层粘蛋白在人原发性肝细胞癌转移中的意义
1同济医科大学实验医学研究中心超微病理研究室 湖北省武汉市 430030武汉市职工医学院附属医院
2内科 3核医学科 430015
郑世曦，男，1967-03-28生，湖北省武汉市人，汉族. 1990年同济医科大学临床医学专业毕业，医学博士，主要从事肝癌的实验与临床基础研究，发表中英文论文12篇.
项目负责人 郑世曦，200031，现在中国科学院上海药物研究所药理一室，上海市太原路294号.
Correspondence to Dr. Shi-Xi Zheng, Department of Pharmacology, Shanghai Institute of Materia Medica, Chinese Academy of Sciences, 294 Taiyuan Road, Shanghai 200031, China
Tel. +86·21·64311833-309， E-mail. sxzheng@server. shcnc.ac.cn
收稿日期 1998-04-09
The significance of laminin in the metastasis of hepatocellular carcinoma
Shi-Xi Zheng1, Han-Qin Chen2, Jun Yang3,You-Bing Ruan1 and Zhong-Bi Wu1
1Department of Ultrastructural Pathology, Research Center of Experimental Medicine, Tongji Medical University, Wuhan 430030, Hubei Province, China2Department of Internal Medicine, and
3 Department of Nuclear Medicine, Wuhan Postgraduate Medical College, Wuhan 430015, Hubei Province, China
Abstract
AIM To understand the significance of laminin (LN) in the metastatic potential of hepatocellular carcinoma (HCC).
METHODS Radioimmunoassay (RIA) and immunohistochemistry as well as morphometry were used to determine the amount of LN in serum and tissues of patients with and without metastasis of HCC. Linear correlation was carried out between them.
RESULTS Serum LN level in patients of HCC with metastasis were much higher than that without metastasis (μg/L, 178±32 vs 140±23, P<0.01). Morphometrically, the average A (OD) value of LN in tissues of the former were much lower than that of the latter (0.17±0.06 vs 0.26±0.05，P<0.01). There was a strong negative correlation between the amount of LN in the serum and that in the tissue. Immunohitochemically, LN lied not noly in the stroma, but also in the cytoplasm of tumor cells. LN also maintained a sinusoidal-like pattern, especially in tissues with metastass.
CONCLUSION LN plays double roles in the course of metastasis of HCC. Elevation of serum LN would be a simple and valuable screening test in predicting the metastatic potential of HCC.
Subject headings carcinoma, hepatocellular/pathology; laminin/analysis; neoplasms metastasis/diagnosis; radioimmunoassay
Zheng SX, Chen HQ, Yang J, Ruan YB, Wu ZB. The significance of laminin in the metastasis of hepatocellular carcinoma.
Huaren Xiaohua Zazhi,1998;6(6):507-509
摘要
目的 了解层粘蛋白(LN)在原发性肝细胞癌(HCC)转移中的作用和价值.
方法 应用放射免疫分析法(RIA)、免疫组化和图象分析分别对12例HCC有转移者和12例HCC无转移者血清和癌组织中LN进行测定，并进行相关分析.
结果 HCC有转移组患者血清中LN含量(μg/L)178±32，显著高于HCC无转移组140±23(P<0.01). HCC有转移组患者组织中LN平均A (OD值)为0.17±0.06，显著低于HCC无转移组0.26±0.05(P<0.01). 组织中LN与血清LN含量成明显的负相关关系. 免疫组化结果显示，LN不仅存在于间质中，还存在于癌细胞中；LN亦可排列成窦状，尤以HCC转移者组织中为明显.
结论 LN在HCC转移过程中具有双重作用，血清LN含量升高可作为衡量HCC转移的一个简便而有用的指标.
