肠道集合淋巴组织VIP，NSE，S-100蛋白神经的分布*
山东省潍坊市潍坊医学院病理教研室 261042
*山东省委资助.
项目负责人 吕世军山东省潍坊市潍坊医学院病理教研室 261042
收稿日期 1998-07-06
Subject headings intestins; lymphoid tissue; vasoactive intestinal peptide; neurol special enolase; s-100protein
主题词 肠；淋巴组织；血管活性肠肽；神经特异性烯醇化酶
, 百拇医药
许多资料表明，神经、内分泌和免疫系统通过细胞因子、肽类激素和神经递质相互作用，构成神经内分泌免疫网络[1,2]. 人类肠道不仅是消化器官，还是重要的神经内分泌和免疫器官. 肠粘膜层和粘膜下层含有丰富的肽能神经和淋巴组织. 我们观察血管活性肠肽(VIP)、神经特异性烯醇化酶(NSE)、S-100蛋白阳性神经元神经纤维在人肠集合淋巴组织的分布以及与肥大细胞关系，为人肠道神经内分泌免疫系统之间相互作用提供形态学基础.
1 材料和方法
1.1 材料 选取因猝死或意外死亡尸检正常肠组织(包括回肠及结肠)20例，所有标本经100mL/L福尔马林固定，石蜡包埋，行5um厚连续切片.
1.2 方法 免疫组织化学染色(PAP法)兔抗人VIP 1∶800(Incstar公司)，兔抗人NSE 1∶150(Dako公司)，兔抗人S-100蛋白1∶400(Dako公司)PAP试剂盒购于Dako公司. 并设立阳性对照，以每种标记物所识别的阳性组织为阳性对照. 阴性对照，用PBS代替Ⅰ抗作为阴性对照. 免疫组织化学与组织化学(PAP/甲苯胺蓝)复合染色：①免疫组织化学(VIP，NSE，S-100蛋白)PAP法常规脱蜡至水，滴加Ⅰ抗、Ⅱ抗、Ⅲ抗DAB-H2O2显色. ②蒸馏水洗后入10g/L甲苯胺蓝(pH 5～6)室温下20min～30min染肥大细胞. ③5mL/L冰醋酸分化(显微镜下控制，神经纤维呈棕褐色，肥大细胞颗粒呈红紫色为止).
, 百拇医药
2 结果
免疫组织化学染色：发现VIP阳性神经纤维分布于回肠和结肠粘膜层并形成网络，沿着小血管和腺体走行. 在人类肠集合淋巴组织周围有VIP阳性神经元及神经纤维分布. 集合淋巴组织内亦有VIP阳性神经纤维走行，穿插于淋巴细胞之间. 在肠粘膜下层及肌间神经丛亦有VIP阳性神经元及神经纤维. NSE阳性神经纤维分布于回肠和结肠全层，在集合淋巴组织内及周围有NSE阳性神经元及神经纤维支配. S-100蛋白阳性神经纤维亦分布于回肠和结肠全层，在集合淋巴组织内和周围亦有S-100蛋白阳性神经元和神经纤维分布.免疫组织化学(PAP法)与组织化学(甲苯胺蓝)复合染色：甲苯胺蓝染肥大细胞，胞质呈红色颗粒，肥大细胞主要分布于肠粘膜层和粘膜下层，复合染色显示部分胞质呈红紫色颗粒的肥大细胞与VIP，NSE，S-100阳性神经纤维相贴近，部分肥大细胞与神经纤维密切相触.
3 讨论
, 百拇医药
1977年Besedorsky et al[3]首先提出了神经内分泌免疫网络学说，近年来它们之间相互作用的研究日益受到重视. Giron et al发现大鼠颈部淋巴结内有去甲肾上腺素能神经分布. Kurkowski et al[4]报道豚鼠支气管旁淋巴结有P物质神经纤维的分布. Felten et al[5]研究发现各种哺乳类动物淋巴组织实质区有去甲肾上腺素能及肽能神经分布. 近年研究发现一些免疫活性细胞都能合成和释放神经内分泌多肽. 在人类肠集合淋巴组织中神经肽VIP的分布及与肥大细胞的关系在国内尚未见报道.
VIP是一种多肽，1967年由Said et al发现，它可作为脑-肠轴的组成成分，具有神经递质、激素和免疫调节剂之作用. VIP在肠免疫组织可影响淋巴组织淋巴细胞的游走，抑制T淋巴细胞增生，增强NK细胞的活性，促进肥大细胞递质的释放[6].
