微量胶囊法14C-尿素呼气试验诊断幽门螺杆菌感染
广东省珠海市人民医院消化内科 519000
项目负责人 龚飞跃广东省珠海市人民医院消化内科 519000
收稿日期 1998-03-08
Subject headings Helicobacter infections/diagnosis; Helicobacter pylori/isolation & purification; gastric mucosa/microbiology; prespiratory function tests
主题词 螺杆菌感染/诊断；螺杆菌，幽门/分离和提纯；胃粘膜/微生物学；呼吸功能试验
, 百拇医药
1997-09开始我们采用微量胶囊法14C-尿素呼气试验(14C-UBT)检测幽门螺杆菌(Hp)，并与快速尿素酶法(RUT)对照观察，探讨其临床应用价值.
1 对象和方法
1.1 对象 因上消化道症状而就诊的患者120例，男88例，女32例，全部经内镜检查. 近2wk曾经应用抗Hp药物者除外. Hp感染诊断标准按照1997年中华医学会第二届全国幽门螺杆菌专题研讨会制定的科研诊断标准确定.
1.2 方法
1.2.1 14C-UBT法 14C-尿素胶囊(1μ Ci37kBq)，CO2吸收剂(内含氢氧化海胺1mmol)，闪烁液及14C-液体闪烁计数仪均由深圳养和生物科技公司提供. 试验方法：呼气试验在内镜检查当天进行，患者禁食6h以上，用温水送服整粒14C-尿素胶囊一粒，然后静坐20min后，通过吹气导管向盛有CO2吸收剂的闪烁瓶内徐徐吹气，直至液体由紫红色变为无色透明时停止吹气即采样完毕. 样品测定：向样品液闪瓶内加入闪烁剂4.5ml，用14C-液体闪烁计数仪计数2min，得出每分钟计数(dpm)，减去本底样品dpm，再除以厂家提供的校正系数，即得出样品每分钟衰变数(dpm). 测定结果≥20dpm为Hp阳性，≤150dpm为Hp阴性.
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1.2.2 RUT法 采用HpUT试剂盒，内镜下活检胃窦部粘膜一块测定，30min内试剂变红为阳性，不变色为阴性.
1.2.3 诊断试验评价方法 采用金标准同步盲法，列出四格表分别计算敏感性、特异性、阳性和阴性预检值及准确度.
2 结果
2.1 两种方法测试结果 120例检测者中，Hp阳性56例，Hp阴性64例. 14C-UBT法：真阳性54例，假阳性1例，真阴性63例，假阴性2例；RUT法：真阳性45例，假阳性4例，真阴性60例，假阴性11例. 两种方法的敏感性、特异性、阳性预检值、阴性预检值及准确度见表1.
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2.2 14C-UBT重复性 选择本试验阳性和阴性各10例，分别在1wk内重复试验，测试结果略有差异，但前后试验阳性和阴性符合率为100%.
表1 两种检测方法比较
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3 讨论
Hp是人胃内唯一能产生大量尿素酶的细菌，呼气试验的原理是尿素酶分解尿素生成氨和CO2，故给Hp感染的人服同位素标记的尿素后，尿素被分解产生标记的CO2从肺呼出，收集呼气样品测定标记CO2的量即可判断是否有Hp感染. 1987年Graham et al[1]首先报道了13C-尿素呼气试验诊断Hp感染，该方法准确、特异、快捷，但因需昂贵的质谱仪，且操作复杂，使应用受到限制. 1988年Marshal et al[2]建立了无创性14C-UBT方法，其仅需价廉的液体闪烁计数仪，操作简单，诊断Hp感染同样具有高度的敏感性和特异性，故国外已普遍开展. 但14C属放射性同位素，物理T1/2很长，然而，其进入胃内后72h内几乎全部被代谢和排出体外. 为了降低14C-尿素停留人体期间对人体的辐射作用，采用微量(1μg Ci)胶囊法，加大氢氧化海胺(CO2吸收剂)用量[3，4]，仍然获得同样高的敏感性和特异性，这不仅减少了患者同位素负荷和经济负担，而且消除了口腔尿素酶的干扰，还减少了环境污染的可能性，其辐射量仅为一次胃肠钡餐量的1/500，相当于自然环境中24h的暴露量[5]，具有极高的安全性.
