一氧化氮与IL-8在肝硬变高动力循环中的作用
1本钢总医院消化科 辽宁省本溪市 117000
2上海第二医科大学附属仁济医院 上海市消化疾病研究所 上海市 200001
黄颖秋，男，1962-03-30生，辽宁省本溪市人，汉族. 1985年锦州医学院本科毕业，1997年上海第二医科大学硕士，副主任医师，消化科主任，主要从事胃肠病及肝病的诊治研究，发表论文30篇.
项目负责人 黄颖秋，117000，本钢总医院消化科，辽宁省本溪市人民路29号.
Correspondence to Ying-Qiu Huang, Department of Gastroenterology, General Hospital of Benxi Iron & Steel Co., 29 Renminlu,Benxi 117000, Liaoning Province, China
, 百拇医药
Tel. +86·414·2845501-473
收稿日期 1998-07-06
Effects of nitric oxide and IL-8 on hyperdynamic circulatory state in cirrhotic patients
Ying-Qiu Huang1, Shu-Dong Xiao2, De-Zhong Zhang2 and Jian-Zhong Mo2
1Department of Gastroenterology, General Hospital of Benxi Iron & Steel Co., Benxi 117000, Liaoning Province, China
, 百拇医药
2Shanghai Institute of Digestive Disease, Renji Hospital, Shanghai Second Medical University, Shanghai 200001, China
Abstract
AIM To evaluate the effects of nitric oxide (NO) and (IL-8) on hyperdynamics in patients with cirrhosis.
METHODS Serum IL-8 levels were determined in cirrhotic patients (n=32) by using ELISA assay; and serum NO concentrations were measured using a flurometric assay. The parameters of portal venous system flow were determined by Doppler ultrasonography.
, 百拇医药
RESULTS Concentration of serum IL-8 and NO in cirrhotic patients were markedly higher than that in healthy volunteers. The amount of splenic venous flow (SVF) and superior mesenteric venous flow (SMVF) in patients with hepatic cirrhosis was greater than that of portal venous flow (PVF) in normal control.
CONCLUSION Splanchnic hyperdynamic circulatory state associated with portal hypertension in patients with cirrhosis is related to with excessive production of NO induced by interleukins.
, 百拇医药
Subject headings liver cirrhosis; hemodynamics; portal venous; nitric oxide/blood; interleukin-8/blood
Huang YQ, Xiao SD, Zhang DZ, Mo JZ. Effects of nitric oxide and IL-8 on hyperdynamic circulatory state in cirrhotic patients.
Huaren Xiaohua Zazhi,1998;6(12):1079-1081
摘要
目的 探讨一氧化氮(NO)与白介素8(IL-8)对肝硬变门脉系统血流量的影响.
, 百拇医药
方法 应用ELISA法测定肝硬变患者(n=32)血IL-8含量；应用荧光法检测血清NO水平；应用多普勒超声检测门静脉系统血流量参数.
结果 肝硬变患者血清IL-8与NO同步升高，其脾静脉血流量(SVF)与肠系膜上静脉血流量(SMVF)之和显著大于正常对照组的门静脉血流量(PVF).
结论 肝硬变患者血IL-8增加可能为NO增多的诱发因素；肝硬变患者存在内脏高动力循环状态，NO增加可能为其成因.
主题词 肝硬化；血液动力学；门静脉；一氧化氮/血液；白细胞介素8/血液
黄颖秋, 萧树东, 张德中, 莫剑忠.一氧化氮与IL-8在肝硬变高动力循环中的作用.华人消化杂志,1998;6(12):1079-1081
, 百拇医药
0 引言
业已证实，肝硬变患者血浆TNF-α，IL-1，IL-2等细胞因子明显增加，进而启动NO途径产生高动力循环状态. 是否IL-8亦参与NOS的诱导尚不清楚. 我们应用ELISA法测定肝硬变患者血清IL-8含量，并检测其血清NO浓度；应用多普勒超声检测患者门静脉系统血流量，旨在探讨NO及IL-8对肝硬变患者门脉血流量的影响.
1 对象和方法
1.1 对象 1996-06/1997-03上海仁济医院确诊的肝硬变患者32例，男29例，女3例，年龄51岁±11岁. 其中肝炎后肝硬变28例，血吸虫性肝硬变2例，酒精性肝硬变2例. 按Child等级分类，A级6例，B级12例，C级14例. 剔除发热、自发性腹膜炎、肾功能不全及上消化道大出血者. 检查前至少1wk停用影响血流动力学的药物. 正常对照组为本院健康志愿者16名. 所有受试者均为清晨空腹使用一次性注射器于肘静脉采血5mL，分离血清，-20℃贮存备检.
