十二指肠溃疡患者胃窦粘膜β-内啡肽阳性细胞图象分析
张家口医学院 1组织学胚胎学教研室 2外科学教研室 河北省张家口市 075029
*国家自然科学基金资助项目，No.38970430
项目负责人 任君旭张家口医学院 河北省张家口市 075029
收稿日期 1998-12-21 接收日期 1999-03-01
Subject headings duodenal ulcer; gastric mucosa; β-endorphin
主题词 十二指肠溃疡；胃粘膜；β-内啡肽
, 百拇医药
研究应用免疫组织化学PAP法显示胃窦幽门腺β-内啡肽(β-EP)阳性细胞，通过真彩色图象分析系统，检测非病变区胃窦幽门腺β-EP阳性细胞的阳性反应点灰度和面积，计算灰度密度R，以探讨与溃疡的关系，并为十二指肠溃疡幽门腺β-EP阳性反应细胞β-EP含量分析提供依据.
1 材料和方法
1.1 材料 成人男性胃窦粘膜标本10例，其中十二指肠溃疡(DU)和浅表性胃炎(对照组Con)各5例. 所有病例均经内镜证实，标本取距幽门口2cm肉眼下非病变区胃窦前壁粘膜，4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，连续切片厚6μm.
1.2 方法 ①免疫组织化学染色以Sterberger PAP法显示β-EP阳性细胞. ②图象分析用XY-540型生物医学真彩色图象分析仪测试，图象监视器窗口为512×512象素点，在以FORTRAN语言编程软件系统支持下自动开窗128×128象素点，受检切片在Olympus BH2显微镜下放大400倍，检测DU组和Con组β-EP阳性细胞，随机检测DU组15个、Con组15个，测定每个β-EP阳性细胞阳性反应灰度G和阳性反应点面积A，计算灰度密度R，R=G/A(μm-2). 灰度密度参数与反应强度成反比，灰度密度可客观地反映单位面积β-EP阳性反应程度.
, 百拇医药
2 结果
胃窦幽门腺β-EP阳性细胞胞质呈蓝色，细胞核为阴性，对照实验均为阴性，β-EP阳性细胞主要分布于幽门腺腺体中下部，个别散在于底部，DU组可见该细胞成团分布，细胞形态多样，以锥体形、梭形和不规则为主，有的细胞有突起. 图象分析结果为DU组β-EP阳性反应灰度密度增大(0.22±0.04)，与对照组(0.14±0.04)相比差异显著(P<0.01).
3 讨论
本研究首次应用真彩色图象分析仪检测了DU组和Con组非病变区胃窦粘膜幽门腺β-EP阳性细胞，DU时β-EP阳性细胞阳性反应区灰度密度明显增大，表明其细胞内β-EP含量减少，表明非病变区胃窦粘膜β-EP细胞功能活跃[1，2]. 我们认为β-EP阳性细胞在DU时分泌的β-EP增多可能与以下因素有关.
, 百拇医药
3.1 与DU的发生有关 大鼠禁食状态，胃窦和十二指肠段β-EP含量比进食期高，并伴有胃运动减慢，提示β-EP可能通过肌间神经丛，抑制乙酰胆碱导致的平滑肌收缩[3]；而人在生理状态及小剂量静脉注射β-EP时，可引起进食期间幽门肌肉的收缩. 我们推测DU β-EP阳性细胞释放的β-EP增多，可使十二指肠运动减慢，十二指肠与胃酸接触时间过长，从而导致溃疡的发生.
3.2 与胃酸调节有关 实验研究表明，胃肠道内分泌细胞可参与溃疡的自愈过程[3]. 人胃窦粘膜在pH 4.0或2.0的孵育液中，其释放的β-EP升高2.3～9.8倍，而在葡萄糖或氨基酸中则不升高，表明酸能剌激β-EP的分泌[4]，大鼠第三脑室注射β-EP后，出现剂量依赖地抑制基础胃酸分泌[5]. 本研究DU组β-EP含量减少也可能是一种继发改变，在各种原因引起溃疡后，通过β-EP释放增加，从而抑制胃酸分泌，对胃粘膜起保护作用，参与DU的自愈. 可通过制作动物DU动物模型，进一步验证溃疡愈合过程中上述变化.
, http://www.100md.com
4 参考文献
1 Ren JX, Zhou JY. The immunoelectron microscopic observation and radioimmunoassay of β-endorphin immunoreactive material
in human antral mucosa during duodenal ulcer. Chinese J Histochem Cytochem, 1993;3(Suppl):118-119
2 Tang J, Zhang XY, Chen XT. Changes and significance of immunoreactive β-endorphin in gastric mucosa of patients with benign