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我们采用14C-UBT微量胶囊法检测Hp感染，发现其具有极高的敏感性和特异性，阳性和阴性预测值均非常高，而同样情况下采用简便的RUT法检测，其敏感性和阴性预测值显著低于14C-UBT法，特异性和阳性预测值也低于前者. 这主要由于Hp在胃内呈局灶分布，而内镜下活检组织检测不能反映胃内整体Hp感染情况，仅能反映局部情况. 14C-UBT还可以作为Hp感染程度的半定量依据，Peura et al将14C-UBT(1μg Ci法)测定值与Hp组织学检查进行半定量分析，发现前者dpm值与Hp感染程度之间具有高度正相关.
然而，14C-UBT也有其不足之处. 它不能反映Hp引起的病变(如溃疡、炎症等)，故不能代替内镜检查；它不能区分Hp的细胞毒株和非细胞毒株；其测定有赖于尿素酶存在，如近期应用抗菌药物，铋剂和质子泵抑制剂等可阻抑Hp释放的尿素酶，使结果呈假阴性.
, 百拇医药
由于14C-UBT微量胶囊法具有无创、准确、简便、快捷、安全、卫生、价廉、可反复多次检查等独特优点，可望成为Hp感染诊断和随访的重要手段，特别适合于Hp感染治疗后的复查和随访. 目前，已有国产14C-尿素、CO2吸收剂和闪烁剂的问世，这将会更快的推动14C-UBT在国内的广泛开展和应用.
4 参考文献
1 胡伏莲，周殿元，贾博琦主编. 幽门螺杆菌感染的基础与临床. 第1版. 北京：中国科学技术出版社，1997：299
2 Ames BN, Gold SL. Too many rodent carcinogens: mitogenesis increases mutagenesis. Science, 1990;249(31 August):970-971
3 张南征，张学庸，陈希陶，沈世人. 胃癌及其他胃癌患者的胃粘膜细胞动力学观察.中华消化杂志，1984；4(2)：81-84
4 Fan XG, Kelleher D, Fan XJ, Xia HX, Keeling PWN.Helicobacter pylori increases proliferation of gastric epithelial cells.
Gut,1996;38(1):19-22, 百拇医药(龚飞跃 孙达春 陈剑明 黄永强 龙雪银)
项目负责人 龚飞跃广东省珠海市人民医院消化内科 519000
收稿日期 1998-03-08
Subject headings Helicobacter infections/diagnosis; Helicobacter pylori/isolation & purification; gastric mucosa/microbiology; prespiratory function tests
主题词 螺杆菌感染/诊断；螺杆菌，幽门/分离和提纯；胃粘膜/微生物学；呼吸功能试验
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1997-09开始我们采用微量胶囊法14C-尿素呼气试验(14C-UBT)检测幽门螺杆菌(Hp)，并与快速尿素酶法(RUT)对照观察，探讨其临床应用价值.
1 对象和方法
1.1 对象 因上消化道症状而就诊的患者120例，男88例，女32例，全部经内镜检查. 近2wk曾经应用抗Hp药物者除外. Hp感染诊断标准按照1997年中华医学会第二届全国幽门螺杆菌专题研讨会制定的科研诊断标准确定.
1.2 方法
1.2.1 14C-UBT法 14C-尿素胶囊(1μ Ci37kBq)，CO2吸收剂(内含氢氧化海胺1mmol)，闪烁液及14C-液体闪烁计数仪均由深圳养和生物科技公司提供. 试验方法：呼气试验在内镜检查当天进行，患者禁食6h以上，用温水送服整粒14C-尿素胶囊一粒，然后静坐20min后，通过吹气导管向盛有CO2吸收剂的闪烁瓶内徐徐吹气，直至液体由紫红色变为无色透明时停止吹气即采样完毕. 样品测定：向样品液闪瓶内加入闪烁剂4.5ml，用14C-液体闪烁计数仪计数2min，得出每分钟计数(dpm)，减去本底样品dpm，再除以厂家提供的校正系数，即得出样品每分钟衰变数(dpm). 测定结果≥20dpm为Hp阳性，≤150dpm为Hp阴性.
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1.2.2 RUT法 采用HpUT试剂盒，内镜下活检胃窦部粘膜一块测定，30min内试剂变红为阳性，不变色为阴性.
1.2.3 诊断试验评价方法 采用金标准同步盲法，列出四格表分别计算敏感性、特异性、阳性和阴性预检值及准确度.