, 百拇医药
1.2 方法 ①血清IL-8测定：IL-8检测试剂盒由法国IMMUNOTECH公司提供. 采用双抗体夹心ELISA法，严格按说明书进行操作. ②血清NO测定：参见文献[1]. ③多普勒超声(DUS)检测方法[2]：受检者禁食12h，取仰卧位，测量时嘱患者暂停呼吸，多普勒声束与血流夹角<60°. 分别测量门静脉(PV)、肠系膜上静脉(SMV)及脾静脉(SV)的血管内径参数、最大血流速度参数及血流方向. PV测量点在SMV与SV汇合点至PV左右分叉的中点. SMV，SV测量点在汇合前2cm左右. 每个参数测定2次，取其均值，按血管截面积和平均血流速度计算血流量.
统计学处理 数据以x±s表示，行方差齐性检验及配对t检验，P<0.05有统计学意义.
, 百拇医药
2 结果
肝硬变患者血清IL-8含量及NO浓度均显著高于健康受试者. 血IL-8含量及NO浓度随肝硬变严重程度而进行性增加(图1，2，表1).
图1 肝硬变患者血清IL-8含量与健康受试者比较(P<0.01).
图2 肝硬变患者血清NO含量与健康受试者比较(P<0.01).
表1 血IL-8，NO与肝功受损程度的关系(x±s)
, 百拇医药
aP<0.05，bP<0.01，vs A.
肝硬变患者脾静脉血流量(SVF)及肠系膜上静脉血流量(SMVF)较正常对照组显著增加，且二者之和显著大于正常对照组的门静脉血流量(PVF)，而正常对照组的SVF与SMVF之和却接近于PVF(表2)，提示前者存在高动力循环状态.
表2 门静脉系统血流量参数(mL/min, x±s)
, http://www.100md.com
aP<0.05，bP<0.01，vs 对照组.
3 讨论
肝硬变门脉高压常见来自于小肠的细菌移位，这可能是局部内毒素及细胞因子生成的重要原因[3]. 内毒素直接或通过细胞因子刺激iNOS表达，使NO合成和释出增加而致血管扩张[4]，进而引发高动力循环状态. 迄今已见IL-1，IL-2等细胞因子介导iNOS的报道，但IL-8是否刺激NO增多，却不得而知. 本研究发现肝硬变患者血清IL-8水平显著升高，且与肝功受损程度同步. 据信IL-8含量升高可能与内毒素诱导内皮细胞、单核细胞产生过多的IL-8，以及肝脏对IL-8的清除作用下降有关. 上述结果表明，肝功能损伤可能是促进这些物质激活的重要因素. 虽然本研究没有检测患者的血清内毒素水平，但肝硬变患者血清IL-8水平的显著升高可能反映了诱导巨噬细胞的内毒素增加. 白介素与其相应受体结合后主要在肝脏水平代谢. 随着肝硬变门脉高压肝功受损程度的加重，功能肝细胞数目的减少可能引起肝硬变患者细胞因子分解代谢的下降. 迄今为止，我们尚未见IL-8参与肝硬变高动力循环状态的报道，本研究中肝硬变患者血清IL-8与NO同步升高，提示IL-8可能参与iNOS的诱导. 其导致NO增高的原因可能与如下原因有关：①IL-8不仅是中性粒细胞的趋化因子，同时亦能激活中性粒细胞，促其释放超氧化物歧化酶[5]，而该酶对NO的分解有抑制作用，从而使NO增加[6]；②巨噬细胞内不仅有iNOS，亦有精氨酸酶[7]，后者受IL-4诱导而活化，从而消耗L-arg，使NO减少，而IL-8有选择性地抑制IL-4的作用，间接致NO增加.
, 百拇医药
肝硬变患者SMVF与SVF之和显著地大于健康受试者的PVF，提示前者存在内脏高动力循环状态，此外，肝硬变患者的血清NO含量亦显著高于健康受试者，说明NO可能参与高动力循环状态. 我们以前所做的动物实验亦证实，肝硬变大鼠普遍存在高动力循环状态，且血清NO含量显著高于正常鼠[8]，而应用NOS抑制剂不仅使血清NO含量显著下降，肝硬变大鼠的高动力循环状态亦随之改善[9]，提示内源性NO在肝硬变的血流动力学改变中起重要作用. 本研究中因Doppler超声所测得的肝硬变患者的SMF和SVF不包括经腹膜及直肠静脉丛等处的分流血流，故肝硬变患者实际增加的内脏血流量可能更大. 但是，由于存在大量的测支分流，故使肝硬变门脉高压患者的门静脉入肝血流量显著地少于正常人.