主题词 癌，肝细胞/病理学；层粘连蛋白/分析；肿瘤转移/诊断；放射免疫测定
郑世曦, 陈汉琴, 杨军, 阮幼冰, 武忠弼.层粘蛋白在人原发性肝细胞癌转移中的意义.华人消化杂志,1998;6(6):507-509
0 引言
肿瘤细胞与基膜的相互作用在肿瘤转移的过程中起着关键作用[1]. 层粘蛋白(laminin，LN)是基膜的重要成分之一，它对肿瘤细胞的生长分化、粘附和移动具有重要作用[2]. 我们应用放射免疫分析法(RIA)、免疫组化和形态测量等手段对人原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)患者血清及癌组织中LN的变化进行了研究，以探讨其在HCC转移中的意义和价值.
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 组织标本 男性HCC患者24例，年龄35岁～60岁，其中12例患者经影像学检查发现有肝外脏器转移和(或)经病理检查发现门静脉癌栓或肝门淋巴结内有癌细胞；另外12例无转移. 癌组织手术标本经40mL/L多聚甲醛固定6h，常规石蜡包埋.
1.1.2 血清标本 收集上述患者血清供检. 另收集14例健康体检者血清作正常对照. 所有血清标本均清晨空腹静脉采血，分离出血清后置-20℃保存.
1.2 方法
1.2.1 血清LN含量检测 采用放射免疫分析法(RIA)测定血清中LN的含量. LN RIA试剂盒购于上海海军医学研究所生物技术中心，操作按说明书进行. 为减少误差，每例标本均在同批实验中作双管测定. 标准曲线按logit-log回归并计算出样品结果.
1.2.2 组织LN免疫组化染色 石蜡切片经4g/L胃蛋白酶(含0.01mol/L盐酸)37℃消化1.5h，按常规SABC法进行. 抗LN兔抗人抗体系Sigma公司产品，工作浓度为1∶350，SABC试剂盒购于武汉博士德生物工程公司. 在200倍视野下，随机选择未经复染核的切片上中下左右5个视野，经TJTY-300型图象分析仪测定其平均吸光度A(OD值)，即作为组织中LN含量. 经复染核后的切片作形态学观察.
统计学处理 血清及组织中LN含量以均数±标准差表示. 显著检验应用样本均数的t检验，两者间相关性分析应用直线相关分析法.
2 结果
2.1 血清及组织LN HCC转移组血清中LN含量显著高于未转移组和正常对照组；HCC转移组肝组织LN平均吸光度却显著低于未转移组. 表1示血清及组织中LN含量的测定结果.
表1 血清LN含量及组织LN平均吸光度
aP<0.05，bP<0.01，vs control; dP<0.01，vs group without metastasis.
2.2 血清与组织LN含量的相关性 两者呈明显负相关关系；HCC未转移组的相关系数为r=-0.8427，P<0.0005；HCC转移组的相关系数为r=-0.7482，0.0025
图1 血清LN含量与组织LN A值的相关性.
2.3 LN免疫组化 LN主要分布于高、中度分化的癌结节内及癌结节间且排列紊乱，未分化的癌结节中无LN阳性反应(图2)；部分有转移的癌细胞胞质内尚可见阳性反应(图3)；另外，还可见LN排列成类窦样结构(图4)，以HCC有转移组最为明显.
图2 LN免疫组化染色(SABC法 ×100) 示未分化组织内多无LN.
图3 LN免疫组化染色(SABC法 ×200) 阳性颗粒分布于胞质内.
图4 LN免疫组化染色(SABC法 ×100) 示LN排列成窦状结构.
