幽门螺杆菌CagA与胃十二指肠溃疡发病关系的病例对照研究
1陕西省西安市中心医院消化科 陕西省西安市 710003
2陕西省西安市第一医院消化科
3第四军医大学全军基因诊断技术研究所
项目负责人 张玲霞陕西省西安市中心医院消化科 陕西省西安市 710003
收稿日期 1999-03-06 接收日期 1999-05-01
Subject headings Helicobacter pylori; stomach ulcer; duodenal ulcer; Cytotoxin-associated CagA
, 百拇医药
主题词 螺杆菌，幽门；胃溃疡；十二指肠溃疡；细胞毒素相关蛋白A
近年研究表明，消化性溃疡(PU)的发生是众多因素共同作用的结果. 幽门螺杆菌(Hp)的感染与溃疡的发生密切相关，Hp感染后能否致病取决于其不同的毒力株. 研究认为，Hp毒素在PU的发生中起着极其重要的作用，产生细胞毒素相关蛋白A(CagA)及细胞空泡毒素A(VacA)Hp菌株具有很强的致病能力，而一半以上的Hp菌株表达CagA,CagA与慢性胃炎及PU有密切关系[1]. 我们采用病例对照研究方法，旨在探讨国人CagA阳性Hp感染及相关危险因素与PU发病的关系.
1 材料和方法
1.1 材料 采用病例对照研究，病例组与对照组配比比例为1∶2，配比因素为性别、民族、年龄(相差5岁以内). 病例组全部为西安市中心医院消化科自1997-10/1998-10连续住院的患者，经内镜检查及病理检查证实为活动期胃溃疡(GU)及十二指肠溃疡(DU). 对照组分为二组，对照1组为同期住院的本科及其他科住院的非胃十二指肠疾病患者；对照2组为同期普查健康人群.
, 百拇医药
1.2 方法 采集末梢血200μL，分离血清50μL保存于-20℃冰箱，待检测抗Hp-CagA抗体. 血清Hp-CagA抗体的检测采用斑点金免疫渗滤法[2].
2 结果
共调查GU 100例，其中男84例，女16例，年龄18岁～76岁，平均46.8岁. DU 100例，其中男82例，女18例，年龄16岁～72岁，平均42.8岁. DU的发病高峰主要集中在30岁～40岁，其间CagA的感染率较高；GU的发病高峰主要集中在50岁～60岁，其间CagA的感染率较高(表1). 后者较前者晚10岁左右发病. 无论是发生在胃窦、胃角及胃体的GU，还是发生在球前部及球后部的DU，均显示较高的CagA阳性Hp感染率. 胃粘膜急性炎症改变较慢性炎症改变时CagA阳性Hp感染率高，但二者相比，差异无显著意义(P>0.05)；随着胃粘膜萎缩程度的增加及粘膜肠化生程度的加重，CagA阳性Hp感染率呈逐渐增加趋势，但随着上皮细胞的不典型增生程度的增加，CagA感染呈下降趋势，统计分析差异仍无显著意义(P>0.05).GU组与对照1组及对照2组的配比研究中，GU组的CagA阳性Hp感染率显著高于两个对照组(P<0.05，表2).DU组与对照1组及对照2组的配比研究中，DU组的CagA阳性Hp感染率显著高于两个对照组(P<0.05，表3).
, 百拇医药
表1 各年龄段CagA阳性Hp感染率的比较
, 百拇医药
表2 GU与对照组CagA阳性Hp感染的比较
, http://www.100md.com
表3 DU与对照组CagA阳性Hp感染的比较
, 百拇医药
3 讨论
我们首次在国内外建立了斑点金免疫渗滤法(DIGFA)并研制成功了试剂盒来检测血中抗Hp CagA IgG. 该方法的敏感性为95%，特异性为98.7%，总符合率为97.5%，可重复性好[2]，已于1998年通过了陕西省科委组织的鉴定，并获准在临床推广使用. 结果显示，在不同的年龄均可发生CagA阳性Hp感染，但GU主要集中在50岁～60岁，DU主要集中在30岁～40岁. 这种现象可能与遗传因素、机体的内外环境及社会因素等有关. 本研究表明，CagA阳性Hp感染率在男女性别上无显著性差异(P>0.05)；病例组CagA阳性Hp感染率远较对照组者高(P<0.05)；不同部位的溃疡，均显示出较高的CagA阳性Hp感染率；胃粘膜急性炎症者CagA阳性Hp感染率远较慢性胃炎者高；随着萎缩及肠化生程度的加重，CagA阳性Hp感染呈逐渐增加趋势；但随着不典型增生程度的加重，CagA阳性Hp感染并未显示出逐渐增加趋势，这与文献报道的结果相反[3].
