鱼腥草治疗溃疡性结肠炎的实验研究
中国人民解放军济南军区总医院消化科 山东省济南市 250031
项目负责人 江学良中国人民解放军济南军区总医院消化科 山东省济南市 250031
收稿日期 1999-06-15
Subject headings colitis, ulcerative/therapy; houttuynia cordata; sulfasalazine/therapeutic use
主题词 结肠炎，溃疡性/治疗；鱼腥草；柳氮磺吡啶/治疗应用
柳氮磺吡啶目前仍是治疗溃疡性结肠炎(UC)的主要药物，但其疗程长，副反应多，停药后易复发，疗效并不理想，因此，寻找更为理想有效，副反应少的药物成为UC研究的重点. 我们以前的实验发现鱼腥草蒸馏液灌肠可改善UC大鼠结肠动力紊乱[1]，本研究以柳氮磺吡啶作对照，进一步观察其治疗UC的作用.
, http://www.100md.com
1 材料和方法
封闭群成年Wistar大鼠30只，雌雄各半，质量250g～350g. 应用2，4-二硝基氯苯(DNCB)和乙酸复合法建立大鼠UC模型[2]；大鼠颈背部用100g/L Na2 S脱毛后，以20g/L DNCB丙酮液0.25mL滴背，1次/d，连续14d，d15以直径3mm尼龙导管经肛门插入结肠8cm处， 注入0.04mol/L(0.1%)DNCB乙醇(500mL/L)液0.25mL，d16同部位注入80mL/L乙酸溶液2mL，准确计时15s后，再用5mL生理盐水冲洗，30只大鼠随机分为3组，A组为空白对照组，给予生理盐水3mL灌肠，1次/d；B组为柳氮磺吡啶组，给予柳氮磺吡啶栓混悬液3mL(剂量0.2g/kg)灌肠，1次/d；C组为鱼腥草治疗组，给予新鲜鱼腥草蒸馏液(2kg/L，pH 4.0～6.0. 南方制药厂生产)3mL灌肠，1次/d. 10d后将大鼠处死，取肛门以上7cm～9cm肠段，750g/L酒精固定，常规脱水，石蜡包埋，连续切片，HE染色，参考Keshavarzian et al[3]标准评价炎症指数，按文献诊断标准[4]进行凋亡细胞记数，选取切片平展，细胞形态和组织结构清晰的HE染色组织片，在40倍光镜记数每张切片上凋亡细胞总数，根据Wang et al[5]的形态测量和面积测量方法，折算出单位面积的凋亡细胞数(凋亡指数).
, http://www.100md.com
统计学处理 采用两样本均数比较的t检验.
2 结果
2.1 症状 造模完成后，3组大鼠均出现腹泻，粘液脓血便等典型UC活动期症状，治疗10d后，生理盐水组症状无改善，柳氮磺吡啶组和鱼腥草组腹泻，粘液脓血便等症状逐渐消失.
2.2 病理学改变 生理盐水组结肠粘膜可见典型溃疡，炎性细胞浸润和隐窝脓肿等UC病理学特征，鱼腥草治疗组炎症指数(4.37±1.35)明显低于柳氮磺吡啶组(8.15±1.85，P<0.05)和生理盐水组(16.58±2.45，P<0.01).
2.3 凋亡指数 鱼腥草治疗组结肠粘膜上皮细胞凋亡指数(4.1±2.3)显著低于柳氮磺吡啶组(7.2±3.1，P<0.05)及生理盐水组(9.8±3.7，P<0.01).