, http://www.100md.com
肥大细胞是一群独特的细胞，可能是各种不同类型炎症过程中的关键细胞，也可作为炎症反应的发动者，释放多种递质，最近国外学者研究发现一些神经肽广泛存在于有神经分布的组织并与肥大细胞相触，此肽即是神经递质又是局部激素. 可使肥大细胞分泌递质，从而提出了肥大细胞递质分泌的神经内分泌调节学说.
本结果显示人类肠集合淋巴组织周围有神经肽VIP以及NSE，S-100蛋白阳性神经元神经纤维分布，并穿插于淋巴组织中. 肠粘膜层粘膜下层部分肥大细胞与神经肽VIP以及NSE，S-100蛋白阳性神经纤维密切相触，可提示人类肠道神经肽VIP与肠集合淋巴组织及肥大细胞有密切关系，为人类肠道神经内分泌和免疫系统之间的相互作用提供形态学基础.
4 参考文献
1 Shanahan F, Anton P. Neuroendocrine modulation of the immune system. Dig Dis Sci,1988;33(3):41s～49s
, 百拇医药
2 范少光，丁桂风. 神经内分泌与免疫系统之间相互作用的介导物质：共同的生物学语言.生理科学进展，1995；26(2)：175-183
3 Besedorsky. Network of Immune endocrine interaction. Clin Exp Immunol, 1977;27(1):1-3
4 Kurkowski R, Kummer W, Heym C, Substance Pimmunoreactive nerve fibers in tracheobronchial lymph nodes of the Guinea pig:
origin ultrastructure and coexistence with other peptides. Peptide, 1990;11:13-20
5 Felten DL, Felten SY, Carlson SL. Noradrenergic and peptidergic innervation of lymphoid tissue. J Immunol, 1985;135(2):755s～765s
6 Odorisio MS. Biochemical characteristics of receptors for vasoactive intestinal polypeptide in nervous, endocrine,and immun systems.Federation Proceedings, 1987;46(1):192-195, 百拇医药(吕世军 张伟栋 郭爱华 吴洪娟 魏志新 姜红新)
*山东省委资助.
项目负责人 吕世军山东省潍坊市潍坊医学院病理教研室 261042
收稿日期 1998-07-06
Subject headings intestins; lymphoid tissue; vasoactive intestinal peptide; neurol special enolase; s-100protein
主题词 肠；淋巴组织；血管活性肠肽；神经特异性烯醇化酶
, 百拇医药
许多资料表明，神经、内分泌和免疫系统通过细胞因子、肽类激素和神经递质相互作用，构成神经内分泌免疫网络[1,2]. 人类肠道不仅是消化器官，还是重要的神经内分泌和免疫器官. 肠粘膜层和粘膜下层含有丰富的肽能神经和淋巴组织. 我们观察血管活性肠肽(VIP)、神经特异性烯醇化酶(NSE)、S-100蛋白阳性神经元神经纤维在人肠集合淋巴组织的分布以及与肥大细胞关系，为人肠道神经内分泌免疫系统之间相互作用提供形态学基础.
1 材料和方法
1.1 材料 选取因猝死或意外死亡尸检正常肠组织(包括回肠及结肠)20例，所有标本经100mL/L福尔马林固定，石蜡包埋，行5um厚连续切片.
1.2 方法 免疫组织化学染色(PAP法)兔抗人VIP 1∶800(Incstar公司)，兔抗人NSE 1∶150(Dako公司)，兔抗人S-100蛋白1∶400(Dako公司)PAP试剂盒购于Dako公司. 并设立阳性对照，以每种标记物所识别的阳性组织为阳性对照. 阴性对照，用PBS代替Ⅰ抗作为阴性对照. 免疫组织化学与组织化学(PAP/甲苯胺蓝)复合染色：①免疫组织化学(VIP，NSE，S-100蛋白)PAP法常规脱蜡至水，滴加Ⅰ抗、Ⅱ抗、Ⅲ抗DAB-H2O2显色. ②蒸馏水洗后入10g/L甲苯胺蓝(pH 5～6)室温下20min～30min染肥大细胞. ③5mL/L冰醋酸分化(显微镜下控制，神经纤维呈棕褐色，肥大细胞颗粒呈红紫色为止).
