小鼠吸入70号汽油对肝脏的影响
中国人民解放军兰州医学高等专科学校病理教研室 甘肃省兰州市 730020
项目负责人 黄应堂中国人民解放军兰州医学高等专科学校病理教研室 甘肃省兰州市 730020
收稿日期 1999-04-08
Subject headings gasoline poisoning; automobile exhaust; liver/pathology
主题词 汽油中毒；汽车废气；肝/病理学
汽油作为最常用的车用动力燃料和有机溶剂，许多工业部门广泛使用. 因其具有高度挥发性，直接或间接接触者不可避免地受其影响. 本实验用70号汽油给小鼠慢性吸入，以探讨汽油对肝脏的毒性作用.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 本实验用昆明1号标准小白鼠100只，雌雄各半，随机分为对照组与实验组，每组25只，实验组分为500mg/8h，800mg/8h，1000mg/8h 3组.
1.2 方法 将所需汽油量注入特制实验箱内，每天实验时将小鼠连同铁笼自一小插门放入实验箱内(每组1个)，随机将汽油按量注入实验箱内的培养皿，关闭插门，让其自然挥发. 每天8h后取出动物，置自然通风处. 实验时间3mo. 实验所需汽油浓度经气相色谱仪(岛津GC-9A气相色谱仪)测定监控. 所需汽油为标准70号汽油. 对照组动物置同体积实验箱内，不加汽油，放置时间同实验组. 实验3mo后各组动物行断脊髓活杀，100mL/L磷酸缓冲福尔马林液固定，石蜡包埋，切片，HE染色，光学显微镜观察. 每例标本观察3张切片，分别在低倍镜下计数每张切片肝细胞坏死数、中央静脉及周围肝窦扩张数；门管区炎细胞浸润，每张切片计数10个门管区，取其平均值作为单张切片炎细胞浸润数.
, 百拇医药
统计学处理 实验数据经t检验.
2 结果
对照组肝小叶结构完好，可见散在单个肝细胞坏死，每张切片平均5.53个. 坏死部或周围灶性中性粒细胞浸润. 门管区散在中性粒细胞、淋巴细胞浸润，每张切片平均9.1个. 实验3组均见中央静脉、肝窦和门管区程度不等充血，肝细胞浊肿、脂肪变性灶性分布，肝细胞坏死部中性粒细胞浸润. 代表性改变：肝细胞死. 3组肝细胞坏死随吸入汽油量增加按级递增，即500mg/8h以中度肝细胞坏死为主；800mg/8h，1000mg/8h以重度坏死为主(表1). 不但对照组与实验组差异非常明显(P<0.01)，实验组之间也差异显著(P<0.01，表2). 门管区炎细胞浸润. 门管区炎细胞浸润以中性粒细胞为主，对照组与实验组，以及实验组之间差异显著. 这种变化随吸入汽油量增加呈现递增趋势(表1，2).
中央静脉及周围肝窦扩张. 对照组与实验组均见这种变化. 特点为中央静脉不规则扩张，周围肝窦呈串珠状、不规则扩张. 我们发现，这种变化随肝细胞坏死、门管区炎症反应加重而减轻. 对照组与500mg/8h组差异非常明显(P<0.01)；而500mg/8h与1000mg/8h相比，差异也非常明显(P<0.01).
, 百拇医药
表1 小鼠吸入汽油后肝脏受损情况比较(n)
, 百拇医药
注：各组实验动物均为25只.
表2 小鼠吸入汽油后肝脏的主要病变(±s)
, 百拇医药
aP<0.01，vs ①，③，④；bP<0.01，vs ①，②，④；cP<0.01，vs ①，②，③；dP<0.01，vs ①，③，④；eP<0.01，vs ①，②，④；fP<0.01，vs ①，②，③；gP<0.01，vs ①，③，④；iP<0.05，vs ①，③.
3 讨论
我国有关部门规定，工作场境中汽油浓度应低于350mg/m3[1]. 实际工作中，因汽油的易挥发性或工作所需，实际接触浓度远远高于国家限定的标准. 甚至，不少直接接触人员有用嘴吸汽油，用汽油洗油污等不良习惯，接触浓度更远远高于国家规定的标准. 文献报告，慢性汽油中毒对机体神经、呼吸、消化、造血等器官产生不良影响，但大多限于机能方面的观察[2，3]. 我们实验发现，慢性汽油中毒可引起心脏、大脑、肾脏等器官的明显的形态学损伤[4-6]. 至于慢性汽油吸入能否直接引起肝脏的形态变化文献报告甚少.