, http://www.100md.com
3 讨论
鱼腥草蒸馏液是以鲜鱼腥草为原料提取挥发油，有效成分(鱼腥草素、月桂醛，槲皮甙及异槲皮甙等38种)含量较干品高，药理作用广泛，如其松弛肠道平滑肌作用可减轻肠痉挛，延长肠内容物停留时间并有利于其吸收，从而缓解腹痛和腹泻症状，我们前期的实验也证实鱼腥草蒸馏液可改善UC大鼠结肠动力紊乱，使腹泻症状缓解[1]；槲皮甙及异槲皮甙具有改善毛细血管脆性作用而达止血效果，使便血消失；鱼腥草又具有清热解毒排脓消炎功能，抗炎作用强，鱼腥草治疗组炎症指数明显低于传统的抗炎药物柳氮磺吡啶，且采用灌肠给药可使药物直接作用于病变部位，避免上消化道酸碱和酶对药物的影响，保持药物性能，使其吸收更为完善，并能延长作用时间，达到治疗目的. 本研究还发现，生理盐水对照组结肠粘膜上皮细胞凋亡显著增加，从而使肠粘膜上皮细胞屏障破损，导致溃疡[6]，应用鱼腥草治疗后，凋亡细胞减少，从而有利于肠粘膜上皮细胞恢复，促进溃疡愈合，其疗效明显优于经典的柳氮磺吡啶治疗法，且鱼腥草为药食兼用之品，其pH值和渗透压与人体环境基本一致，临床长期应用无明显毒副反应，灌肠方法简便易行，见效快，值得进一步推广验证.
, http://www.100md.com
4 参考文献
1 江学良，权启镇，王东，孙自勤，王要军， 齐风. 鱼腥草治疗溃疡性结肠炎大鼠对结肠压力的影响. 世界华人消化杂志，1999；7：581
2 江学良，权启镇，王东，孙自勤，王要军. 复合法建立大鼠溃疡性结肠炎模型及其免疫和超微结构变化.
世界华人消化杂志，1999；7：381
3 Keshavarzian A, Morgan G, Sedghi S. Role of reactive oxygen metabolites in experimental colitis. Gut, 1990;31:786-790
4 David Hockenbery. Review: Definig apoptosis. Am J Path, 1995;146:16-19
, 百拇医药
5 Wang LD, Stephanie TS, Zhou Q. Changes in P53 and cyclin Dl protein levels and cell proliferation indifferent stages of
human esophageal and gastric-cardia carcinomenesis. Int J Cancer, 1994;59:514-519
6 Ueyama H, Kiyohara T, Sawada N, Isozaki K, Kitamura S, Kondo S, Miyagawa J, Kanayma S, Shinomura Y, Ishikawa H, Ohtani T,Nezu R, Nagata S, Matsuzawa Y. High Fas ligand expression on lymphocytes in lesions of ulcerative colitis.
Gut, 1998;43:48-55, http://www.100md.com(江学良 权启镇 王 东 孙自勤 王要军 齐 风)
项目负责人 江学良中国人民解放军济南军区总医院消化科 山东省济南市 250031
收稿日期 1999-06-15
Subject headings colitis, ulcerative/therapy; houttuynia cordata; sulfasalazine/therapeutic use
主题词 结肠炎，溃疡性/治疗；鱼腥草；柳氮磺吡啶/治疗应用
柳氮磺吡啶目前仍是治疗溃疡性结肠炎(UC)的主要药物，但其疗程长，副反应多，停药后易复发，疗效并不理想，因此，寻找更为理想有效，副反应少的药物成为UC研究的重点. 我们以前的实验发现鱼腥草蒸馏液灌肠可改善UC大鼠结肠动力紊乱[1]，本研究以柳氮磺吡啶作对照，进一步观察其治疗UC的作用.
, http://www.100md.com
1 材料和方法
封闭群成年Wistar大鼠30只，雌雄各半，质量250g～350g. 应用2，4-二硝基氯苯(DNCB)和乙酸复合法建立大鼠UC模型[2]；大鼠颈背部用100g/L Na2 S脱毛后，以20g/L DNCB丙酮液0.25mL滴背，1次/d，连续14d，d15以直径3mm尼龙导管经肛门插入结肠8cm处， 注入0.04mol/L(0.1%)DNCB乙醇(500mL/L)液0.25mL，d16同部位注入80mL/L乙酸溶液2mL，准确计时15s后，再用5mL生理盐水冲洗，30只大鼠随机分为3组，A组为空白对照组，给予生理盐水3mL灌肠，1次/d；B组为柳氮磺吡啶组，给予柳氮磺吡啶栓混悬液3mL(剂量0.2g/kg)灌肠，1次/d；C组为鱼腥草治疗组，给予新鲜鱼腥草蒸馏液(2kg/L，pH 4.0～6.0. 南方制药厂生产)3mL灌肠，1次/d. 10d后将大鼠处死，取肛门以上7cm～9cm肠段，750g/L酒精固定，常规脱水，石蜡包埋，连续切片，HE染色，参考Keshavarzian et al[3]标准评价炎症指数，按文献诊断标准[4]进行凋亡细胞记数，选取切片平展，细胞形态和组织结构清晰的HE染色组织片，在40倍光镜记数每张切片上凋亡细胞总数，根据Wang et al[5]的形态测量和面积测量方法，折算出单位面积的凋亡细胞数(凋亡指数).