, 百拇医药
2 结果
免疫组织化学染色：发现VIP阳性神经纤维分布于回肠和结肠粘膜层并形成网络，沿着小血管和腺体走行. 在人类肠集合淋巴组织周围有VIP阳性神经元及神经纤维分布. 集合淋巴组织内亦有VIP阳性神经纤维走行，穿插于淋巴细胞之间. 在肠粘膜下层及肌间神经丛亦有VIP阳性神经元及神经纤维. NSE阳性神经纤维分布于回肠和结肠全层，在集合淋巴组织内及周围有NSE阳性神经元及神经纤维支配. S-100蛋白阳性神经纤维亦分布于回肠和结肠全层，在集合淋巴组织内和周围亦有S-100蛋白阳性神经元和神经纤维分布.免疫组织化学(PAP法)与组织化学(甲苯胺蓝)复合染色：甲苯胺蓝染肥大细胞，胞质呈红色颗粒，肥大细胞主要分布于肠粘膜层和粘膜下层，复合染色显示部分胞质呈红紫色颗粒的肥大细胞与VIP，NSE，S-100阳性神经纤维相贴近，部分肥大细胞与神经纤维密切相触.
3 讨论
, 百拇医药
1977年Besedorsky et al[3]首先提出了神经内分泌免疫网络学说，近年来它们之间相互作用的研究日益受到重视. Giron et al发现大鼠颈部淋巴结内有去甲肾上腺素能神经分布. Kurkowski et al[4]报道豚鼠支气管旁淋巴结有P物质神经纤维的分布. Felten et al[5]研究发现各种哺乳类动物淋巴组织实质区有去甲肾上腺素能及肽能神经分布. 近年研究发现一些免疫活性细胞都能合成和释放神经内分泌多肽. 在人类肠集合淋巴组织中神经肽VIP的分布及与肥大细胞的关系在国内尚未见报道.
VIP是一种多肽，1967年由Said et al发现，它可作为脑-肠轴的组成成分，具有神经递质、激素和免疫调节剂之作用. VIP在肠免疫组织可影响淋巴组织淋巴细胞的游走，抑制T淋巴细胞增生，增强NK细胞的活性，促进肥大细胞递质的释放[6].
, http://www.100md.com
肥大细胞是一群独特的细胞，可能是各种不同类型炎症过程中的关键细胞，也可作为炎症反应的发动者，释放多种递质，最近国外学者研究发现一些神经肽广泛存在于有神经分布的组织并与肥大细胞相触，此肽即是神经递质又是局部激素. 可使肥大细胞分泌递质，从而提出了肥大细胞递质分泌的神经内分泌调节学说.
本结果显示人类肠集合淋巴组织周围有神经肽VIP以及NSE，S-100蛋白阳性神经元神经纤维分布，并穿插于淋巴组织中. 肠粘膜层粘膜下层部分肥大细胞与神经肽VIP以及NSE，S-100蛋白阳性神经纤维密切相触，可提示人类肠道神经肽VIP与肠集合淋巴组织及肥大细胞有密切关系，为人类肠道神经内分泌和免疫系统之间的相互作用提供形态学基础.
4 参考文献
1 Shanahan F, Anton P. Neuroendocrine modulation of the immune system. Dig Dis Sci,1988;33(3):41s～49s
, 百拇医药
2 范少光，丁桂风. 神经内分泌与免疫系统之间相互作用的介导物质：共同的生物学语言.生理科学进展，1995；26(2)：175-183
3 Besedorsky. Network of Immune endocrine interaction. Clin Exp Immunol, 1977;27(1):1-3
4 Kurkowski R, Kummer W, Heym C, Substance Pimmunoreactive nerve fibers in tracheobronchial lymph nodes of the Guinea pig:
origin ultrastructure and coexistence with other peptides. Peptide, 1990;11:13-20
5 Felten DL, Felten SY, Carlson SL. Noradrenergic and peptidergic innervation of lymphoid tissue. J Immunol, 1985;135(2):755s～765s
6 Odorisio MS. Biochemical characteristics of receptors for vasoactive intestinal polypeptide in nervous, endocrine,and immun systems.Federation Proceedings, 1987;46(1):192-195, 百拇医药(吕世军 张伟栋 郭爱华 吴洪娟 魏志新 姜红新)