大鼠实验性肝硬变腹水形成与TNFα的关系
1山西医科大学第二医院内科 山西省太原市 030001
2山西中医学院机能教研室 030024 3山西医科大学肝病研究所
郜玉珍，女，1954-08-10生，山西省临汾市人，汉族. 1989年沈阳中国医科大学毕业，讲师，主要从事消化系统疾病研究，发表论文12篇.
项目负责人 郜玉珍,山西医科大学第二医院内科 山西省太原市 030001 Correspondence to Dr. Yu-Zhen Gao, Department of Internal Medicine, Second Hospital of Shanxi Medical University, 219 Wuyilu, Taiyuan 030001, Shanxi Province, China
, 百拇医药
Tel. +86·351·3074231-2536
收稿日期 1997-05-28 接收日期 1997-09-03
Relationship between ascites formation and TNFα in experimental rat liver cirrhosis
Yu-Zhen Gao1,Xiao-Fang Wu2, Jin-Ping Yan2, Xi-Run Wu1, Jin-Bin Jia3 and De-Wu Han3
Department of Internal Medicine, Second Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, Shanxi Province, China
, 百拇医药
Abstract
AIM To investigate the relationship between TNFα and ascites of liver cirrhotic rats.
METHODS TNFα and endotoxin in the aorta plasma were detected in experimental liver cirrhotic rats (n=12) and cirrhotic rats with ascites group (n=8). And the quantities of ascites in the cirrhotic rats with ascites were also determined.
, http://www.100md.com
RESULTS Both of cirrhosis group and group of cirrhosis with ascites had increased TNFα and endotoxin. There was a positive correlation between TNFα and endotoxin (r=0.75， P<0.05) in the cirrhosis ascites group, and a positive correlation between TNFα and quantities of ascites (r=0.86，P<0.05).
CONCLUSION Ascites formation in cirrhotic rats is correlated with increased TNFα induced by intestinal endotoxemia.
, 百拇医药
Subject headings liver cirrhosis,experimental/complications; ascites/etiology; tumor necrosis factor/analysis; endotoxemia
Gao YZ, Wu XF, Yan JP, Wu XR, Jia JB, Han DW. Relationship between ascites formation and TNFα in experimental rat liver cirrhosis.Huaren Xiaohua Zazhi, 1998;6(2):136-137
摘要
目的 研究大鼠实验性肝硬变晚期腹水形成与TNFα及肠源性内毒素血症的关系，探讨肝硬变腹水形成的机制.
, 百拇医药
方法 以大鼠为实验对象，分为正常对照组(n=8)、肝硬变对照组(n=12)和肝硬变伴腹水组(n=18).实验组采用复合因子复制肝硬变动物模型. 各组均测定腹主动脉血中TNFα和内毒素水平，肝硬变组还测定了腹水量.
结果 随着肝硬变形成，大鼠血中TNFα水平(μg/L)增高，各组含量分别为90.8±10.7和95.8±12.8(肝硬变组和肝硬变伴腹水组). 相关分析表明肝硬变组腹水量与血中TNFα成正相关(r=0.86，P<0.05，内毒素水平增高，并与TNFα的浓度成正相关(r=0.75，P<0.05).
结论 肝硬变腹水形成与血中TNFα升高相关，而TNFα的升高则源于肠源性内毒素血症的形成.
主题词 肝硬变，实验性/并发症；腹水/病因学；肿瘤坏死因子/分析；内毒素血症
, http://www.100md.com
郜玉珍, 吴筱芳, 闫晋平, 武希润, 贾晋斌, 韩德五.大鼠实验性肝硬变腹水形成与TNFα的关系.华人消化杂志,1998;6(2):136-137
0 引言
肝硬变失代偿出现腹水的机制一方面是由于血液动力学的改变，另一方面则是和某些体液因素相关. 传统的观点认为体液因素主要是抗利尿激素和醛固酮的调制异常. 随着对细胞间信息传递研究的逐渐深入，一些细胞因子作为血管活性物质参与组织液的生成和回流，其作用已日益受到重视. 我们通过大鼠肝硬变动物模型，研究了腹水量与TNFα的关系，同时测定了血浆内毒素水平，以探讨腹水形成的确切机制.
1 材料和方法
1.1 材料 Wistar雄性大鼠38只，体重230g～260g，山西医科大学实验动物中心提供. 分为正常对照组(n=8)，肝硬变组(n=12)和肝硬变伴腹水组(n=18).
