番石榴叶的体外抗轮状病毒作用
番石榴叶;轮状病毒;肠炎,项目负责人,Subjectheadings,主题词,1材料和方法,1.1材料,1.1.1,番石榴叶药液制备,1.1.2,药物血清的制备,1.1.3细胞传代,1.1.4,病毒悬液提取,1.2方法,1.2.1,组织培养半数感染量测定,1.2.2含药血清的治疗作用,1.2.3含
中国人民解放军第一军医大学南方医院中医科 广东省广州市 510515项目负责人 魏练波中国人民解放军第一军医大学南方医院中医科 广东省广州市 510515
收稿日期 1999-04-28 接收日期 1999-07-11
Subject headings psidium guajava; rotarirus; enteritis
主题词 番石榴叶；轮状病毒；肠炎
轮状病毒(rotavirus, RV)属呼肠孤病毒科，是婴幼儿急性感染性腹泻的主要病原体. 占婴幼儿腹泻的50%[1，2]. 目前无有效的西药治疗，我们用番石榴叶治疗RV肠炎获得比较好的临床疗效. 现进一步探讨番石榴叶提取物及含药血清的体外抗轮状病毒的机制.
1 材料和方法
1.1 材料 番石榴叶采自本校药圃，经药理药化教研室鉴定；病毒唑购自江苏无锡市第七制药厂：人轮状病毒Wa株(A群，血清Ⅰ型，长型)、恒河猴胚肾MA104传代细胞由卫生部兰州生物制品研究所提供；消化液(内含胰酶100mg/L)、DMEM培养基、轮状病毒ELISA检测试剂盒、pH7.4的20g/L磷钨酸由本校珠江医院生物高科技中心提供.
1.1.1 番石榴叶药液制备 番石榴叶50g，加蒸馏水250mL，浸1h，加热煮沸60min，过滤，药渣再次加蒸馏水150mL，煮沸45min，过滤，合并两次滤液，于水浴上浓缩致50mL，pH值调至7.0，滤过，滤液中加入60mL 950mL/L乙醇，冷藏24h，过滤，弃沉淀，醇溶液常压回收乙醇，浓缩冷藏24h，过滤，弃沉淀，再将滤液中加入150mL 950mL/L乙醇，冷藏24h，过滤，弃沉淀，回收乙醇，以蒸馏水加至50mL，分装两个小瓶中，灭菌后置4℃冰箱贮存.
1.1.2 药物血清的制备[3] 番石榴叶按常规煎制方法制成3kg/L的浓度，每日按5mL/kg给家兔灌胃，连续7d，对照组为正常家兔. 7d后心脏采血，无菌分离血清，56℃，30min灭活后，冻存.
1.1.3 细胞传代 MA104以DMEM培养液 ......
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