071, China
Tel. +86·10·66888129-3723
收稿日期 1997-05-03
Effects of CCl4, D-Gal and ANIT on serum biochemistry in mice with liver injury*
Zheng-Ming Huang1, Xin-Bo Yang1, Wen-Bin Cao1, Ming Zheng1, Hong-Yan Chen1, Jing-Zhen Zhang1,Jian-Hua Tao1,Li-Jun Lu1, Xiang Sui1, Jun Liu2, Lin Liu2 and Ying Huang2
, 百拇医药
1Department of Pharmacology, Chinese PLA Beijing Medical College, Beijing 100071, China
2Biochemical Laboratory of PLA 307 Hospital, Beijing 100039, China
Abstract
AIM To study the effects of three hepatic toxicants on serum biochemistry in mice with liver injury.
METHODS Liver injury models were induced by 1.5g/L CCl4 10mg/kg, ig, D-Gal 800mg/kg, ip, and ANIT 100mg/kg, ig, respectively. Kunming mice were divided into 2 groups (10 for each) for each model. The blood samples were taken by excising out eyeball at 24h (in CCl4 and D-Gal models) and 48h (in ANIT model) after poisoning. The blood biochemical examination was made using Automatic Biochemical Analyzer.
, http://www.100md.com
RESULTS CCl4 and D-Gal ig increased the serum ALT, AST and LDP and the concentrations peaked at 24h after intoxication, while serum BiliT, Trig, Chol, Glu, ALP, GGT, TP and Alb were not affected. ANIT could significantly increase the levels of serum ALT, AST, BiliT, LDL, ALP and Chol at 48h after intoxication but decreased the serum TIC obviously and Glu slightly. The concentrations of GGL, Alb and TP were not affected.
CONCLUSION The altered serum biochemical indexes in the three models could be used to study the liver-protecting drugs, and ANIT induced model, in which LDL and Chol were increased, may be considered as a hypercholesterol model for studing the hypolipemic agents.
, http://www.100md.com
Subject headings carbon tetrachloride/toxicity; galactosamine/toxicity; 1-naphthylisothiocyanate/toxicity;
liver/drug effects; hepatitis, toxic/blood
Huang ZM, Yang XB, Cao WB, Zheng M, Chen HY, Zhang JZ, Tao JH, Lu LJ, Sui X, Liu J, Liu L, Huang Y. Effects of CCl4, D-Gal and ANIT on serum biochemistry in mice with liver injury. Huaren Xiaohua Zazhi, 1998;6(1):17-18
, 百拇医药
摘要
目的 观察3种常用的化学性肝毒剂对小鼠血清ALT，Trig, LDL等11项生化指标的影响.
方法 取小鼠20只，随机分为CCl4中毒组和NS对照组，每组10只. 中毒组小鼠1.5g/L CCl4，10mg/kg, ig，待中毒后24h，杀鼠取血，分离血清，由自动生化测定仪分别测定肝功能：ALT，AST，总胆红素(BiliT)；血脂：三酰甘油(Trig)、胆固醇(Chol)、低密度脂蛋白(LDL)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)；肝功能酶系：碱性磷酸酶(ALP)、转肽酶(GGT)和血糖(Glu)11项生化指标. NS对照组同时给NS，ig. D半乳糖胺(D-Gal)：中毒鼠800mg/kg，ip和a萘异硫氢酸酯(ANIT)：中毒鼠100mg/kg,ig，动物分组，观察指标同CCl4.
, http://www.100md.com 结果 CCl4，D-Gal均能明显升高小鼠血中的ALT，AST和LDL水平，分别于中毒后24h达高峰. 对BiliT,Trig, Chol, Glu, ALP, GGT,TP和Alb无明显影响.ANIT对小鼠中毒后48h，血中ALT，AST，BiliT,LDL,ALP和Chol水平明显升高，Trig明显降低，Glu略有下降；对GGT，Alb,TP无明显影响.
结论 这些生化指标的改变，可为保肝药物的研究提供多项客观的观察指标. LDL，Chol的水平升高，还可以作为高胆固醇模型来考虑降血脂药物的研究.