总之，本研究结果表明，肝硬变患者血清IL-8与NO含量显著升高，并随肝功受损程度进行性增加，且存在内脏高动力循环状态，NO增加可能为其成因.
, http://www.100md.com
4 参考文献
1 Damiani P, Burini G. Fluorometric determination of nitrite. Talanta, 1986;33(8):649-652
2 Sabba C, Weltin GG, Cicchetti DV, Bennett WP. Observer variability in echoDoppler measurements of portal flow in cirrhotic
patients and normal volunteers. Gastroenterology,1990;98(5):1603-1607
3 黄颖秋，萧树东. 一氧化氮与肝病研究进展. 国外医学消化系疾病分册，1997；17(2)：79-82
, 百拇医药
4 黄颖秋，莫剑忠，张德中. 血管活性物质与肝硬变血液动力学改变. 国外医学内科学分册，1997；24(2)：55-58
5 Samaunta AK, Oppenheim JJ, Matsushima K, Curtiss SI. Interleukin 8 (monocyte-derived neutrophil chemotactic factor)
dynamically regulates its own receptor expression on human neutrophils. J Bio Chem,1990;265:183-189
6 Rubanyi GM, Vanhoutte PM. Superoxide anions and hyperoxia inactivate endothelium derived relaxing factor.
, 百拇医药
Am J Physiol,1986;250(2):H822-H827
7 Modolell M, Corraliza IM, Link F, Cohen J, Kobzik L. Reciprocal regulation of the nitric oxide synthase/arginase balance in mouse
bone marrow derived macrophages by TH1 and TH2 cytokines. Eur J Immunol,1995;25(4):1101-1104
8 黄颖秋，萧树东，张德中. 肝硬变大鼠食管一氧化氮合酶分布定位研究. 中华消化杂志，1998；18(2)：86-88
9 黄颖秋，萧树东，张德中. 促红细胞生成素与一氧化氮合酶抑制剂对肝硬变大鼠高动力循环状态的影响.
中华医学杂志，1998；78(2)：139-142, 百拇医药(黄颖秋1 萧树东2 张德中2 莫剑忠2)
2上海第二医科大学附属仁济医院 上海市消化疾病研究所 上海市 200001
黄颖秋，男，1962-03-30生，辽宁省本溪市人，汉族. 1985年锦州医学院本科毕业，1997年上海第二医科大学硕士，副主任医师，消化科主任，主要从事胃肠病及肝病的诊治研究，发表论文30篇.
项目负责人 黄颖秋，117000，本钢总医院消化科，辽宁省本溪市人民路29号.
Correspondence to Ying-Qiu Huang, Department of Gastroenterology, General Hospital of Benxi Iron & Steel Co., 29 Renminlu,Benxi 117000, Liaoning Province, China
, 百拇医药
Tel. +86·414·2845501-473
收稿日期 1998-07-06
Effects of nitric oxide and IL-8 on hyperdynamic circulatory state in cirrhotic patients
Ying-Qiu Huang1, Shu-Dong Xiao2, De-Zhong Zhang2 and Jian-Zhong Mo2
1Department of Gastroenterology, General Hospital of Benxi Iron & Steel Co., Benxi 117000, Liaoning Province, China
, 百拇医药
2Shanghai Institute of Digestive Disease, Renji Hospital, Shanghai Second Medical University, Shanghai 200001, China
Abstract
AIM To evaluate the effects of nitric oxide (NO) and (IL-8) on hyperdynamics in patients with cirrhosis.
METHODS Serum IL-8 levels were determined in cirrhotic patients (n=32) by using ELISA assay; and serum NO concentrations were measured using a flurometric assay. The parameters of portal venous system flow were determined by Doppler ultrasonography.
, 百拇医药
RESULTS Concentration of serum IL-8 and NO in cirrhotic patients were markedly higher than that in healthy volunteers. The amount of splenic venous flow (SVF) and superior mesenteric venous flow (SMVF) in patients with hepatic cirrhosis was greater than that of portal venous flow (PVF) in normal control.
CONCLUSION Splanchnic hyperdynamic circulatory state associated with portal hypertension in patients with cirrhosis is related to with excessive production of NO induced by interleukins.
, 百拇医药
Subject headings liver cirrhosis; hemodynamics; portal venous; nitric oxide/blood; interleukin-8/blood
Huang YQ, Xiao SD, Zhang DZ, Mo JZ. Effects of nitric oxide and IL-8 on hyperdynamic circulatory state in cirrhotic patients.
