酶联免疫吸附法检测唾液中幽门螺杆菌抗体的价值
广东省人民医院消化内科 广东省广州市 510080
项目负责人 李子俊广东省人民医院消化内科 广东省广州市 510080
收稿日期 1999-10-19 接收日期 1999-11-28
Subject headings salivary; Helicobacter pylori; antibody, bacterial/analysis; ELISA
主题词 唾液；螺杆菌，幽门；抗体，细胞/分析；酶联免疫吸附测定
幽门螺杆菌(Hp)被认为是人类最常见的慢性感染菌. 在我国人群感染率达50%～80%[1]. 临床及流行病学调查检测Hp感染，特别需要寻求一种简便、价廉，患者易耐受的诊断方法. 国外应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测唾液中抗HpIgG来诊断Hp感染结果满意[2]. 朱人敏et al[3]报道应用人胃Hp制成特异性抗原，免疫检测唾液中Hp抗体，结果临床证明也有价值. 我们采用Cortecs公司提供试剂盒，选择部分患者观察该方法检测的准确性.
, http://www.100md.com
1 材料和方法
1.1 材料 111例为我院门诊及住院检查内镜的患者，其中男60例，女51例，平均年龄46岁，包括慢性浅表性胃炎47例，慢性胃炎并肠化生或不典型增生11例，十二指肠球部溃疡28例，胃溃疡及复合性溃疡16例，胃癌9例. 所有患者检查前采取唾液并于内镜下距幽门3cm处胃窦大、小弯侧分别活检粘膜3～4块，其中一块行快速尿素酶试验(RUT)，一块行涂片HE染色， 另一块送病理组织切片Warthin-Starry(WS)银染色分别查Hp. 受检对象近2wk未服用抗生素，铋剂及抗酸分泌药物.
1.2 方法 ELISA法检测唾液抗HpIgG. 受检对象晨空腹于检查内镜前30min，口含Omni-SAI唾液采集片，待采集片变蓝色后，放入专用管内，室温下送检(试剂盒由英国Cortecs公司提供). 先将唾液100μL直接加入已包被的酶标板，温育洗板后加生物素标记的抗人IgG抗体，再温育后加辣根过氧化物酶(HRP)，用甲基联苯胺(TMB)作底物，显色中止后，酶标仪打印结果，并进行分析. 依据RUT，组织学涂片HE染色及WS银染色法诊断Hp感染，结果两项以上阳性为真阳性，三项皆阴性为真阴性，单项阳性退出试验.
, 百拇医药
统计学处理 采用卡方检验.
2 结果
111例受检对象均行组织学RUT，HE染色及病理WS银染色诊断Hp感染，结果显示单项阳性排除试验，共16例. 余95例，Hp阳性75例，阴性20例，. 4种检测方法均阳性为56例，其中诊断特异性以WS银染色法最高(90%)，而敏感性以唾液抗HpIgG最高(92%). 唾液抗HpIgG阳性率79%，RUT 75%，HE染色法64%，病理WS银染色法61%. 其中唾液抗HpIgG和RUT检测的阳性率较高，两者比较差异无显著性(P>0.05)，而与组织HE染色和WS银染法比较，差异均显著(P<0.01). 在组织学方法检测Hp感染的几种方法中，以任何两项阳性为诊断金标准，结果判断唾液抗HpIgG测定诊断胃Hp感染的敏感性较高，而特异性不及病理学技术，两者比较差异均显著(P<0.01)，阳性预测值为93%，阴性预测值71%，准确性88%.
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3 讨论
Hp感染被认为是慢性浅表性胃炎和消化性溃疡的主要原因，且已证实根除Hp可显著降低溃疡病复发和出血等并发症的发生. 目前，诊断Hp感染，常依赖于内镜下获取粘膜组织学检查，由于内镜检查活检系创伤性，费用高，且易导致患者不适或心理恐惧，因此，人们希望采用非侵入性诊断方法. 临床推荐应用的13C或14C -尿素呼气试验诊断Hp感染，由于14C具有放射性，累积剂量可损坏环境；而13C检查又需要昂贵的质谱仪，因此目前尚难广泛普及应用.