2 结果
2.1 两种方法测试结果 120例检测者中，Hp阳性56例，Hp阴性64例. 14C-UBT法：真阳性54例，假阳性1例，真阴性63例，假阴性2例；RUT法：真阳性45例，假阳性4例，真阴性60例，假阴性11例. 两种方法的敏感性、特异性、阳性预检值、阴性预检值及准确度见表1.
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2.2 14C-UBT重复性 选择本试验阳性和阴性各10例，分别在1wk内重复试验，测试结果略有差异，但前后试验阳性和阴性符合率为100%.
表1 两种检测方法比较
| 14C-UBT法(%) | RUT法(%) | |
| 敏感性 | 96.43(54/56) | 80.36(45/56) |
| 特异性 | 98.18(63/64) | 93.75(60/64) |
| 阳性预检值 | 97.44(54/55) | 91.84(45/49) |
| 阴性预检值 | 96.92(63/55) | 84.51(60/71) |
| 准确度 | 97.5(117/120) | 87.5(105/120) |
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3 讨论
Hp是人胃内唯一能产生大量尿素酶的细菌，呼气试验的原理是尿素酶分解尿素生成氨和CO2，故给Hp感染的人服同位素标记的尿素后，尿素被分解产生标记的CO2从肺呼出，收集呼气样品测定标记CO2的量即可判断是否有Hp感染. 1987年Graham et al[1]首先报道了13C-尿素呼气试验诊断Hp感染，该方法准确、特异、快捷，但因需昂贵的质谱仪，且操作复杂，使应用受到限制. 1988年Marshal et al[2]建立了无创性14C-UBT方法，其仅需价廉的液体闪烁计数仪，操作简单，诊断Hp感染同样具有高度的敏感性和特异性，故国外已普遍开展. 但14C属放射性同位素，物理T1/2很长，然而，其进入胃内后72h内几乎全部被代谢和排出体外. 为了降低14C-尿素停留人体期间对人体的辐射作用，采用微量(1μg Ci)胶囊法，加大氢氧化海胺(CO2吸收剂)用量[3，4]，仍然获得同样高的敏感性和特异性，这不仅减少了患者同位素负荷和经济负担，而且消除了口腔尿素酶的干扰，还减少了环境污染的可能性，其辐射量仅为一次胃肠钡餐量的1/500，相当于自然环境中24h的暴露量[5]，具有极高的安全性.
, 百拇医药
我们采用14C-UBT微量胶囊法检测Hp感染，发现其具有极高的敏感性和特异性，阳性和阴性预测值均非常高，而同样情况下采用简便的RUT法检测，其敏感性和阴性预测值显著低于14C-UBT法，特异性和阳性预测值也低于前者. 这主要由于Hp在胃内呈局灶分布，而内镜下活检组织检测不能反映胃内整体Hp感染情况，仅能反映局部情况. 14C-UBT还可以作为Hp感染程度的半定量依据，Peura et al将14C-UBT(1μg Ci法)测定值与Hp组织学检查进行半定量分析，发现前者dpm值与Hp感染程度之间具有高度正相关.
然而，14C-UBT也有其不足之处. 它不能反映Hp引起的病变(如溃疡、炎症等)，故不能代替内镜检查；它不能区分Hp的细胞毒株和非细胞毒株；其测定有赖于尿素酶存在，如近期应用抗菌药物，铋剂和质子泵抑制剂等可阻抑Hp释放的尿素酶，使结果呈假阴性.
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由于14C-UBT微量胶囊法具有无创、准确、简便、快捷、安全、卫生、价廉、可反复多次检查等独特优点，可望成为Hp感染诊断和随访的重要手段，特别适合于Hp感染治疗后的复查和随访. 目前，已有国产14C-尿素、CO2吸收剂和闪烁剂的问世，这将会更快的推动14C-UBT在国内的广泛开展和应用.
4 参考文献
1 胡伏莲，周殿元，贾博琦主编. 幽门螺杆菌感染的基础与临床. 第1版. 北京：中国科学技术出版社，1997：299
2 Ames BN, Gold SL. Too many rodent carcinogens: mitogenesis increases mutagenesis. Science, 1990;249(31 August):970-971
3 张南征，张学庸，陈希陶，沈世人. 胃癌及其他胃癌患者的胃粘膜细胞动力学观察.中华消化杂志，1984；4(2)：81-84
4 Fan XG, Kelleher D, Fan XJ, Xia HX, Keeling PWN.Helicobacter pylori increases proliferation of gastric epithelial cells.
Gut,1996;38(1):19-22, 百拇医药(龚飞跃 孙达春 陈剑明 黄永强 龙雪银)