, 百拇医药
因此，有必要增加样本量进行进一步的研究.Covacci et al[4]曾用ELISA法检测了患者对CagA重组基因的免疫反应，发现75.3%的GU患者血清抗体阳性，100%的DU患者血清抗体阳性. Lage Ap et al[5]报道，91.7%的十二指肠溃疡患者受到CagA阳性Hp菌株的感染，而慢性胃炎患者CagA阳性Hp菌株的感染率为73%. Ching et al[1]也报道，抗CagA抗体在DU患者中检出率为84%，在GU中阳性率为80%，其阳性显著性均高于非溃疡性消化不良者或无症状对照者，他们认为抗CagA抗体阳性可做为PU的一项临床指标看待. Maeda et al[6]报道，在132例Hp阳性患者的血清中，抗CagA抗体在GU中的检出率为90%，在DU中的检出率为87%，但与正常胃粘膜者相比，差异无显著性. 我们曾经采用斑点金免疫渗滤法对220例Hp阳性的胃疾病患者血清中进行抗CagA抗体检测，结果显示，GU中抗CagA抗体的阳性率为92.1%，DU中抗CagA抗体的阳性率为95.4%[7]，与国外学者报道的结果相似. 由此可见，CagA与GU及DU的发生密切相关.
, 百拇医药
4 参考文献
1 Ching CK, Wing BCY, Kwod E, Ong L, Covacci A, Lam SK. Prevalence of cagA bearing Helicobacter pylori strains detected by
the anti-cagA assay in patients with peptic ulcer disease and in controls. Am J Gastroenterol, 1996;91:949-953
2 阎小君，张沥，韩锋产. 斑点金免疫渗滤试验快速检测血清中抗幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A抗体方法的建立及临床应用.
新消化病杂志，1998；5：606-608
, http://www.100md.com
3 雷道年. 幽门螺杆菌感染的病理学特点. 见：胡伏莲，周殿元，贾博奇主编. 幽门螺杆菌感染的基础与临床. 第1版.
北京：中国科学技术出版社，1997：79-83
4 Covacci A, Censini S, Bugnoli M, Petracca R, Burroni D, Macchia G. Molecular characterization of the 128-kDa immunodominant
antigen of Helicobacter pylori associated with cytotoxicity and duodenel ulcer. Proc Natl Acad Sci USA, 1993;90:5791-5795
5 Lage AP, Godfroid E, Fauconnier A, Burette A, Butzler JP, Bollen A. Diagnosis of Helicobacter pylori infection by PCR:
, http://www.100md.com
comparison with other invasive technigues and ditection of zagA gene in gastric biopsy specimens.J Clin Microbiol,
1995;33:2752-2756
6 Maeda S, Kanai F, Ogura K, Yoshida H, Ikenoue T, Takahashi M, Kawabe T, Shiratori Y, Omata M. High seropositivity of anti
CagA antibody in Helicobacter pylori-infected patients irrelevant to peptic ulcers and normal mucosa in Japan.
Dig Dis Sci, 1997;42:1841-1847
7 张玲霞，张沥，刘永国，张宁霞. 幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A与Hp相关性胃疾病的关系. 中国实用内科杂志，1999；19:226-227, 百拇医药(张玲霞1 张 沥1 张宁霞1 刘永国2 阎小君3 韩锋产3 侯 瑜3)
2陕西省西安市第一医院消化科
3第四军医大学全军基因诊断技术研究所
项目负责人 张玲霞陕西省西安市中心医院消化科 陕西省西安市 710003
收稿日期 1999-03-06 接收日期 1999-05-01
Subject headings Helicobacter pylori; stomach ulcer; duodenal ulcer; Cytotoxin-associated CagA
, 百拇医药
主题词 螺杆菌，幽门；胃溃疡；十二指肠溃疡；细胞毒素相关蛋白A
近年研究表明，消化性溃疡(PU)的发生是众多因素共同作用的结果. 幽门螺杆菌(Hp)的感染与溃疡的发生密切相关，Hp感染后能否致病取决于其不同的毒力株. 研究认为，Hp毒素在PU的发生中起着极其重要的作用，产生细胞毒素相关蛋白A(CagA)及细胞空泡毒素A(VacA)Hp菌株具有很强的致病能力，而一半以上的Hp菌株表达CagA,CagA与慢性胃炎及PU有密切关系[1]. 我们采用病例对照研究方法，旨在探讨国人CagA阳性Hp感染及相关危险因素与PU发病的关系.