, http://www.100md.com
1.2 方法 正常对照组大鼠不作任何处理，实验组大鼠复制出肝硬变模型[1]，于第9周末杀检取材. 各组动物分别于乙醚麻醉下，无菌开腹取腹主动脉血分别以ELISA法测TNFα(北京邦定生物医学公司试剂盒)，以鲎试剂基质法测定内毒素(鲎试剂盒由上海临床检验中心提供). 肝硬变动物有腹水者(n=18)取血后收集腹腔液体，量其体积. 取肝左叶，石蜡切片，HE染色，光镜观察. 资料分析采用方差分析和相关分析.
2 结果
肝硬变与肝硬变伴腹水组血浆TNFα与内毒素水平均较正常组显著升高，且两者之间存在相关关系(肝硬变对照组：r=0.69，P<0.05；肝硬变伴腹水组：r=0.75，P<0.05). 肝硬变与肝硬变伴腹水组血浆TNFα和内毒素水平无显著性差异，但后者较前者有增高趋势(表1). 肝硬变腹水组腹水量平均为2.76ml±0.81ml，与血中TNFα的含量呈正相关(r=0.86，P<0.05). 肉眼观察肝硬变肝脏体积缩小，表面呈细颗粒状，质硬. 石蜡切片光镜下观察显示肝组织中纤维增生包绕肝细胞团形成假小叶，肝细胞有不同程度的胞浆疏松化和腊肪变性存在.
, 百拇医药
表1 肝硬变大鼠TNFα和内毒素水平 (μg/L)
aP<0.05，vs 正常组.
, http://www.100md.com
3 讨论
肝脏发生急慢性损害与肠源性内毒素血症密切相关[2]，大鼠实验性肝硬变进程中内毒素血症起有关键作用已由贾晋斌 et al[3]实验证实.内毒素参与肝硬变发生发展机制，一方面在于其直接作用导致肝细胞损害和枯否细胞功能低下，另一方面在于内毒素诱生包括TNFα在内的大量细胞因子的产生，参与肝脏诸多病理过程[4，5]. 在我们的实验中肝硬变和肝硬变伴腹水动物均有内毒素和TNFα的显著增高，且二者间存在相关性. 虽然两组动物间血浆内毒素和TNFα并无差异，但肝硬变伴腹水组两种指标均较单纯肝硬变组有增高趋势. 肝硬变伴腹水组其腹水量也与TNFα浓度相关. 说明腹水的形成与TNFα升高有关. 内毒素与TNFα协同作用可直接引起血管内皮细胞发生变化，从而导致微循环功能障碍[6]， 肝硬变失代偿时，逐渐加重的肠源性内毒素血症会进一步诱发肾功能衰竭[7]，这些都是最终引起腹水出现与加重的因素. 内毒素与TNFα的协同作用也是体内NO、PAF产生的诱发者[8]，而这一细胞因子的级联反应正是影响门静脉系统微循环改变的重要因素，也是肝硬变时产生腹水的原因.
, 百拇医药
4 参考文献
1 韩德五，马学惠，赵元昌. 肝硬变动物模型的研究. 山西医药杂志，1979；4(1)：1-5
2 Nolan JP. The role of endotoxin in liver injury. Gastroenterology, 1975;69(3):1346-1356
3 Jia JB, Han DW, Xu RL, Zhao YC, Yan JP, Ma XH et al. Role of gutderived endotoxemia in the mechanism of hepatic fibrosis
involved with TNFα. Proceedings of Ⅲ International Conference of Gastroenterology. Shanghai, 1996-11-27:L1-L2
, http://www.100md.com
4 Andus T, Baner J, Gerok G. Effects of cytokines on the liver. Hepatology, 1991;13(2):364-375
5 Herbert T, Axel W, Wolfgong V. Serum levels of cytokines in chronic liver diseases. Gastroenterology, 1992;103(1):264-274
6 Noiri E, Kuwata S, Nosaka K, Onishi S, Enzan H, Saibara T et al. Tumour necrosis factor-α mRNA expression in
lipopolysaccharide stimulated rat kidney. Am J Pathol, 1994;144(6):1159-1166
7 韩德五. 肝肾综合征. 见：王迪浔主编. 病理生理学. 第1版. 北京：人民卫生出版社，1994：666-667
8 Stark NE, Szusszewski JH. Role of nitric oxide in gastrointestinal and hepatic function and disease.
Gastroenterology, 1992;103(4):1928-1937, 百拇医药(郜玉珍1 吴筱芳2 闫晋平2 武希润1 贾晋斌3 韩德五3)
2山西中医学院机能教研室 030024 3山西医科大学肝病研究所
郜玉珍，女，1954-08-10生，山西省临汾市人，汉族. 1989年沈阳中国医科大学毕业，讲师，主要从事消化系统疾病研究，发表论文12篇.