3 讨论
1979年，Timpl et al[2]从鼠Engkebreth-Holm-Swarm(EHS)肉瘤中分离出了一种非胶原成分——层粘蛋白(LN). 随后的研究表明，LN主要由基膜中的上皮细胞和内皮细胞合成，以不溶的形式广泛分布于正常组织的脉管基膜透明层中，并与Ⅳ型胶原相结合构成基膜的骨架成分. 所以，人们很容易将其与肿瘤的侵袭和转移联系起来. 早先的研究表明，癌组织基膜中LN减少及排列紊乱是肿瘤转移的基础[1]. Forster et al[3]研究了直肠癌组织中LN的变化，认为LN染色阴性的患者多有远处转移，5a存活率低. 我们对HCC癌组织中LN形态测量的研究表明，HCC转移组织中LN表达较未转移组少，两者具有显著性差异，提示LN减少导致基膜不完整，使肿瘤细胞侵袭转移过程中的屏障削弱，确实为肿瘤转移提供了可能性. 肿瘤组织中的这种变化主要是由于Ⅳ型胶原酶的合成增加，导致Ⅳ型胶原水解[4]，组织中LN随着基膜的崩解而减少.
但是，这种变化并不意味着组织中LN的合成减少. 我们发现部分癌细胞胞质中存在LN染色，由于此时无肝窦结构，所以LN系由肿瘤细胞合成[4，5]. 癌细胞的这种合成LN的能力可能在侵袭和转移过程中具有意义. Malignoff et al[6]发现小鼠纤维肉瘤细胞表面LN的表达使其转移潜能大大增加. Fridman et al[7]将LN与瘤细胞一起培养时发现肿瘤细胞表现出明显的过度增生现象. Bankhoff et al[8]的研究发现前列腺癌转移的组织，如淋巴结、骨、肺、和肝组织中LN呈强阳性表达. 所以，我们认为，LN在肿瘤转移过程中具有双重作用：当LN与Ⅳ型胶原构成基膜时，它可作为屏障阻止肿瘤细胞的转移，而在肿瘤细胞穿越基膜后则可介导其运动，促进转移的形成.另外，我们还发现，HCC组织特别是有转移的组织中LN可排列成窦状结构，与文献报道一致[5]，此系肿瘤组织中新生毛细血管网络的基膜成分. 组织中的LN除能够参与构成基膜外，还能对内皮细胞有趋化作用，并促进其分化[9]. 它还能刺激细胞分泌血管生长因子促进肿瘤血管的生成[10]，这些作用均能促进肿瘤细胞发生转移. 由于LN在肿瘤转移中的重要作用，人们试图寻求将其作为肿瘤转移的标志物. 基质的降解以及肿瘤细胞合成LN均可导致机体LN水平增高，所以检测血清LN的含量有助于了解机体的LN水平. Brocks et al[11]对肿瘤患者血清LN的检测表明，半数以上患者的血清LN浓度明显高于正常值. Yudoh et al[12]对骨及软组织肿瘤患者血清LN水平进行的研究表明，血清LN含量升高与肿瘤的转移密切相关，特别是部分患者的组织中在镜下还不能找到转移灶时，其血清LN已有升高，所以作者认为血清LN是早期诊断肿瘤转移的指标之一. 我们对HCC癌组织LN和血清LN进行了研究，转移组患者血清LN明显升高而组织中LN明显降低，且两者呈明显的负相关关系，由此我们认为血清LN升高是衡量HCC转移的简便而有用指标.
4 参考文献
1 Liotta LA. Tumor invasion and metastasis: role of the extracellular matric: Rhoads Meorial Award Lecture. Cancer Res, 1986;46(1):1-7
2 Timpl R, Rhode H, Robey PG, Rennard SI, Foidart JM, Martin GR. Laminin—a glycoprotein from basement membrances.
J Biol Chem, 1979;254(19):9933-9937
3 Forster SJ, Talbot IC, Critchley DR. Laminin and fibronectin in rectal adenocarcinoma: relationship to tumor grade,stage and metastasis. Br J Cancer, 1984;50(1):51-61
4 Ura H, Bonfil RD, Reich R, Reddel R, Pferfer A, Harris CC, Klein Szanto AJ. Expression of type Ⅳ collagenase and procollagen genes
and its correlation with the tumorigenic, invasive, bronchial cells. Cancer Res, 1989;49(16):4615-4621
5 Grigioni WF, Garbisa S, D＇Errico A, Baccarini P, StetlerStevenson WG, Liotta LA, Mancini AM. Evalution of hepatocellular
carcinoma aggressiveness by apanel of extracellular matrix antigens. Am J Pathol, 1991;138(3):647-654
6 Malinoff HL, McCoy JP Jr., Varani J, Wicha MS. Metastatic potential of murine fibrosarcoma cells is influenced by cell surface laminin.