, 百拇医药
我们观察了小鼠吸入汽油3mo后肝脏的形态学变化. 结果发现，肝细胞坏死、门管区炎细胞浸润，不但对照组与实验组间差异明显，实验组间也有明显差异. 肝脏损伤的另一个显著特点是中央静脉及周围肝窦扩张. 这种变化与肝细胞坏死、门管区炎细胞浸润的程度呈反比，即随上述病变加重而减轻. 1000mg/8h组与500mg/8h组相比差异非常明显(P<0.01). 我们以为，这种改变可能是判断肝脏早期损伤的特征之一. 本实验每天吸入汽油8h，连续观察3mo，即使是吸入500mg/d，70%以上的动物发生中度肝细胞坏死和炎症反应. 因此，在高浓度汽油场境中工作的人员务必提高防护意识，加强防范措施.
4 参考文献
1 杨文平. 油库安全. 北京：解放军出版社，1998；158-161
2 刘吉昌. 慢性汽油中毒调查研究. 职业医学，1987；14：54-55
3 高桂珍. 修订溶剂汽油卫生标准的研究. 中华预防医学杂志，1987;21:283-284
4 黄应堂，杨雪梅，王刚，杨东海. 慢性吸入含铅汽油对心脏形态学影响的实验观察. 中国公共卫生，1999；15：20
5 黄应堂，杨雪梅，梁少杰，周其全. 吸入70号汽油对大脑影响的形态学观察. 中国公共卫生学报，1993；12：370-371
6 黄应堂，杨雪梅，周其全. 小鼠吸入70号汽油对肾脏病理组织学损害的观察. 中国公共卫生学报，1997；16：119, 百拇医药(黄应堂 杨雪梅 张 菡)
项目负责人 黄应堂中国人民解放军兰州医学高等专科学校病理教研室 甘肃省兰州市 730020
收稿日期 1999-04-08
Subject headings gasoline poisoning; automobile exhaust; liver/pathology
主题词 汽油中毒；汽车废气；肝/病理学
汽油作为最常用的车用动力燃料和有机溶剂，许多工业部门广泛使用. 因其具有高度挥发性，直接或间接接触者不可避免地受其影响. 本实验用70号汽油给小鼠慢性吸入，以探讨汽油对肝脏的毒性作用.
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1 材料和方法
1.1 材料 本实验用昆明1号标准小白鼠100只，雌雄各半，随机分为对照组与实验组，每组25只，实验组分为500mg/8h，800mg/8h，1000mg/8h 3组.
1.2 方法 将所需汽油量注入特制实验箱内，每天实验时将小鼠连同铁笼自一小插门放入实验箱内(每组1个)，随机将汽油按量注入实验箱内的培养皿，关闭插门，让其自然挥发. 每天8h后取出动物，置自然通风处. 实验时间3mo. 实验所需汽油浓度经气相色谱仪(岛津GC-9A气相色谱仪)测定监控. 所需汽油为标准70号汽油. 对照组动物置同体积实验箱内，不加汽油，放置时间同实验组. 实验3mo后各组动物行断脊髓活杀，100mL/L磷酸缓冲福尔马林液固定，石蜡包埋，切片，HE染色，光学显微镜观察. 每例标本观察3张切片，分别在低倍镜下计数每张切片肝细胞坏死数、中央静脉及周围肝窦扩张数；门管区炎细胞浸润，每张切片计数10个门管区，取其平均值作为单张切片炎细胞浸润数.
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统计学处理 实验数据经t检验.
2 结果
对照组肝小叶结构完好，可见散在单个肝细胞坏死，每张切片平均5.53个. 坏死部或周围灶性中性粒细胞浸润. 门管区散在中性粒细胞、淋巴细胞浸润，每张切片平均9.1个. 实验3组均见中央静脉、肝窦和门管区程度不等充血，肝细胞浊肿、脂肪变性灶性分布，肝细胞坏死部中性粒细胞浸润. 代表性改变：肝细胞死. 3组肝细胞坏死随吸入汽油量增加按级递增，即500mg/8h以中度肝细胞坏死为主；800mg/8h，1000mg/8h以重度坏死为主(表1). 不但对照组与实验组差异非常明显(P<0.01)，实验组之间也差异显著(P<0.01，表2). 门管区炎细胞浸润. 门管区炎细胞浸润以中性粒细胞为主，对照组与实验组，以及实验组之间差异显著. 这种变化随吸入汽油量增加呈现递增趋势(表1，2).