主题词 四氯化碳/毒性；半乳糖胺/毒性；异硫氰酸1萘酯/毒性；肝/药物作用；肝炎，中毒性/血液
黄正明, 杨新波, 曹文斌, 郑鸣, 陈鸿雁, 张敬珍, 陶建华, 卢立军, 眭翔, 刘军, 刘琳,黄英. CCl4，D-Gal，ANIT对化学性肝损伤小鼠血液生化指标的影响. 华人消化杂志, 1998;6(1):17-18
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0 引言
为了全面了解CCl4，D-Gal和ANIT的毒性作用，以小白鼠为研究对象，观察了上述3种化学性肝毒剂对小鼠血液生化指标，即ALT，AST，BiliT，TriG， Chol，低密度脂蛋白(LDL)，GLu，TP，白蛋白(ALb)、碱性磷酸酶(ALP)、转肽酶(GGT)的影响，并结合肝病理观察结果综合分析，以便有目的的选择合适的药物模型和观察典型的生化指标提供依据. 现总结如下.
1 材料和方法
1.1 材料 ①动物：上海种小鼠，体重18g～22g，雌雄各半，由军事医学科学院动物中心提供. ②化学性肝毒剂：CCl4分析纯，由北京化工厂生产；D-Gal分析纯，由解放军防化院提供；ANIT分析纯，由解放军防化院提供. ③仪器：进口自动生化测定仪，型号Monarchplus，由美国实验分析仪器公司提供.
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1.2 方法
1.2.1 CCl4 取小鼠20只，随机分为CCl4中毒组和NS对照组，每组10只. 中毒组小鼠1.5g/L CCl4，10mg/kg,ig，待中毒后24h(实验证明，此时为肝损伤严重期)，杀鼠取血，分离血清，由自动生化测定仪分别测定肝功能(ALT，AST，BiliT)、血脂(Trig, Chol, LDL, TP, Alb)、肝功能酶系(ALP，GGT)和血糖(Glu)，11项生化指标. NS对照组同时给予NS,ig.
1.2.2 D-Gal 动物分组，观察指标同CCl4. 中毒鼠800mg/kg,ip. 待中毒高峰(攻毒后24h)杀鼠取血，分别进行生化指标测定.
, 百拇医药
1.2.3 ANIT 动物分组，观察指标同CCl4. 中毒鼠ig，100mg/kg. 待中毒高峰(攻毒后48h)杀鼠取血，分别进行生化指标测定.
2 结果
2.1 化学肝毒剂对小鼠肝损伤血液生化指标的变化3种化学肝毒剂在小鼠中毒高峰期，对肝功能均有明显改变. 相比之下，ANIT升高ALT，BiliT更为显著(表1).
ANIT明显升高Chol，降低Trig，对血糖略有降低；CCl4有升高血糖作用，其他无明显变化；D-Gal对小鼠血脂和血糖无明显影响(表2). CCl4，D-Gal ，ANIT均显著升高LDL， 对ALP，除了ANIT明显升高外，CCl4，D-Gal也有一定升高；它们对GGT均有不同程度升高，对TP、Alb无明显影响(表2).
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2.2 化学肝毒剂对小鼠肝损伤的病理 CCl4,D-Gal致小鼠肝损伤均于中毒后24h～48h肝细胞浊肿、空泡、嗜酸性变和脂肪性变严重，与血清ALT、AST升高结果一致. ANIT于小鼠中毒后48h～72h肝损伤明显. 肝细胞变性、坏死，小叶间胆管增生，胆管上皮细胞肿胀，部分坏死的上皮细胞脱落后阻塞胆管，导致血清AST、ALT、BiliT显著升高.
表1 化学肝毒剂对小鼠肝功能和血脂的影响 (n=10,x-±s)
, http://www.100md.com
aP<0.05，bP<0.01，vs NS.
表2 化学肝毒剂对小鼠肝酶、血糖和蛋白的影响 (n=10,x-±s)
, http://www.100md.com
aP<0.05，bP<0.01，vs NS中毒剂量同表1.
3 讨论
对CCl4,D-Gal和ANIT致动物肝损伤，肝功能明显改变报道较多[1～3]，而对其他生化指标，肝内酶生成的影响报道甚少. 结果表明，它们不仅能改变动物的肝功能，使ALT，AST和BiliT明显升高，而且对其他生化指标也有不同程度的影响. 如它们均明显升高低密度脂蛋白(LDL)；ANIT升高 ALP和Chol，降低Trig和血糖水平等. 这些生化指标的改变，可为保肝药物的研究提供多项客观的观察指标.