Int J Cancer, 1984;33(5):651-655
7 Fridman R, Kibbey MC, Royce LS, Zain M, Sweeney M, Jicha DL et al. Enhanced tumor growth of both primary and established
human and murine tumor cells in athymic mice after coinjection with Matrigel. J Natl Cancer Inst, 1991;82(11):769-774
8 Bankhoff H, Wermert N, Dhom G, Remberger K. Distribution of basement membrances in primary and metastatic carcinomas of
the prostate. Hum Pathol, 1992;23(8):934-939
9 Kramer RH, Cheng YF, Clyman R. Human microvascular endothelial cells use β1 and β3 integrin receptor complexes to attach
to laminin. J Cell Biol, 1990;111(3):1233-1243
10 Bonfil RD, Vinyals A, Bustuoabad OD, Llorens A, Benavides FJ, Gonzalez Garrigues M et al. Stimulation of angiogenesis as an
explanation of Matrigel enhanced tumorigenicity. Int J Cancer, 1994;58(2):233-239
11 Brocks DG, Strecker H, Neubauer HP. Radioimmunoassay of laminin in serum and its application to cancer patients.
Clin Chem, 1986;32(3):787-789
12 Yudoh K, Matsui H, Kanamori M, Ohmori K, Tsuji H, Tatezaki S. Serum levels of laminin, type Ⅳ collagen and type Ⅲ
procollagen peptide as markers for detection of metastasis. Jpn J Cancer, 1994;85(12):1263-1269, 百拇医药(郑世曦1 陈汉琴2 杨军3 阮幼冰1 武忠弼1)
2内科 3核医学科 430015
郑世曦，男，1967-03-28生，湖北省武汉市人，汉族. 1990年同济医科大学临床医学专业毕业，医学博士，主要从事肝癌的实验与临床基础研究，发表中英文论文12篇.
项目负责人 郑世曦，200031，现在中国科学院上海药物研究所药理一室，上海市太原路294号.
Correspondence to Dr. Shi-Xi Zheng, Department of Pharmacology, Shanghai Institute of Materia Medica, Chinese Academy of Sciences, 294 Taiyuan Road, Shanghai 200031, China
Tel. +86·21·64311833-309， E-mail. sxzheng@server. shcnc.ac.cn
收稿日期 1998-04-09
The significance of laminin in the metastasis of hepatocellular carcinoma
Shi-Xi Zheng1, Han-Qin Chen2, Jun Yang3,You-Bing Ruan1 and Zhong-Bi Wu1
1Department of Ultrastructural Pathology, Research Center of Experimental Medicine, Tongji Medical University, Wuhan 430030, Hubei Province, China2Department of Internal Medicine, and
3 Department of Nuclear Medicine, Wuhan Postgraduate Medical College, Wuhan 430015, Hubei Province, China
Abstract
AIM To understand the significance of laminin (LN) in the metastatic potential of hepatocellular carcinoma (HCC).
METHODS Radioimmunoassay (RIA) and immunohistochemistry as well as morphometry were used to determine the amount of LN in serum and tissues of patients with and without metastasis of HCC. Linear correlation was carried out between them.
RESULTS Serum LN level in patients of HCC with metastasis were much higher than that without metastasis (μg/L, 178±32 vs 140±23, P<0.01). Morphometrically, the average A (OD) value of LN in tissues of the former were much lower than that of the latter (0.17±0.06 vs 0.26±0.05，P<0.01). There was a strong negative correlation between the amount of LN in the serum and that in the tissue. Immunohitochemically, LN lied not noly in the stroma, but also in the cytoplasm of tumor cells. LN also maintained a sinusoidal-like pattern, especially in tissues with metastass.