Huaren Xiaohua Zazhi,1998;6(12):1079-1081
摘要
目的 探讨一氧化氮(NO)与白介素8(IL-8)对肝硬变门脉系统血流量的影响.
, 百拇医药
方法 应用ELISA法测定肝硬变患者(n=32)血IL-8含量；应用荧光法检测血清NO水平；应用多普勒超声检测门静脉系统血流量参数.
结果 肝硬变患者血清IL-8与NO同步升高，其脾静脉血流量(SVF)与肠系膜上静脉血流量(SMVF)之和显著大于正常对照组的门静脉血流量(PVF).
结论 肝硬变患者血IL-8增加可能为NO增多的诱发因素；肝硬变患者存在内脏高动力循环状态，NO增加可能为其成因.
主题词 肝硬化；血液动力学；门静脉；一氧化氮/血液；白细胞介素8/血液
黄颖秋, 萧树东, 张德中, 莫剑忠.一氧化氮与IL-8在肝硬变高动力循环中的作用.华人消化杂志,1998;6(12):1079-1081
, 百拇医药
0 引言
业已证实，肝硬变患者血浆TNF-α，IL-1，IL-2等细胞因子明显增加，进而启动NO途径产生高动力循环状态. 是否IL-8亦参与NOS的诱导尚不清楚. 我们应用ELISA法测定肝硬变患者血清IL-8含量，并检测其血清NO浓度；应用多普勒超声检测患者门静脉系统血流量，旨在探讨NO及IL-8对肝硬变患者门脉血流量的影响.
1 对象和方法
1.1 对象 1996-06/1997-03上海仁济医院确诊的肝硬变患者32例，男29例，女3例，年龄51岁±11岁. 其中肝炎后肝硬变28例，血吸虫性肝硬变2例，酒精性肝硬变2例. 按Child等级分类，A级6例，B级12例，C级14例. 剔除发热、自发性腹膜炎、肾功能不全及上消化道大出血者. 检查前至少1wk停用影响血流动力学的药物. 正常对照组为本院健康志愿者16名. 所有受试者均为清晨空腹使用一次性注射器于肘静脉采血5mL，分离血清，-20℃贮存备检.
, 百拇医药
1.2 方法 ①血清IL-8测定：IL-8检测试剂盒由法国IMMUNOTECH公司提供. 采用双抗体夹心ELISA法，严格按说明书进行操作. ②血清NO测定：参见文献[1]. ③多普勒超声(DUS)检测方法[2]：受检者禁食12h，取仰卧位，测量时嘱患者暂停呼吸，多普勒声束与血流夹角<60°. 分别测量门静脉(PV)、肠系膜上静脉(SMV)及脾静脉(SV)的血管内径参数、最大血流速度参数及血流方向. PV测量点在SMV与SV汇合点至PV左右分叉的中点. SMV，SV测量点在汇合前2cm左右. 每个参数测定2次，取其均值，按血管截面积和平均血流速度计算血流量.
统计学处理 数据以x±s表示，行方差齐性检验及配对t检验，P<0.05有统计学意义.
, 百拇医药
2 结果
肝硬变患者血清IL-8含量及NO浓度均显著高于健康受试者. 血IL-8含量及NO浓度随肝硬变严重程度而进行性增加(图1，2，表1).
图1 肝硬变患者血清IL-8含量与健康受试者比较(P<0.01).
图2 肝硬变患者血清NO含量与健康受试者比较(P<0.01).
表1 血IL-8，NO与肝功受损程度的关系(x±s)
| 指标 | Child 分级 | ||
| A(n=6) | B(n=12) | C(n=14) | |
| IL-8(ng/L) | 14.4±1.6 | 19.5±1.3b | 28.2±5.0b |
| NO(μmol/L) | 5.2±0.3 | 5.9±0.5a | 7.1±0.5a |
, 百拇医药
aP<0.05，bP<0.01，vs A.
肝硬变患者脾静脉血流量(SVF)及肠系膜上静脉血流量(SMVF)较正常对照组显著增加，且二者之和显著大于正常对照组的门静脉血流量(PVF)，而正常对照组的SVF与SMVF之和却接近于PVF(表2)，提示前者存在高动力循环状态.
表2 门静脉系统血流量参数(mL/min, x±s)
| 组别 | PVF | SMF | SVF |
| 对照组 | 832±198 | 402±190 | 351±129 |
| 肝硬变组 | 468±294b | 624±316b | 530±266a |
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aP<0.05，bP<0.01，vs 对照组.