实验结果还提示，ANIT除了作为退黄降酶药物研究的模型外，还可以作为高胆固醇模型来考虑降血脂药物的研究. CCl4, D-Gal， ANIT升高 LDL 水平也可以作为判断肝损伤严重程度的客观标准. LDL水平越高，肝损伤越重，血清ALT升高也越明显. ANIT升高ALP水平和降低血Trig，血糖水平是由于肝细胞器受损，肝细胞结构遭到破坏，致血中ALP增多和肝脏合成脂类和糖元功能出现异常[3].这一方面反映了肝损伤的程度，另一方面也可作为判断药效的指标.
4 参考文献
1 陶建华，卢立军，黄正明，杨新波，曹文斌，张志明. et al. 三种肝炎模型生化指标与病理形态的对比研究. 苏州医学院学报，1991；1(4)：281-283
2 黄正明，杨新波，曹文斌，张志明，张自强. 水瓜注射液抗肝炎的药理研究. 中药药理与临床，1990；6(10)：41-42
3 张其兰. 肝药灵防治实验性肝损伤作用研究. 中草药，1993；24(10)：535-537, 百拇医药(黄正明1 杨新波1 曹文斌1 郑鸣1 陈鸿雁1 张敬珍1 陶建华1 卢立军1 眭翔1 刘军2 刘琳2 黄英2)
2解放军军事医学科学院附属307医院检验科 北京市 100850
黄正明，男，1949-09-03生，河南省商丘市人，1994年军事医学科学院硕士毕业，副教授，主要从事抗肝炎药物等研究，发表论文35篇.
项目负责人 黄正明，100071，北京市，解放军北京医学高等专科学校药理教研室、病理教研室，北京市丰台东大街8号.
基金资助 九五军队重点科研基金资助项目A类课题，[1996]卫科训字第96号.*Project supported by the fund for 95 key army scientific researches.
, 百拇医药
Correspondence to Zheng-Ming Huang, Department of Pharmacology, Chinese PLA Beijing Medical College, 8 Fengtai Dongdajie, Beijing 100071, China
Tel. +86·10·66888129-3723
收稿日期 1997-05-03
Effects of CCl4, D-Gal and ANIT on serum biochemistry in mice with liver injury*
Zheng-Ming Huang1, Xin-Bo Yang1, Wen-Bin Cao1, Ming Zheng1, Hong-Yan Chen1, Jing-Zhen Zhang1,Jian-Hua Tao1,Li-Jun Lu1, Xiang Sui1, Jun Liu2, Lin Liu2 and Ying Huang2
, 百拇医药
1Department of Pharmacology, Chinese PLA Beijing Medical College, Beijing 100071, China
2Biochemical Laboratory of PLA 307 Hospital, Beijing 100039, China
Abstract
AIM To study the effects of three hepatic toxicants on serum biochemistry in mice with liver injury.
METHODS Liver injury models were induced by 1.5g/L CCl4 10mg/kg, ig, D-Gal 800mg/kg, ip, and ANIT 100mg/kg, ig, respectively. Kunming mice were divided into 2 groups (10 for each) for each model. The blood samples were taken by excising out eyeball at 24h (in CCl4 and D-Gal models) and 48h (in ANIT model) after poisoning. The blood biochemical examination was made using Automatic Biochemical Analyzer.
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RESULTS CCl4 and D-Gal ig increased the serum ALT, AST and LDP and the concentrations peaked at 24h after intoxication, while serum BiliT, Trig, Chol, Glu, ALP, GGT, TP and Alb were not affected. ANIT could significantly increase the levels of serum ALT, AST, BiliT, LDL, ALP and Chol at 48h after intoxication but decreased the serum TIC obviously and Glu slightly. The concentrations of GGL, Alb and TP were not affected.
CONCLUSION The altered serum biochemical indexes in the three models could be used to study the liver-protecting drugs, and ANIT induced model, in which LDL and Chol were increased, may be considered as a hypercholesterol model for studing the hypolipemic agents.
, http://www.100md.com
Subject headings carbon tetrachloride/toxicity; galactosamine/toxicity; 1-naphthylisothiocyanate/toxicity;
liver/drug effects; hepatitis, toxic/blood
Huang ZM, Yang XB, Cao WB, Zheng M, Chen HY, Zhang JZ, Tao JH, Lu LJ, Sui X, Liu J, Liu L, Huang Y. Effects of CCl4, D-Gal and ANIT on serum biochemistry in mice with liver injury. Huaren Xiaohua Zazhi, 1998;6(1):17-18
, 百拇医药
摘要
目的 观察3种常用的化学性肝毒剂对小鼠血清ALT，Trig, LDL等11项生化指标的影响.