中央静脉及周围肝窦扩张. 对照组与实验组均见这种变化. 特点为中央静脉不规则扩张，周围肝窦呈串珠状、不规则扩张. 我们发现，这种变化随肝细胞坏死、门管区炎症反应加重而减轻. 对照组与500mg/8h组差异非常明显(P<0.01)；而500mg/8h与1000mg/8h相比，差异也非常明显(P<0.01).
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表1 小鼠吸入汽油后肝脏受损情况比较(n)
| 组别及病变数 | 细胞坏死 | 炎细胞浸润 |
| 对照组 | ||
| 1～9个 | 20 | 22 |
| 10个以上 | 2 | 6 |
| 500mg | ||
| 10～19个 | 5 | 8 |
| 20～29个 | 18 | 14 |
| 30个以上 | 3 | 4 |
| 800mg | ||
| 10～19个 | 2 | 4 |
| 20～29个 | 2 | 2 |
| 30个以上 | 17 | 14 |
| 1000mg | ||
| 10～19个 | 3 | 4 |
| 20～29个 | 8 | 4 |
| 30～39个 | 10 | 4 |
| 40个以上 | 18 | 19 |
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注：各组实验动物均为25只.
表2 小鼠吸入汽油后肝脏的主要病变(±s)
| 组别 | 肝细胞坏死数 | 门管区炎细胞浸润数 | 中央静脉及周围肝窦扩张数 |
| (1)对照组 | 5.53±2.70 | 9.13±3.85 | 9.20±4.78 |
| (2)500mg | 24.28±7.63a | 24.21±6.74d | 22.78±5.28g |
| (3)800mg | 33.77±6.99b | 31.15±6.93e | 8.23±4.85 |
| (4)1000mg | 45.20±14.79c | 42.47±15.21f | 11.93±5.05i |
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aP<0.01，vs ①，③，④；bP<0.01，vs ①，②，④；cP<0.01，vs ①，②，③；dP<0.01，vs ①，③，④；eP<0.01，vs ①，②，④；fP<0.01，vs ①，②，③；gP<0.01，vs ①，③，④；iP<0.05，vs ①，③.
3 讨论
我国有关部门规定，工作场境中汽油浓度应低于350mg/m3[1]. 实际工作中，因汽油的易挥发性或工作所需，实际接触浓度远远高于国家限定的标准. 甚至，不少直接接触人员有用嘴吸汽油，用汽油洗油污等不良习惯，接触浓度更远远高于国家规定的标准. 文献报告，慢性汽油中毒对机体神经、呼吸、消化、造血等器官产生不良影响，但大多限于机能方面的观察[2，3]. 我们实验发现，慢性汽油中毒可引起心脏、大脑、肾脏等器官的明显的形态学损伤[4-6]. 至于慢性汽油吸入能否直接引起肝脏的形态变化文献报告甚少.
, 百拇医药
我们观察了小鼠吸入汽油3mo后肝脏的形态学变化. 结果发现，肝细胞坏死、门管区炎细胞浸润，不但对照组与实验组间差异明显，实验组间也有明显差异. 肝脏损伤的另一个显著特点是中央静脉及周围肝窦扩张. 这种变化与肝细胞坏死、门管区炎细胞浸润的程度呈反比，即随上述病变加重而减轻. 1000mg/8h组与500mg/8h组相比差异非常明显(P<0.01). 我们以为，这种改变可能是判断肝脏早期损伤的特征之一. 本实验每天吸入汽油8h，连续观察3mo，即使是吸入500mg/d，70%以上的动物发生中度肝细胞坏死和炎症反应. 因此，在高浓度汽油场境中工作的人员务必提高防护意识，加强防范措施.
4 参考文献
1 杨文平. 油库安全. 北京：解放军出版社，1998；158-161
2 刘吉昌. 慢性汽油中毒调查研究. 职业医学，1987；14：54-55
3 高桂珍. 修订溶剂汽油卫生标准的研究. 中华预防医学杂志，1987;21:283-284
4 黄应堂，杨雪梅，王刚，杨东海. 慢性吸入含铅汽油对心脏形态学影响的实验观察. 中国公共卫生，1999；15：20
5 黄应堂，杨雪梅，梁少杰，周其全. 吸入70号汽油对大脑影响的形态学观察. 中国公共卫生学报，1993；12：370-371
6 黄应堂，杨雪梅，周其全. 小鼠吸入70号汽油对肾脏病理组织学损害的观察. 中国公共卫生学报，1997；16：119, 百拇医药(黄应堂 杨雪梅 张 菡)