, http://www.100md.com
统计学处理 采用两样本均数比较的t检验.
2 结果
2.1 症状 造模完成后，3组大鼠均出现腹泻，粘液脓血便等典型UC活动期症状，治疗10d后，生理盐水组症状无改善，柳氮磺吡啶组和鱼腥草组腹泻，粘液脓血便等症状逐渐消失.
2.2 病理学改变 生理盐水组结肠粘膜可见典型溃疡，炎性细胞浸润和隐窝脓肿等UC病理学特征，鱼腥草治疗组炎症指数(4.37±1.35)明显低于柳氮磺吡啶组(8.15±1.85，P<0.05)和生理盐水组(16.58±2.45，P<0.01).
2.3 凋亡指数 鱼腥草治疗组结肠粘膜上皮细胞凋亡指数(4.1±2.3)显著低于柳氮磺吡啶组(7.2±3.1，P<0.05)及生理盐水组(9.8±3.7，P<0.01).
, http://www.100md.com
3 讨论
鱼腥草蒸馏液是以鲜鱼腥草为原料提取挥发油，有效成分(鱼腥草素、月桂醛，槲皮甙及异槲皮甙等38种)含量较干品高，药理作用广泛，如其松弛肠道平滑肌作用可减轻肠痉挛，延长肠内容物停留时间并有利于其吸收，从而缓解腹痛和腹泻症状，我们前期的实验也证实鱼腥草蒸馏液可改善UC大鼠结肠动力紊乱，使腹泻症状缓解[1]；槲皮甙及异槲皮甙具有改善毛细血管脆性作用而达止血效果，使便血消失；鱼腥草又具有清热解毒排脓消炎功能，抗炎作用强，鱼腥草治疗组炎症指数明显低于传统的抗炎药物柳氮磺吡啶，且采用灌肠给药可使药物直接作用于病变部位，避免上消化道酸碱和酶对药物的影响，保持药物性能，使其吸收更为完善，并能延长作用时间，达到治疗目的. 本研究还发现，生理盐水对照组结肠粘膜上皮细胞凋亡显著增加，从而使肠粘膜上皮细胞屏障破损，导致溃疡[6]，应用鱼腥草治疗后，凋亡细胞减少，从而有利于肠粘膜上皮细胞恢复，促进溃疡愈合，其疗效明显优于经典的柳氮磺吡啶治疗法，且鱼腥草为药食兼用之品，其pH值和渗透压与人体环境基本一致，临床长期应用无明显毒副反应，灌肠方法简便易行，见效快，值得进一步推广验证.
, http://www.100md.com
4 参考文献
1 江学良，权启镇，王东，孙自勤，王要军， 齐风. 鱼腥草治疗溃疡性结肠炎大鼠对结肠压力的影响. 世界华人消化杂志，1999；7：581
2 江学良，权启镇，王东，孙自勤，王要军. 复合法建立大鼠溃疡性结肠炎模型及其免疫和超微结构变化.
世界华人消化杂志，1999；7：381
3 Keshavarzian A, Morgan G, Sedghi S. Role of reactive oxygen metabolites in experimental colitis. Gut, 1990;31:786-790
4 David Hockenbery. Review: Definig apoptosis. Am J Path, 1995;146:16-19
, 百拇医药
5 Wang LD, Stephanie TS, Zhou Q. Changes in P53 and cyclin Dl protein levels and cell proliferation indifferent stages of
human esophageal and gastric-cardia carcinomenesis. Int J Cancer, 1994;59:514-519
6 Ueyama H, Kiyohara T, Sawada N, Isozaki K, Kitamura S, Kondo S, Miyagawa J, Kanayma S, Shinomura Y, Ishikawa H, Ohtani T,Nezu R, Nagata S, Matsuzawa Y. High Fas ligand expression on lymphocytes in lesions of ulcerative colitis.
Gut, 1998;43:48-55, http://www.100md.com(江学良 权启镇 王 东 孙自勤 王要军 齐 风)