3 讨论
肝硬变门脉高压常见来自于小肠的细菌移位，这可能是局部内毒素及细胞因子生成的重要原因[3]. 内毒素直接或通过细胞因子刺激iNOS表达，使NO合成和释出增加而致血管扩张[4]，进而引发高动力循环状态. 迄今已见IL-1，IL-2等细胞因子介导iNOS的报道，但IL-8是否刺激NO增多，却不得而知. 本研究发现肝硬变患者血清IL-8水平显著升高，且与肝功受损程度同步. 据信IL-8含量升高可能与内毒素诱导内皮细胞、单核细胞产生过多的IL-8，以及肝脏对IL-8的清除作用下降有关. 上述结果表明，肝功能损伤可能是促进这些物质激活的重要因素. 虽然本研究没有检测患者的血清内毒素水平，但肝硬变患者血清IL-8水平的显著升高可能反映了诱导巨噬细胞的内毒素增加. 白介素与其相应受体结合后主要在肝脏水平代谢. 随着肝硬变门脉高压肝功受损程度的加重，功能肝细胞数目的减少可能引起肝硬变患者细胞因子分解代谢的下降. 迄今为止，我们尚未见IL-8参与肝硬变高动力循环状态的报道，本研究中肝硬变患者血清IL-8与NO同步升高，提示IL-8可能参与iNOS的诱导. 其导致NO增高的原因可能与如下原因有关：①IL-8不仅是中性粒细胞的趋化因子，同时亦能激活中性粒细胞，促其释放超氧化物歧化酶[5]，而该酶对NO的分解有抑制作用，从而使NO增加[6]；②巨噬细胞内不仅有iNOS，亦有精氨酸酶[7]，后者受IL-4诱导而活化，从而消耗L-arg，使NO减少，而IL-8有选择性地抑制IL-4的作用，间接致NO增加.
, 百拇医药
肝硬变患者SMVF与SVF之和显著地大于健康受试者的PVF，提示前者存在内脏高动力循环状态，此外，肝硬变患者的血清NO含量亦显著高于健康受试者，说明NO可能参与高动力循环状态. 我们以前所做的动物实验亦证实，肝硬变大鼠普遍存在高动力循环状态，且血清NO含量显著高于正常鼠[8]，而应用NOS抑制剂不仅使血清NO含量显著下降，肝硬变大鼠的高动力循环状态亦随之改善[9]，提示内源性NO在肝硬变的血流动力学改变中起重要作用. 本研究中因Doppler超声所测得的肝硬变患者的SMF和SVF不包括经腹膜及直肠静脉丛等处的分流血流，故肝硬变患者实际增加的内脏血流量可能更大. 但是，由于存在大量的测支分流，故使肝硬变门脉高压患者的门静脉入肝血流量显著地少于正常人.
总之，本研究结果表明，肝硬变患者血清IL-8与NO含量显著升高，并随肝功受损程度进行性增加，且存在内脏高动力循环状态，NO增加可能为其成因.
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4 参考文献
1 Damiani P, Burini G. Fluorometric determination of nitrite. Talanta, 1986;33(8):649-652
2 Sabba C, Weltin GG, Cicchetti DV, Bennett WP. Observer variability in echoDoppler measurements of portal flow in cirrhotic
patients and normal volunteers. Gastroenterology,1990;98(5):1603-1607
3 黄颖秋，萧树东. 一氧化氮与肝病研究进展. 国外医学消化系疾病分册，1997；17(2)：79-82
, 百拇医药
4 黄颖秋，莫剑忠，张德中. 血管活性物质与肝硬变血液动力学改变. 国外医学内科学分册，1997；24(2)：55-58
5 Samaunta AK, Oppenheim JJ, Matsushima K, Curtiss SI. Interleukin 8 (monocyte-derived neutrophil chemotactic factor)
dynamically regulates its own receptor expression on human neutrophils. J Bio Chem,1990;265:183-189
6 Rubanyi GM, Vanhoutte PM. Superoxide anions and hyperoxia inactivate endothelium derived relaxing factor.
, 百拇医药
Am J Physiol,1986;250(2):H822-H827
7 Modolell M, Corraliza IM, Link F, Cohen J, Kobzik L. Reciprocal regulation of the nitric oxide synthase/arginase balance in mouse
bone marrow derived macrophages by TH1 and TH2 cytokines. Eur J Immunol,1995;25(4):1101-1104
8 黄颖秋，萧树东，张德中. 肝硬变大鼠食管一氧化氮合酶分布定位研究. 中华消化杂志，1998；18(2)：86-88
9 黄颖秋，萧树东，张德中. 促红细胞生成素与一氧化氮合酶抑制剂对肝硬变大鼠高动力循环状态的影响.
中华医学杂志，1998；78(2)：139-142, 百拇医药(黄颖秋1 萧树东2 张德中2 莫剑忠2)