末梢血快速测定幽门螺杆菌IgG抗体
中国人民解放军空军86513部队医院 天津市 300074
项目负责人 杨燕中国人民解放军空军86513部队医院 天津市 300074
收稿日期 1999-05-08
Subject headings helicobacter pylori; antibody, bacterial/analysis; gastritis; stomach ulcer
主题词 螺杆菌，幽门；抗体，细菌/分析；胃炎；胃溃疡
目前用于Hp诊断的方法很多，如创伤性的有快速尿素酶试验(RUT)、组织病理切片染色、分离培养、聚合酶链反应(PCR)及其相关技术. 非创伤性的有血清学、尿素呼气试验. 下面是我院引用美国Bioage公司原料加工制成非创伤性的采用末梢血(40μL)快速检测幽门螺杆Hp-IgG抗体.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 1998-04/10因上消化道症状来我院胃肠门诊就诊，并行内镜检查的胃炎或消化性溃疡患者150例，其中男102例，年龄17岁～77岁，平均47岁. 女48例，年龄21岁～76岁，平均49岁. 全部病例既往均未进行过系统的杀灭Hp的治疗，并且1mo内未服用过抗生素及铋剂等影响检测结果的药物.
1.2 方法
1.2.1 Hp-IgG检测卡 引进美国Bioage公司原料加工而成的Hp-IgG检测卡，用毛细管吸取被检患者(无名指、耳垂均无冻伤等外部炎症)末梢血40μL加入测试卡上，5min后于“视窗”中观察结果. 被检血样中的Hp-IgG抗体与试验卡中的Hp高分子量的菌体蛋白抗原、染料结合，形成抗原-抗体附合物并被测试区的抗该复合物的抗体捕捉结合呈现红线. 如标本中无Hp抗体则测试区只结合反应区内的兰色素而形成兰线，即“视窗”内如果同时显示红线和兰线为阳性，只显示兰线为阴性. 没有任何标志出现者为失效，应重新更换测试卡测试.
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1.2.2 间接ELISA法 抽取静脉血2mL，待凝固后离心分离血清备用. 试剂盒由广东珠海丽珠集团、丽珠试剂厂生产，经过加样、水浴、冲洗后测得，用酶标仪于450mm处读数，吸光度小于临界值为阴性，大于临界值为阳性.
1.2.3 快速尿素酶法(RUT) 试剂盒由福建三强生物化工公司出品. 内镜于胃窦、胃体部各取粘膜活检并放入检测井中，加入检测试剂后5min～10min内观察结果. 出现红颜色为阳性，无色为阴性.
1.2.4 组织涂片染色法 内镜活检标本(与尿素酶法活检部位相同)于玻片上制成涂片，革兰染色，油镜下观察. 见到革兰染色阳性的“S”形或“海鸥”形的典型的弯曲菌样细菌为阳性，否则为阴性.
2 结果
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按照4种方法各自的阳性标准，Hp感染的检出情况如表1. 按照目前公认的满足条件，制订本研究的Hp阳性诊断标准为：①涂片见大量典型的“S”形或“海鸥”形的弯曲样细菌者；②涂片见少量典型的弯曲样细菌+RUT或ELISA法阳性者；③RUT和ELISA法同时阳性者，与Hp阳性标准比较，4种方法的检出准确性见表2.
表1 Hp感染的检出情况(n)
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表2 Hp感染检出的准确性
aP<0.05(U>1.9600),vs 涂片、试条、ELISA法.
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测试卡检测 Hp感染的阳性预测值为94%，阴性预测值为90%，与涂片法比较符合率为92%，与ELISA法比较符合率为99%.
3 讨论
测试卡测定Hp-IgG所用抗原是直接从培养的Hp中分离提取的多种高分子量的菌体蛋白，与其他弯曲菌，如空肠弯曲菌、胎儿弯曲菌、大肠杆菌等均无交叉反应. 对血液中Hp抗体测定的敏感度和特异度皆高，分别为95.6%与87.1%，证实此法对中国人群中Hp测定的敏感度和特异度均很高，它具有耗时少(5min)，准确度高、价廉、患者痛苦极小，与其他快速测定Hp抗体的方法比较，有用血量少(40μL)省时(全过程只需5min～10min)敏感度高(95.6%)，特异度(87.1%)高，因此在临床上对卫生设备简陋地处边远地方的小医院应用适合，尤其适合少年儿童、体弱多病的老年患者. 可作为筛选检查及大规模的Hp感染的流行病学调查和Hp根除后的定期随访., 百拇医药(杨 燕 侯淑萍 孙军强)
项目负责人 杨燕中国人民解放军空军86513部队医院 天津市 300074
收稿日期 1999-05-08
Subject headings helicobacter pylori; antibody, bacterial/analysis; gastritis; stomach ulcer
主题词 螺杆菌，幽门；抗体，细菌/分析；胃炎；胃溃疡
目前用于Hp诊断的方法很多，如创伤性的有快速尿素酶试验(RUT)、组织病理切片染色、分离培养、聚合酶链反应(PCR)及其相关技术. 非创伤性的有血清学、尿素呼气试验. 下面是我院引用美国Bioage公司原料加工制成非创伤性的采用末梢血(40μL)快速检测幽门螺杆Hp-IgG抗体.