目前，测定血清HpIgG抗体诊断Hp感染已被临床广泛采用. 血液中抗HpIgG可随体液循环排泌到胃液，唾液和尿液中[2]. Patel
, 百拇医药
et al[4]报道：唾液中的抗HpIgG与血清抗HpIgG的一致性达91%，有良好正相关性，可正确判断患者Hp感染情况. Luzza et al[5]研究结果也提示唾液中抗HpIgG是临床诊断Hp感染的敏感指标. 本研究结果进一步表明唾液抗HpIgG测定判断Hp感染状态，敏感性、特异性、准确性均较高. 少数病例出现假阳性或假阴性，可能与口腔内存在异源菌体抗原引起交叉免疫反应和唾液蛋白酶降解免疫球蛋白有关[6]. Hp抗体的产生和消失需一段时间，因此，测定抗HpIgG的诊断特异性不及病理组织学检查. 但究其敏感性和特异性与RUT法比较无显著性差异(P>0.05)，说明唾液HpIgG测定仍不失为常规诊断Hp感染的敏感性指标.
4 参考文献
, http://www.100md.com
1 周殿元，张万岱. 关于幽门螺杆菌若干问题的意见. 中华内科杂志，1997；36：438
2 Luzza F, Maletta M, Biancome L. Salivary specific immunoglobulin G in the diagnosis of Helicobacter pylori infection in
dyspeptic patients. Am J Gastroenterol, 1995;90:1820-1823
3 朱人敏，路又可，王琳. 唾液抗幽门螺杆菌抗体检测. 中华内科杂志，1997；36：469-470
4 Patel P, Mendal MA. Detection of H.pylori infection by Saliva. Gut, 1993;34:A85
, http://www.100md.com
5 Luzza F, Maletta M, Biancome L. Isotypic analysis of specific antibody respone in serum, saliva and gastric homogenates
of Helicobacter pylori infected patients. Gastroenterology, 1994;106:A744
6 Patel P, Mendal MA. Salivary antibodies to Helicobacter pylori screeing dyspetic patients befor endoscopy.
Lancet, 1994;344:511-512, 百拇医药(李子俊 蒋 涛 邹伟民)
项目负责人 李子俊广东省人民医院消化内科 广东省广州市 510080
收稿日期 1999-10-19 接收日期 1999-11-28
Subject headings salivary; Helicobacter pylori; antibody, bacterial/analysis; ELISA
主题词 唾液；螺杆菌，幽门；抗体，细胞/分析；酶联免疫吸附测定
幽门螺杆菌(Hp)被认为是人类最常见的慢性感染菌. 在我国人群感染率达50%～80%[1]. 临床及流行病学调查检测Hp感染，特别需要寻求一种简便、价廉，患者易耐受的诊断方法. 国外应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测唾液中抗HpIgG来诊断Hp感染结果满意[2]. 朱人敏et al[3]报道应用人胃Hp制成特异性抗原，免疫检测唾液中Hp抗体，结果临床证明也有价值. 我们采用Cortecs公司提供试剂盒，选择部分患者观察该方法检测的准确性.
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1 材料和方法
1.1 材料 111例为我院门诊及住院检查内镜的患者，其中男60例，女51例，平均年龄46岁，包括慢性浅表性胃炎47例，慢性胃炎并肠化生或不典型增生11例，十二指肠球部溃疡28例，胃溃疡及复合性溃疡16例，胃癌9例. 所有患者检查前采取唾液并于内镜下距幽门3cm处胃窦大、小弯侧分别活检粘膜3～4块，其中一块行快速尿素酶试验(RUT)，一块行涂片HE染色， 另一块送病理组织切片Warthin-Starry(WS)银染色分别查Hp. 受检对象近2wk未服用抗生素，铋剂及抗酸分泌药物.