CONCLUSION LN plays double roles in the course of metastasis of HCC. Elevation of serum LN would be a simple and valuable screening test in predicting the metastatic potential of HCC.
Subject headings carcinoma, hepatocellular/pathology; laminin/analysis; neoplasms metastasis/diagnosis; radioimmunoassay
Zheng SX, Chen HQ, Yang J, Ruan YB, Wu ZB. The significance of laminin in the metastasis of hepatocellular carcinoma.
Huaren Xiaohua Zazhi,1998;6(6):507-509
摘要
目的 了解层粘蛋白(LN)在原发性肝细胞癌(HCC)转移中的作用和价值.
方法 应用放射免疫分析法(RIA)、免疫组化和图象分析分别对12例HCC有转移者和12例HCC无转移者血清和癌组织中LN进行测定，并进行相关分析.
结果 HCC有转移组患者血清中LN含量(μg/L)178±32，显著高于HCC无转移组140±23(P<0.01). HCC有转移组患者组织中LN平均A (OD值)为0.17±0.06，显著低于HCC无转移组0.26±0.05(P<0.01). 组织中LN与血清LN含量成明显的负相关关系. 免疫组化结果显示，LN不仅存在于间质中，还存在于癌细胞中；LN亦可排列成窦状，尤以HCC转移者组织中为明显.
结论 LN在HCC转移过程中具有双重作用，血清LN含量升高可作为衡量HCC转移的一个简便而有用的指标.
主题词 癌，肝细胞/病理学；层粘连蛋白/分析；肿瘤转移/诊断；放射免疫测定
郑世曦, 陈汉琴, 杨军, 阮幼冰, 武忠弼.层粘蛋白在人原发性肝细胞癌转移中的意义.华人消化杂志,1998;6(6):507-509
0 引言
肿瘤细胞与基膜的相互作用在肿瘤转移的过程中起着关键作用[1]. 层粘蛋白(laminin，LN)是基膜的重要成分之一，它对肿瘤细胞的生长分化、粘附和移动具有重要作用[2]. 我们应用放射免疫分析法(RIA)、免疫组化和形态测量等手段对人原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)患者血清及癌组织中LN的变化进行了研究，以探讨其在HCC转移中的意义和价值.
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 组织标本 男性HCC患者24例，年龄35岁～60岁，其中12例患者经影像学检查发现有肝外脏器转移和(或)经病理检查发现门静脉癌栓或肝门淋巴结内有癌细胞；另外12例无转移. 癌组织手术标本经40mL/L多聚甲醛固定6h，常规石蜡包埋.
1.1.2 血清标本 收集上述患者血清供检. 另收集14例健康体检者血清作正常对照. 所有血清标本均清晨空腹静脉采血，分离出血清后置-20℃保存.
1.2 方法
1.2.1 血清LN含量检测 采用放射免疫分析法(RIA)测定血清中LN的含量. LN RIA试剂盒购于上海海军医学研究所生物技术中心，操作按说明书进行. 为减少误差，每例标本均在同批实验中作双管测定. 标准曲线按logit-log回归并计算出样品结果.
1.2.2 组织LN免疫组化染色 石蜡切片经4g/L胃蛋白酶(含0.01mol/L盐酸)37℃消化1.5h，按常规SABC法进行. 抗LN兔抗人抗体系Sigma公司产品，工作浓度为1∶350，SABC试剂盒购于武汉博士德生物工程公司. 在200倍视野下，随机选择未经复染核的切片上中下左右5个视野，经TJTY-300型图象分析仪测定其平均吸光度A(OD值)，即作为组织中LN含量. 经复染核后的切片作形态学观察.
统计学处理 血清及组织中LN含量以均数±标准差表示. 显著检验应用样本均数的t检验，两者间相关性分析应用直线相关分析法.