方法 取小鼠20只，随机分为CCl4中毒组和NS对照组，每组10只. 中毒组小鼠1.5g/L CCl4，10mg/kg, ig，待中毒后24h，杀鼠取血，分离血清，由自动生化测定仪分别测定肝功能：ALT，AST，总胆红素(BiliT)；血脂：三酰甘油(Trig)、胆固醇(Chol)、低密度脂蛋白(LDL)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)；肝功能酶系：碱性磷酸酶(ALP)、转肽酶(GGT)和血糖(Glu)11项生化指标. NS对照组同时给NS，ig. D半乳糖胺(D-Gal)：中毒鼠800mg/kg，ip和a萘异硫氢酸酯(ANIT)：中毒鼠100mg/kg,ig，动物分组，观察指标同CCl4.
, http://www.100md.com 结果 CCl4，D-Gal均能明显升高小鼠血中的ALT，AST和LDL水平，分别于中毒后24h达高峰. 对BiliT,Trig, Chol, Glu, ALP, GGT,TP和Alb无明显影响.ANIT对小鼠中毒后48h，血中ALT，AST，BiliT,LDL,ALP和Chol水平明显升高，Trig明显降低，Glu略有下降；对GGT，Alb,TP无明显影响.
结论 这些生化指标的改变，可为保肝药物的研究提供多项客观的观察指标. LDL，Chol的水平升高，还可以作为高胆固醇模型来考虑降血脂药物的研究.
主题词 四氯化碳/毒性；半乳糖胺/毒性；异硫氰酸1萘酯/毒性；肝/药物作用；肝炎，中毒性/血液
黄正明, 杨新波, 曹文斌, 郑鸣, 陈鸿雁, 张敬珍, 陶建华, 卢立军, 眭翔, 刘军, 刘琳,黄英. CCl4，D-Gal，ANIT对化学性肝损伤小鼠血液生化指标的影响. 华人消化杂志, 1998;6(1):17-18
, http://www.100md.com
0 引言
为了全面了解CCl4，D-Gal和ANIT的毒性作用，以小白鼠为研究对象，观察了上述3种化学性肝毒剂对小鼠血液生化指标，即ALT，AST，BiliT，TriG， Chol，低密度脂蛋白(LDL)，GLu，TP，白蛋白(ALb)、碱性磷酸酶(ALP)、转肽酶(GGT)的影响，并结合肝病理观察结果综合分析，以便有目的的选择合适的药物模型和观察典型的生化指标提供依据. 现总结如下.
1 材料和方法
1.1 材料 ①动物：上海种小鼠，体重18g～22g，雌雄各半，由军事医学科学院动物中心提供. ②化学性肝毒剂：CCl4分析纯，由北京化工厂生产；D-Gal分析纯，由解放军防化院提供；ANIT分析纯，由解放军防化院提供. ③仪器：进口自动生化测定仪，型号Monarchplus，由美国实验分析仪器公司提供.
, http://www.100md.com
1.2 方法
1.2.1 CCl4 取小鼠20只，随机分为CCl4中毒组和NS对照组，每组10只. 中毒组小鼠1.5g/L CCl4，10mg/kg,ig，待中毒后24h(实验证明，此时为肝损伤严重期)，杀鼠取血，分离血清，由自动生化测定仪分别测定肝功能(ALT，AST，BiliT)、血脂(Trig, Chol, LDL, TP, Alb)、肝功能酶系(ALP，GGT)和血糖(Glu)，11项生化指标. NS对照组同时给予NS,ig.
1.2.2 D-Gal 动物分组，观察指标同CCl4. 中毒鼠800mg/kg,ip. 待中毒高峰(攻毒后24h)杀鼠取血，分别进行生化指标测定.
, 百拇医药
1.2.3 ANIT 动物分组，观察指标同CCl4. 中毒鼠ig，100mg/kg. 待中毒高峰(攻毒后48h)杀鼠取血，分别进行生化指标测定.
2 结果
2.1 化学肝毒剂对小鼠肝损伤血液生化指标的变化3种化学肝毒剂在小鼠中毒高峰期，对肝功能均有明显改变. 相比之下，ANIT升高ALT，BiliT更为显著(表1).
ANIT明显升高Chol，降低Trig，对血糖略有降低；CCl4有升高血糖作用，其他无明显变化；D-Gal对小鼠血脂和血糖无明显影响(表2). CCl4，D-Gal ，ANIT均显著升高LDL， 对ALP，除了ANIT明显升高外，CCl4，D-Gal也有一定升高；它们对GGT均有不同程度升高，对TP、Alb无明显影响(表2).