1.2 方法 ELISA法检测唾液抗HpIgG. 受检对象晨空腹于检查内镜前30min，口含Omni-SAI唾液采集片，待采集片变蓝色后，放入专用管内，室温下送检(试剂盒由英国Cortecs公司提供). 先将唾液100μL直接加入已包被的酶标板，温育洗板后加生物素标记的抗人IgG抗体，再温育后加辣根过氧化物酶(HRP)，用甲基联苯胺(TMB)作底物，显色中止后，酶标仪打印结果，并进行分析. 依据RUT，组织学涂片HE染色及WS银染色法诊断Hp感染，结果两项以上阳性为真阳性，三项皆阴性为真阴性，单项阳性退出试验.
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统计学处理 采用卡方检验.
2 结果
111例受检对象均行组织学RUT，HE染色及病理WS银染色诊断Hp感染，结果显示单项阳性排除试验，共16例. 余95例，Hp阳性75例，阴性20例，. 4种检测方法均阳性为56例，其中诊断特异性以WS银染色法最高(90%)，而敏感性以唾液抗HpIgG最高(92%). 唾液抗HpIgG阳性率79%，RUT 75%，HE染色法64%，病理WS银染色法61%. 其中唾液抗HpIgG和RUT检测的阳性率较高，两者比较差异无显著性(P>0.05)，而与组织HE染色和WS银染法比较，差异均显著(P<0.01). 在组织学方法检测Hp感染的几种方法中，以任何两项阳性为诊断金标准，结果判断唾液抗HpIgG测定诊断胃Hp感染的敏感性较高，而特异性不及病理学技术，两者比较差异均显著(P<0.01)，阳性预测值为93%，阴性预测值71%，准确性88%.
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3 讨论
Hp感染被认为是慢性浅表性胃炎和消化性溃疡的主要原因，且已证实根除Hp可显著降低溃疡病复发和出血等并发症的发生. 目前，诊断Hp感染，常依赖于内镜下获取粘膜组织学检查，由于内镜检查活检系创伤性，费用高，且易导致患者不适或心理恐惧，因此，人们希望采用非侵入性诊断方法. 临床推荐应用的13C或14C -尿素呼气试验诊断Hp感染，由于14C具有放射性，累积剂量可损坏环境；而13C检查又需要昂贵的质谱仪，因此目前尚难广泛普及应用.
目前，测定血清HpIgG抗体诊断Hp感染已被临床广泛采用. 血液中抗HpIgG可随体液循环排泌到胃液，唾液和尿液中[2]. Patel
, 百拇医药
et al[4]报道：唾液中的抗HpIgG与血清抗HpIgG的一致性达91%，有良好正相关性，可正确判断患者Hp感染情况. Luzza et al[5]研究结果也提示唾液中抗HpIgG是临床诊断Hp感染的敏感指标. 本研究结果进一步表明唾液抗HpIgG测定判断Hp感染状态，敏感性、特异性、准确性均较高. 少数病例出现假阳性或假阴性，可能与口腔内存在异源菌体抗原引起交叉免疫反应和唾液蛋白酶降解免疫球蛋白有关[6]. Hp抗体的产生和消失需一段时间，因此，测定抗HpIgG的诊断特异性不及病理组织学检查. 但究其敏感性和特异性与RUT法比较无显著性差异(P>0.05)，说明唾液HpIgG测定仍不失为常规诊断Hp感染的敏感性指标.
4 参考文献
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1 周殿元，张万岱. 关于幽门螺杆菌若干问题的意见. 中华内科杂志，1997；36：438
2 Luzza F, Maletta M, Biancome L. Salivary specific immunoglobulin G in the diagnosis of Helicobacter pylori infection in
dyspeptic patients. Am J Gastroenterol, 1995;90:1820-1823
3 朱人敏，路又可，王琳. 唾液抗幽门螺杆菌抗体检测. 中华内科杂志，1997；36：469-470
4 Patel P, Mendal MA. Detection of H.pylori infection by Saliva. Gut, 1993;34:A85
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5 Luzza F, Maletta M, Biancome L. Isotypic analysis of specific antibody respone in serum, saliva and gastric homogenates
of Helicobacter pylori infected patients. Gastroenterology, 1994;106:A744
6 Patel P, Mendal MA. Salivary antibodies to Helicobacter pylori screeing dyspetic patients befor endoscopy.
Lancet, 1994;344:511-512, 百拇医药(李子俊 蒋 涛 邹伟民)