项目负责人 郜玉珍,山西医科大学第二医院内科 山西省太原市 030001 Correspondence to Dr. Yu-Zhen Gao, Department of Internal Medicine, Second Hospital of Shanxi Medical University, 219 Wuyilu, Taiyuan 030001, Shanxi Province, China
, 百拇医药
Tel. +86·351·3074231-2536
收稿日期 1997-05-28 接收日期 1997-09-03
Relationship between ascites formation and TNFα in experimental rat liver cirrhosis
Yu-Zhen Gao1,Xiao-Fang Wu2, Jin-Ping Yan2, Xi-Run Wu1, Jin-Bin Jia3 and De-Wu Han3
Department of Internal Medicine, Second Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, Shanxi Province, China
, 百拇医药
Abstract
AIM To investigate the relationship between TNFα and ascites of liver cirrhotic rats.
METHODS TNFα and endotoxin in the aorta plasma were detected in experimental liver cirrhotic rats (n=12) and cirrhotic rats with ascites group (n=8). And the quantities of ascites in the cirrhotic rats with ascites were also determined.
, http://www.100md.com
RESULTS Both of cirrhosis group and group of cirrhosis with ascites had increased TNFα and endotoxin. There was a positive correlation between TNFα and endotoxin (r=0.75， P<0.05) in the cirrhosis ascites group, and a positive correlation between TNFα and quantities of ascites (r=0.86，P<0.05).
CONCLUSION Ascites formation in cirrhotic rats is correlated with increased TNFα induced by intestinal endotoxemia.
, 百拇医药
Subject headings liver cirrhosis,experimental/complications; ascites/etiology; tumor necrosis factor/analysis; endotoxemia
Gao YZ, Wu XF, Yan JP, Wu XR, Jia JB, Han DW. Relationship between ascites formation and TNFα in experimental rat liver cirrhosis.Huaren Xiaohua Zazhi, 1998;6(2):136-137
摘要
目的 研究大鼠实验性肝硬变晚期腹水形成与TNFα及肠源性内毒素血症的关系，探讨肝硬变腹水形成的机制.
, 百拇医药
方法 以大鼠为实验对象，分为正常对照组(n=8)、肝硬变对照组(n=12)和肝硬变伴腹水组(n=18).实验组采用复合因子复制肝硬变动物模型. 各组均测定腹主动脉血中TNFα和内毒素水平，肝硬变组还测定了腹水量.
结果 随着肝硬变形成，大鼠血中TNFα水平(μg/L)增高，各组含量分别为90.8±10.7和95.8±12.8(肝硬变组和肝硬变伴腹水组). 相关分析表明肝硬变组腹水量与血中TNFα成正相关(r=0.86，P<0.05，内毒素水平增高，并与TNFα的浓度成正相关(r=0.75，P<0.05).
结论 肝硬变腹水形成与血中TNFα升高相关，而TNFα的升高则源于肠源性内毒素血症的形成.
主题词 肝硬变，实验性/并发症；腹水/病因学；肿瘤坏死因子/分析；内毒素血症
, http://www.100md.com
郜玉珍, 吴筱芳, 闫晋平, 武希润, 贾晋斌, 韩德五.大鼠实验性肝硬变腹水形成与TNFα的关系.华人消化杂志,1998;6(2):136-137
0 引言
肝硬变失代偿出现腹水的机制一方面是由于血液动力学的改变，另一方面则是和某些体液因素相关. 传统的观点认为体液因素主要是抗利尿激素和醛固酮的调制异常. 随着对细胞间信息传递研究的逐渐深入，一些细胞因子作为血管活性物质参与组织液的生成和回流，其作用已日益受到重视. 我们通过大鼠肝硬变动物模型，研究了腹水量与TNFα的关系，同时测定了血浆内毒素水平，以探讨腹水形成的确切机制.
1 材料和方法
1.1 材料 Wistar雄性大鼠38只，体重230g～260g，山西医科大学实验动物中心提供. 分为正常对照组(n=8)，肝硬变组(n=12)和肝硬变伴腹水组(n=18).
, http://www.100md.com
1.2 方法 正常对照组大鼠不作任何处理，实验组大鼠复制出肝硬变模型[1]，于第9周末杀检取材. 各组动物分别于乙醚麻醉下，无菌开腹取腹主动脉血分别以ELISA法测TNFα(北京邦定生物医学公司试剂盒)，以鲎试剂基质法测定内毒素(鲎试剂盒由上海临床检验中心提供). 肝硬变动物有腹水者(n=18)取血后收集腹腔液体，量其体积. 取肝左叶，石蜡切片，HE染色，光镜观察. 资料分析采用方差分析和相关分析.