1 材料和方法
1.1 材料 采用病例对照研究，病例组与对照组配比比例为1∶2，配比因素为性别、民族、年龄(相差5岁以内). 病例组全部为西安市中心医院消化科自1997-10/1998-10连续住院的患者，经内镜检查及病理检查证实为活动期胃溃疡(GU)及十二指肠溃疡(DU). 对照组分为二组，对照1组为同期住院的本科及其他科住院的非胃十二指肠疾病患者；对照2组为同期普查健康人群.
, 百拇医药
1.2 方法 采集末梢血200μL，分离血清50μL保存于-20℃冰箱，待检测抗Hp-CagA抗体. 血清Hp-CagA抗体的检测采用斑点金免疫渗滤法[2].
2 结果
共调查GU 100例，其中男84例，女16例，年龄18岁～76岁，平均46.8岁. DU 100例，其中男82例，女18例，年龄16岁～72岁，平均42.8岁. DU的发病高峰主要集中在30岁～40岁，其间CagA的感染率较高；GU的发病高峰主要集中在50岁～60岁，其间CagA的感染率较高(表1). 后者较前者晚10岁左右发病. 无论是发生在胃窦、胃角及胃体的GU，还是发生在球前部及球后部的DU，均显示较高的CagA阳性Hp感染率. 胃粘膜急性炎症改变较慢性炎症改变时CagA阳性Hp感染率高，但二者相比，差异无显著意义(P>0.05)；随着胃粘膜萎缩程度的增加及粘膜肠化生程度的加重，CagA阳性Hp感染率呈逐渐增加趋势，但随着上皮细胞的不典型增生程度的增加，CagA感染呈下降趋势，统计分析差异仍无显著意义(P>0.05).GU组与对照1组及对照2组的配比研究中，GU组的CagA阳性Hp感染率显著高于两个对照组(P<0.05，表2).DU组与对照1组及对照2组的配比研究中，DU组的CagA阳性Hp感染率显著高于两个对照组(P<0.05，表3).
, 百拇医药
表1 各年龄段CagA阳性Hp感染率的比较
| 年龄段 (岁) | 十二指肠溃疡 | 胃溃疡 | ||||
| 总例数 | CagA+n | % | 总例数 | CagA+n | % | |
| 19～ | 1 | 1 | 100 | |||
| 20～ | 11 | 10 | 90.9 | 12 | 9 | 75 |
| 30～ | 33 | 32 | 96.9 | 13 | 10 | 76.9 |
| 40～ | 33 | 31 | 93.9 | 13 | 11 | 84.6 |
| 50～ | 5 | 4 | 80 | 23 | 21 | 91.3 |
| 60～ | 10 | 8 | 80 | 32 | 30 | 93.7 |
| 70～ | 7 | 6 | 85.7 | 7 | 5 | 71.4 |
, 百拇医药
表2 GU与对照组CagA阳性Hp感染的比较
| GU | 对照1 | 对照2 | ||
| CagA+ | CagA- | CagA+ | CagA- | |
| CagA+ | 36 | 50 | 34 | 52 |
| CagA- | 10 | 4 | 10 | 4 |
| OR | 5.0 | 5.2 | ||
| χ2 | 4.24 | 4.77 | ||
| P | <0.05 | <0.05 |
, http://www.100md.com
表3 DU与对照组CagA阳性Hp感染的比较
| GU | 对照1 | 对照2 | ||
| CagA+ | CagA- | CagA+ | CagA- | |
| CagA+ | 34 | 58 | 36 | 56 |
| CagA- | 6 | 2 | 10 | 2 |
| OR | 9.67 | 9.33 | ||
| χ2 | 4.44 | 3.89 | ||
| P | <0.05 | <0.05 |
, 百拇医药
3 讨论
我们首次在国内外建立了斑点金免疫渗滤法(DIGFA)并研制成功了试剂盒来检测血中抗Hp CagA IgG. 该方法的敏感性为95%，特异性为98.7%，总符合率为97.5%，可重复性好[2]，已于1998年通过了陕西省科委组织的鉴定，并获准在临床推广使用. 结果显示，在不同的年龄均可发生CagA阳性Hp感染，但GU主要集中在50岁～60岁，DU主要集中在30岁～40岁. 这种现象可能与遗传因素、机体的内外环境及社会因素等有关. 本研究表明，CagA阳性Hp感染率在男女性别上无显著性差异(P>0.05)；病例组CagA阳性Hp感染率远较对照组者高(P<0.05)；不同部位的溃疡，均显示出较高的CagA阳性Hp感染率；胃粘膜急性炎症者CagA阳性Hp感染率远较慢性胃炎者高；随着萎缩及肠化生程度的加重，CagA阳性Hp感染呈逐渐增加趋势；但随着不典型增生程度的加重，CagA阳性Hp感染并未显示出逐渐增加趋势，这与文献报道的结果相反[3].