, http://www.100md.com
2.2 化学肝毒剂对小鼠肝损伤的病理 CCl4,D-Gal致小鼠肝损伤均于中毒后24h～48h肝细胞浊肿、空泡、嗜酸性变和脂肪性变严重，与血清ALT、AST升高结果一致. ANIT于小鼠中毒后48h～72h肝损伤明显. 肝细胞变性、坏死，小叶间胆管增生，胆管上皮细胞肿胀，部分坏死的上皮细胞脱落后阻塞胆管，导致血清AST、ALT、BiliT显著升高.
表1 化学肝毒剂对小鼠肝功能和血脂的影响 (n=10,x-±s)
| 毒剂名称 | 中毒高峰(h) | 中毒剂量(mg/kg) | ALT(IU/L) | AST(IU/L) | BiliT(μmol/L) | Trig(mmol/L) | Chol(mmol/L) |
| CCl4 | 24 | 10 | 431±151b | 482±112b | 6.7±2.3a | 1.42±0.50 | 2.40±0.46 |
| D-Gal | 24 | 800 | 273±210b | 236±184b | 6.0±3.3a | 1.25±0.67 | 2.00±0.60 |
| ANIT | 48 | 100 | 1247±342b | 2446±412b | 234.5±57.5a | 0.36±0.08b | 11.80±2.82b |
| NS | — | — | 48±9 | 131±16 | 3.3±1.4 | 1.10±0.40 | 2.70±0.10 |
, http://www.100md.com
aP<0.05，bP<0.01，vs NS.
表2 化学肝毒剂对小鼠肝酶、血糖和蛋白的影响 (n=10,x-±s)
| 毒剂名称 | 中毒高峰(h) | LDL(IU/L) | ALP(IU/L) | GGT(IU/L) | Glu(mmol/L) | TP(g/L) | Alb(g/L) |
| CCl4 | 24 | 2114±665b | 342±75 | 12.0±1.3 | 8.90±1.30 | 55.8±3.5 | 30.5±1.5 |
| D-Gal | 24 | 688±209a | 341±25 | 11.7±1.4 | 7.80±0.90 | 53.1±6.1 | 30.5±2.3 |
| ANIT | 48 | 1109±349b | 1525±518b | 13.3±1.7 | 6.50±2.00 | 57.5±1.9 | 28.2±4.7 |
| NS | — | 383±44 | 322±80 | 10.3±1.0 | 7.30±1.10 | 56.1±5.3 | 30.3±0.3 |
, http://www.100md.com
aP<0.05，bP<0.01，vs NS中毒剂量同表1.
3 讨论
对CCl4,D-Gal和ANIT致动物肝损伤，肝功能明显改变报道较多[1～3]，而对其他生化指标，肝内酶生成的影响报道甚少. 结果表明，它们不仅能改变动物的肝功能，使ALT，AST和BiliT明显升高，而且对其他生化指标也有不同程度的影响. 如它们均明显升高低密度脂蛋白(LDL)；ANIT升高 ALP和Chol，降低Trig和血糖水平等. 这些生化指标的改变，可为保肝药物的研究提供多项客观的观察指标.
实验结果还提示，ANIT除了作为退黄降酶药物研究的模型外，还可以作为高胆固醇模型来考虑降血脂药物的研究. CCl4, D-Gal， ANIT升高 LDL 水平也可以作为判断肝损伤严重程度的客观标准. LDL水平越高，肝损伤越重，血清ALT升高也越明显. ANIT升高ALP水平和降低血Trig，血糖水平是由于肝细胞器受损，肝细胞结构遭到破坏，致血中ALP增多和肝脏合成脂类和糖元功能出现异常[3].这一方面反映了肝损伤的程度，另一方面也可作为判断药效的指标.
4 参考文献
1 陶建华，卢立军，黄正明，杨新波，曹文斌，张志明. et al. 三种肝炎模型生化指标与病理形态的对比研究. 苏州医学院学报，1991；1(4)：281-283
2 黄正明，杨新波，曹文斌，张志明，张自强. 水瓜注射液抗肝炎的药理研究. 中药药理与临床，1990；6(10)：41-42
3 张其兰. 肝药灵防治实验性肝损伤作用研究. 中草药，1993；24(10)：535-537, 百拇医药(黄正明1 杨新波1 曹文斌1 郑鸣1 陈鸿雁1 张敬珍1 陶建华1 卢立军1 眭翔1 刘军2 刘琳2 黄英2)