2 结果
肝硬变与肝硬变伴腹水组血浆TNFα与内毒素水平均较正常组显著升高，且两者之间存在相关关系(肝硬变对照组：r=0.69，P<0.05；肝硬变伴腹水组：r=0.75，P<0.05). 肝硬变与肝硬变伴腹水组血浆TNFα和内毒素水平无显著性差异，但后者较前者有增高趋势(表1). 肝硬变腹水组腹水量平均为2.76ml±0.81ml，与血中TNFα的含量呈正相关(r=0.86，P<0.05). 肉眼观察肝硬变肝脏体积缩小，表面呈细颗粒状，质硬. 石蜡切片光镜下观察显示肝组织中纤维增生包绕肝细胞团形成假小叶，肝细胞有不同程度的胞浆疏松化和腊肪变性存在.
, 百拇医药
表1 肝硬变大鼠TNFα和内毒素水平 (μg/L)
| 组别 | n | TNFα | 内毒素 |
| 正常对照 | 8 | 29.3±2.1 | 81.26±7.3 |
| 肝硬变 | 12 | 90.8±10.7a | 180.17±30.7a |
| 肝硬变伴腹水 | 18 | 95.8±12.8a | 199.52±35.1a |
aP<0.05，vs 正常组.
, http://www.100md.com
3 讨论
肝脏发生急慢性损害与肠源性内毒素血症密切相关[2]，大鼠实验性肝硬变进程中内毒素血症起有关键作用已由贾晋斌 et al[3]实验证实.内毒素参与肝硬变发生发展机制，一方面在于其直接作用导致肝细胞损害和枯否细胞功能低下，另一方面在于内毒素诱生包括TNFα在内的大量细胞因子的产生，参与肝脏诸多病理过程[4，5]. 在我们的实验中肝硬变和肝硬变伴腹水动物均有内毒素和TNFα的显著增高，且二者间存在相关性. 虽然两组动物间血浆内毒素和TNFα并无差异，但肝硬变伴腹水组两种指标均较单纯肝硬变组有增高趋势. 肝硬变伴腹水组其腹水量也与TNFα浓度相关. 说明腹水的形成与TNFα升高有关. 内毒素与TNFα协同作用可直接引起血管内皮细胞发生变化，从而导致微循环功能障碍[6]， 肝硬变失代偿时，逐渐加重的肠源性内毒素血症会进一步诱发肾功能衰竭[7]，这些都是最终引起腹水出现与加重的因素. 内毒素与TNFα的协同作用也是体内NO、PAF产生的诱发者[8]，而这一细胞因子的级联反应正是影响门静脉系统微循环改变的重要因素，也是肝硬变时产生腹水的原因.
, 百拇医药
4 参考文献
1 韩德五，马学惠，赵元昌. 肝硬变动物模型的研究. 山西医药杂志，1979；4(1)：1-5
2 Nolan JP. The role of endotoxin in liver injury. Gastroenterology, 1975;69(3):1346-1356
3 Jia JB, Han DW, Xu RL, Zhao YC, Yan JP, Ma XH et al. Role of gutderived endotoxemia in the mechanism of hepatic fibrosis
involved with TNFα. Proceedings of Ⅲ International Conference of Gastroenterology. Shanghai, 1996-11-27:L1-L2
, http://www.100md.com
4 Andus T, Baner J, Gerok G. Effects of cytokines on the liver. Hepatology, 1991;13(2):364-375
5 Herbert T, Axel W, Wolfgong V. Serum levels of cytokines in chronic liver diseases. Gastroenterology, 1992;103(1):264-274
6 Noiri E, Kuwata S, Nosaka K, Onishi S, Enzan H, Saibara T et al. Tumour necrosis factor-α mRNA expression in
lipopolysaccharide stimulated rat kidney. Am J Pathol, 1994;144(6):1159-1166
7 韩德五. 肝肾综合征. 见：王迪浔主编. 病理生理学. 第1版. 北京：人民卫生出版社，1994：666-667
8 Stark NE, Szusszewski JH. Role of nitric oxide in gastrointestinal and hepatic function and disease.
Gastroenterology, 1992;103(4):1928-1937, 百拇医药(郜玉珍1 吴筱芳2 闫晋平2 武希润1 贾晋斌3 韩德五3)