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1 材料和方法
1.1 材料 1998-04/10因上消化道症状来我院胃肠门诊就诊，并行内镜检查的胃炎或消化性溃疡患者150例，其中男102例，年龄17岁～77岁，平均47岁. 女48例，年龄21岁～76岁，平均49岁. 全部病例既往均未进行过系统的杀灭Hp的治疗，并且1mo内未服用过抗生素及铋剂等影响检测结果的药物.
1.2 方法
1.2.1 Hp-IgG检测卡 引进美国Bioage公司原料加工而成的Hp-IgG检测卡，用毛细管吸取被检患者(无名指、耳垂均无冻伤等外部炎症)末梢血40μL加入测试卡上，5min后于“视窗”中观察结果. 被检血样中的Hp-IgG抗体与试验卡中的Hp高分子量的菌体蛋白抗原、染料结合，形成抗原-抗体附合物并被测试区的抗该复合物的抗体捕捉结合呈现红线. 如标本中无Hp抗体则测试区只结合反应区内的兰色素而形成兰线，即“视窗”内如果同时显示红线和兰线为阳性，只显示兰线为阴性. 没有任何标志出现者为失效，应重新更换测试卡测试.
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1.2.2 间接ELISA法 抽取静脉血2mL，待凝固后离心分离血清备用. 试剂盒由广东珠海丽珠集团、丽珠试剂厂生产，经过加样、水浴、冲洗后测得，用酶标仪于450mm处读数，吸光度小于临界值为阴性，大于临界值为阳性.
1.2.3 快速尿素酶法(RUT) 试剂盒由福建三强生物化工公司出品. 内镜于胃窦、胃体部各取粘膜活检并放入检测井中，加入检测试剂后5min～10min内观察结果. 出现红颜色为阳性，无色为阴性.
1.2.4 组织涂片染色法 内镜活检标本(与尿素酶法活检部位相同)于玻片上制成涂片，革兰染色，油镜下观察. 见到革兰染色阳性的“S”形或“海鸥”形的典型的弯曲菌样细菌为阳性，否则为阴性.
2 结果
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按照4种方法各自的阳性标准，Hp感染的检出情况如表1. 按照目前公认的满足条件，制订本研究的Hp阳性诊断标准为：①涂片见大量典型的“S”形或“海鸥”形的弯曲样细菌者；②涂片见少量典型的弯曲样细菌+RUT或ELISA法阳性者；③RUT和ELISA法同时阳性者，与Hp阳性标准比较，4种方法的检出准确性见表2.
表1 Hp感染的检出情况(n)
| 方法 | 测试卡 | ELISA | RUI | 涂片 |
| Hp(+) | 108 | 110 | 102 | 108 |
| Hp(-) | 42 | 40 | 48 | 42 |
| 合计 | 150 | 150 | 150 | 150 |
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表2 Hp感染检出的准确性
| 方法 | 阳性 | 假阳性 | 阴性 | 假阴性 | 敏感性(%) | 特异性(%) |
| 测试卡 | 99 | 6 | 40 | 5 | 95.6 | 87.1 |
| ELISA | 99 | 7 | 39 | 5 | 95.6 | 83.9 |
| RUT | 91 | 0 | 47 | 12 | 88.4a | 79.5a |
| 涂片 | 104 | 1 | 45 | 0 | 100.0 | 96.8 |
aP<0.05(U>1.9600),vs 涂片、试条、ELISA法.
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测试卡检测 Hp感染的阳性预测值为94%，阴性预测值为90%，与涂片法比较符合率为92%，与ELISA法比较符合率为99%.
3 讨论
测试卡测定Hp-IgG所用抗原是直接从培养的Hp中分离提取的多种高分子量的菌体蛋白，与其他弯曲菌，如空肠弯曲菌、胎儿弯曲菌、大肠杆菌等均无交叉反应. 对血液中Hp抗体测定的敏感度和特异度皆高，分别为95.6%与87.1%，证实此法对中国人群中Hp测定的敏感度和特异度均很高，它具有耗时少(5min)，准确度高、价廉、患者痛苦极小，与其他快速测定Hp抗体的方法比较，有用血量少(40μL)省时(全过程只需5min～10min)敏感度高(95.6%)，特异度(87.1%)高，因此在临床上对卫生设备简陋地处边远地方的小医院应用适合，尤其适合少年儿童、体弱多病的老年患者. 可作为筛选检查及大规模的Hp感染的流行病学调查和Hp根除后的定期随访., 百拇医药(杨 燕 侯淑萍 孙军强)