, 百拇医药
and maligmant gastric disease. J Chin Med, 1990;103:308-311
3 Orwoll ES, Kendall JW. β-endorphin and drenocorticotropin in extrapitritary sites; gastrointestinal tract.
Endocrinology, 1980;107:438-442
4 Matsumura M, Wada H, Saito S. Effect of solution low pH on release of β-endorphin-like immunoreactivity and ACTH-like
immunoreactivity from human gastric antral mucosa in vitro. Gastroenterol Jpn, 1983;18:210-215
5 Roze C, Dubrasquet M, Chaniot J, Vaille C. Central inhibition of basal pancreatic and gastric secretiuons by β-endorphin in
rats. Gastroenterology, 1980;79:659-664, 百拇医药(任君旭1 高增贺2 周济远1)
*国家自然科学基金资助项目，No.38970430
项目负责人 任君旭张家口医学院 河北省张家口市 075029
收稿日期 1998-12-21 接收日期 1999-03-01
Subject headings duodenal ulcer; gastric mucosa; β-endorphin
主题词 十二指肠溃疡；胃粘膜；β-内啡肽
, 百拇医药
研究应用免疫组织化学PAP法显示胃窦幽门腺β-内啡肽(β-EP)阳性细胞，通过真彩色图象分析系统，检测非病变区胃窦幽门腺β-EP阳性细胞的阳性反应点灰度和面积，计算灰度密度R，以探讨与溃疡的关系，并为十二指肠溃疡幽门腺β-EP阳性反应细胞β-EP含量分析提供依据.
1 材料和方法
1.1 材料 成人男性胃窦粘膜标本10例，其中十二指肠溃疡(DU)和浅表性胃炎(对照组Con)各5例. 所有病例均经内镜证实，标本取距幽门口2cm肉眼下非病变区胃窦前壁粘膜，4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，连续切片厚6μm.
1.2 方法 ①免疫组织化学染色以Sterberger PAP法显示β-EP阳性细胞. ②图象分析用XY-540型生物医学真彩色图象分析仪测试，图象监视器窗口为512×512象素点，在以FORTRAN语言编程软件系统支持下自动开窗128×128象素点，受检切片在Olympus BH2显微镜下放大400倍，检测DU组和Con组β-EP阳性细胞，随机检测DU组15个、Con组15个，测定每个β-EP阳性细胞阳性反应灰度G和阳性反应点面积A，计算灰度密度R，R=G/A(μm-2). 灰度密度参数与反应强度成反比，灰度密度可客观地反映单位面积β-EP阳性反应程度.
, 百拇医药
2 结果
胃窦幽门腺β-EP阳性细胞胞质呈蓝色，细胞核为阴性，对照实验均为阴性，β-EP阳性细胞主要分布于幽门腺腺体中下部，个别散在于底部，DU组可见该细胞成团分布，细胞形态多样，以锥体形、梭形和不规则为主，有的细胞有突起. 图象分析结果为DU组β-EP阳性反应灰度密度增大(0.22±0.04)，与对照组(0.14±0.04)相比差异显著(P<0.01).
3 讨论
本研究首次应用真彩色图象分析仪检测了DU组和Con组非病变区胃窦粘膜幽门腺β-EP阳性细胞，DU时β-EP阳性细胞阳性反应区灰度密度明显增大，表明其细胞内β-EP含量减少，表明非病变区胃窦粘膜β-EP细胞功能活跃[1，2]. 我们认为β-EP阳性细胞在DU时分泌的β-EP增多可能与以下因素有关.
, 百拇医药
3.1 与DU的发生有关 大鼠禁食状态，胃窦和十二指肠段β-EP含量比进食期高，并伴有胃运动减慢，提示β-EP可能通过肌间神经丛，抑制乙酰胆碱导致的平滑肌收缩[3]；而人在生理状态及小剂量静脉注射β-EP时，可引起进食期间幽门肌肉的收缩. 我们推测DU β-EP阳性细胞释放的β-EP增多，可使十二指肠运动减慢，十二指肠与胃酸接触时间过长，从而导致溃疡的发生.
3.2 与胃酸调节有关 实验研究表明，胃肠道内分泌细胞可参与溃疡的自愈过程[3]. 人胃窦粘膜在pH 4.0或2.0的孵育液中，其释放的β-EP升高2.3～9.8倍，而在葡萄糖或氨基酸中则不升高，表明酸能剌激β-EP的分泌[4]，大鼠第三脑室注射β-EP后，出现剂量依赖地抑制基础胃酸分泌[5]. 本研究DU组β-EP含量减少也可能是一种继发改变，在各种原因引起溃疡后，通过β-EP释放增加，从而抑制胃酸分泌，对胃粘膜起保护作用，参与DU的自愈. 可通过制作动物DU动物模型，进一步验证溃疡愈合过程中上述变化.
, http://www.100md.com
4 参考文献
1 Ren JX, Zhou JY. The immunoelectron microscopic observation and radioimmunoassay of β-endorphin immunoreactive material
in human antral mucosa during duodenal ulcer. Chinese J Histochem Cytochem, 1993;3(Suppl):118-119
2 Tang J, Zhang XY, Chen XT. Changes and significance of immunoreactive β-endorphin in gastric mucosa of patients with benign
, 百拇医药
and maligmant gastric disease. J Chin Med, 1990;103:308-311
3 Orwoll ES, Kendall JW. β-endorphin and drenocorticotropin in extrapitritary sites; gastrointestinal tract.
Endocrinology, 1980;107:438-442
4 Matsumura M, Wada H, Saito S. Effect of solution low pH on release of β-endorphin-like immunoreactivity and ACTH-like
immunoreactivity from human gastric antral mucosa in vitro. Gastroenterol Jpn, 1983;18:210-215
5 Roze C, Dubrasquet M, Chaniot J, Vaille C. Central inhibition of basal pancreatic and gastric secretiuons by β-endorphin in
rats. Gastroenterology, 1980;79:659-664, 百拇医药(任君旭1 高增贺2 周济远1)