2 结果
2.1 血清及组织LN HCC转移组血清中LN含量显著高于未转移组和正常对照组；HCC转移组肝组织LN平均吸光度却显著低于未转移组. 表1示血清及组织中LN含量的测定结果.
表1 血清LN含量及组织LN平均吸光度
| 组别 | n | 血清LN(μg/L) | 组织LN吸光度(A) |
| HCC转移组 | 12 | 177±32bd | 0.17±0.07d |
| HCC未转移组 | 12 | 140±23a | 0.26±0.05 |
| 正常对照 | 14 | 119±20 |
aP<0.05，bP<0.01，vs control; dP<0.01，vs group without metastasis.
2.2 血清与组织LN含量的相关性 两者呈明显负相关关系；HCC未转移组的相关系数为r=-0.8427，P<0.0005；HCC转移组的相关系数为r=-0.7482，0.0025
图1 血清LN含量与组织LN A值的相关性.
2.3 LN免疫组化 LN主要分布于高、中度分化的癌结节内及癌结节间且排列紊乱，未分化的癌结节中无LN阳性反应(图2)；部分有转移的癌细胞胞质内尚可见阳性反应(图3)；另外，还可见LN排列成类窦样结构(图4)，以HCC有转移组最为明显.
图2 LN免疫组化染色(SABC法 ×100) 示未分化组织内多无LN.
图3 LN免疫组化染色(SABC法 ×200) 阳性颗粒分布于胞质内.
图4 LN免疫组化染色(SABC法 ×100) 示LN排列成窦状结构.
3 讨论
1979年，Timpl et al[2]从鼠Engkebreth-Holm-Swarm(EHS)肉瘤中分离出了一种非胶原成分——层粘蛋白(LN). 随后的研究表明，LN主要由基膜中的上皮细胞和内皮细胞合成，以不溶的形式广泛分布于正常组织的脉管基膜透明层中，并与Ⅳ型胶原相结合构成基膜的骨架成分. 所以，人们很容易将其与肿瘤的侵袭和转移联系起来. 早先的研究表明，癌组织基膜中LN减少及排列紊乱是肿瘤转移的基础[1]. Forster et al[3]研究了直肠癌组织中LN的变化，认为LN染色阴性的患者多有远处转移，5a存活率低. 我们对HCC癌组织中LN形态测量的研究表明，HCC转移组织中LN表达较未转移组少，两者具有显著性差异，提示LN减少导致基膜不完整，使肿瘤细胞侵袭转移过程中的屏障削弱，确实为肿瘤转移提供了可能性. 肿瘤组织中的这种变化主要是由于Ⅳ型胶原酶的合成增加，导致Ⅳ型胶原水解[4]，组织中LN随着基膜的崩解而减少.
但是，这种变化并不意味着组织中LN的合成减少. 我们发现部分癌细胞胞质中存在LN染色，由于此时无肝窦结构，所以LN系由肿瘤细胞合成[4，5]. 癌细胞的这种合成LN的能力可能在侵袭和转移过程中具有意义. Malignoff et al[6]发现小鼠纤维肉瘤细胞表面LN的表达使其转移潜能大大增加. Fridman et al[7]将LN与瘤细胞一起培养时发现肿瘤细胞表现出明显的过度增生现象. Bankhoff et al[8]的研究发现前列腺癌转移的组织，如淋巴结、骨、肺、和肝组织中LN呈强阳性表达. 所以，我们认为，LN在肿瘤转移过程中具有双重作用：当LN与Ⅳ型胶原构成基膜时，它可作为屏障阻止肿瘤细胞的转移，而在肿瘤细胞穿越基膜后则可介导其运动，促进转移的形成.另外，我们还发现，HCC组织特别是有转移的组织中LN可排列成窦状结构，与文献报道一致[5]，此系肿瘤组织中新生毛细血管网络的基膜成分. 组织中的LN除能够参与构成基膜外，还能对内皮细胞有趋化作用，并促进其分化[9]. 它还能刺激细胞分泌血管生长因子促进肿瘤血管的生成[10]，这些作用均能促进肿瘤细胞发生转移. 由于LN在肿瘤转移中的重要作用，人们试图寻求将其作为肿瘤转移的标志物. 基质的降解以及肿瘤细胞合成LN均可导致机体LN水平增高，所以检测血清LN的含量有助于了解机体的LN水平. Brocks et al[11]对肿瘤患者血清LN的检测表明，半数以上患者的血清LN浓度明显高于正常值. Yudoh et al[12]对骨及软组织肿瘤患者血清LN水平进行的研究表明，血清LN含量升高与肿瘤的转移密切相关，特别是部分患者的组织中在镜下还不能找到转移灶时，其血清LN已有升高，所以作者认为血清LN是早期诊断肿瘤转移的指标之一. 我们对HCC癌组织LN和血清LN进行了研究，转移组患者血清LN明显升高而组织中LN明显降低，且两者呈明显的负相关关系，由此我们认为血清LN升高是衡量HCC转移的简便而有用指标.