, 百拇医药
因此，有必要增加样本量进行进一步的研究.Covacci et al[4]曾用ELISA法检测了患者对CagA重组基因的免疫反应，发现75.3%的GU患者血清抗体阳性，100%的DU患者血清抗体阳性. Lage Ap et al[5]报道，91.7%的十二指肠溃疡患者受到CagA阳性Hp菌株的感染，而慢性胃炎患者CagA阳性Hp菌株的感染率为73%. Ching et al[1]也报道，抗CagA抗体在DU患者中检出率为84%，在GU中阳性率为80%，其阳性显著性均高于非溃疡性消化不良者或无症状对照者，他们认为抗CagA抗体阳性可做为PU的一项临床指标看待. Maeda et al[6]报道，在132例Hp阳性患者的血清中，抗CagA抗体在GU中的检出率为90%，在DU中的检出率为87%，但与正常胃粘膜者相比，差异无显著性. 我们曾经采用斑点金免疫渗滤法对220例Hp阳性的胃疾病患者血清中进行抗CagA抗体检测，结果显示，GU中抗CagA抗体的阳性率为92.1%，DU中抗CagA抗体的阳性率为95.4%[7]，与国外学者报道的结果相似. 由此可见，CagA与GU及DU的发生密切相关.
, 百拇医药
4 参考文献
1 Ching CK, Wing BCY, Kwod E, Ong L, Covacci A, Lam SK. Prevalence of cagA bearing Helicobacter pylori strains detected by
the anti-cagA assay in patients with peptic ulcer disease and in controls. Am J Gastroenterol, 1996;91:949-953
2 阎小君，张沥，韩锋产. 斑点金免疫渗滤试验快速检测血清中抗幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A抗体方法的建立及临床应用.
新消化病杂志，1998；5：606-608
, http://www.100md.com
3 雷道年. 幽门螺杆菌感染的病理学特点. 见：胡伏莲，周殿元，贾博奇主编. 幽门螺杆菌感染的基础与临床. 第1版.
北京：中国科学技术出版社，1997：79-83
4 Covacci A, Censini S, Bugnoli M, Petracca R, Burroni D, Macchia G. Molecular characterization of the 128-kDa immunodominant
antigen of Helicobacter pylori associated with cytotoxicity and duodenel ulcer. Proc Natl Acad Sci USA, 1993;90:5791-5795
5 Lage AP, Godfroid E, Fauconnier A, Burette A, Butzler JP, Bollen A. Diagnosis of Helicobacter pylori infection by PCR:
, http://www.100md.com
comparison with other invasive technigues and ditection of zagA gene in gastric biopsy specimens.J Clin Microbiol,
1995;33:2752-2756
6 Maeda S, Kanai F, Ogura K, Yoshida H, Ikenoue T, Takahashi M, Kawabe T, Shiratori Y, Omata M. High seropositivity of anti
CagA antibody in Helicobacter pylori-infected patients irrelevant to peptic ulcers and normal mucosa in Japan.
Dig Dis Sci, 1997;42:1841-1847
7 张玲霞，张沥，刘永国，张宁霞. 幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A与Hp相关性胃疾病的关系. 中国实用内科杂志，1999；19:226-227, 百拇医药(张玲霞1 张 沥1 张宁霞1 刘永国2 阎小君3 韩锋产3 侯 瑜3)