4 参考文献
1 Liotta LA. Tumor invasion and metastasis: role of the extracellular matric: Rhoads Meorial Award Lecture. Cancer Res, 1986;46(1):1-7
2 Timpl R, Rhode H, Robey PG, Rennard SI, Foidart JM, Martin GR. Laminin—a glycoprotein from basement membrances.
J Biol Chem, 1979;254(19):9933-9937
3 Forster SJ, Talbot IC, Critchley DR. Laminin and fibronectin in rectal adenocarcinoma: relationship to tumor grade,stage and metastasis. Br J Cancer, 1984;50(1):51-61
4 Ura H, Bonfil RD, Reich R, Reddel R, Pferfer A, Harris CC, Klein Szanto AJ. Expression of type Ⅳ collagenase and procollagen genes
and its correlation with the tumorigenic, invasive, bronchial cells. Cancer Res, 1989;49(16):4615-4621
5 Grigioni WF, Garbisa S, D＇Errico A, Baccarini P, StetlerStevenson WG, Liotta LA, Mancini AM. Evalution of hepatocellular
carcinoma aggressiveness by apanel of extracellular matrix antigens. Am J Pathol, 1991;138(3):647-654
6 Malinoff HL, McCoy JP Jr., Varani J, Wicha MS. Metastatic potential of murine fibrosarcoma cells is influenced by cell surface laminin.
Int J Cancer, 1984;33(5):651-655
7 Fridman R, Kibbey MC, Royce LS, Zain M, Sweeney M, Jicha DL et al. Enhanced tumor growth of both primary and established
human and murine tumor cells in athymic mice after coinjection with Matrigel. J Natl Cancer Inst, 1991;82(11):769-774
8 Bankhoff H, Wermert N, Dhom G, Remberger K. Distribution of basement membrances in primary and metastatic carcinomas of
the prostate. Hum Pathol, 1992;23(8):934-939
9 Kramer RH, Cheng YF, Clyman R. Human microvascular endothelial cells use β1 and β3 integrin receptor complexes to attach
to laminin. J Cell Biol, 1990;111(3):1233-1243
10 Bonfil RD, Vinyals A, Bustuoabad OD, Llorens A, Benavides FJ, Gonzalez Garrigues M et al. Stimulation of angiogenesis as an
explanation of Matrigel enhanced tumorigenicity. Int J Cancer, 1994;58(2):233-239
11 Brocks DG, Strecker H, Neubauer HP. Radioimmunoassay of laminin in serum and its application to cancer patients.
Clin Chem, 1986;32(3):787-789
12 Yudoh K, Matsui H, Kanamori M, Ohmori K, Tsuji H, Tatezaki S. Serum levels of laminin, type Ⅳ collagen and type Ⅲ
procollagen peptide as markers for detection of metastasis. Jpn J Cancer, 1994;85(12):1263-1269, 百拇医药(郑世曦1 陈汉琴2 杨军3 阮幼冰1 武忠弼1)