肝组织中IGF-Ⅱ及其受体表达对肝细胞增殖的影响
中国人民解放军第一军医大学珠江医院 1中心实验室 2消化科 广东省广州市 510282
项目负责人 周最明中国人民解放军第一军医大学珠江医院中心实验室 广东省广州市 510282
收稿日期 1999-12-22 接收日期 2000-02-08
Subject headings carcinoma, hepatocellular; liver cirrhosis; hepatitis, chronic active; insulin-like growth factor Ⅱ;
immunohistochemistry; liver neoplasms
, 百拇医药
主题词 癌，肝细胞；肝硬化；肝炎，慢性活动性； 胰岛素样生长因子Ⅱ；免疫组织化学；肝肿瘤
梁巧明,周最明,杨冬华,徐重. 肝组织中IGF-Ⅱ及其受体表达对肝细胞增殖的影响. 世界华人消化杂志，2000；8(5)：545
我们采用免疫组织化学SP法检测了胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)及其受体(IGF-Ⅰ/ⅡR)和增殖细胞核抗原(PCNA)在HBV所致慢性肝病组织中的表达，以探讨IGF-Ⅱ及其受体对肝细胞增殖的影响.
1 材料和方法
1.1 材料 血清HBsAg阳性并经病理证实的慢性活动性肝炎(CAH)50例、肝硬变(LC)66例、肝细胞癌(HCC)110例，常规制备组织切片[1].
, 百拇医药
1.2 方法 免疫组织化学：一抗包括兔抗IGF-Ⅱ，IGF-Ⅰ/ⅡR多克隆抗体(自行制备)和PCNA(PC10)单抗(Sigma公司). SP试剂(Zymed公司). 染色和对照设计参见文献[1].
统计学处理 χ2 检验.
2 结果
2.1 CAH，LC和HCC中IGF-Ⅱ及其受体的分布与阳性率 ① IGF-Ⅱ阳性率：CAH 30.0%，LC 60.6%，HCC 85%5%，三者差异有显著性(P<0.01). ② IGF-ⅡR阳性率：CAH 16.0%，LC 56.1%，HCC 83.6%，三者差异有显著性(P<0.01). ③ IGFⅡ-IR阳性率：CAH 26.0%，LC 10.6%，HCC 9.1%，其中CAH显著高于LC和HCC(P<0.05)，LC与HCC无差异(P>0.05).
, 百拇医药
2.2 慢性肝组织中 IGF-Ⅱ与PCNA高表达的关系 PCNA阳性着色仅见于细胞核内，阳性细胞多位于坏死灶(CAH)、硬化结节周边(LC)和弥漫分布于癌组织. HCC，LC和CAH中阳性率分别为84.5%，48.5%和32.0%，其中HCC显著高于CAH和LC(P<0.01). PCNA在IGF-Ⅱ阳性HCC，LC和CAH中阳性率分别为95.7%，77.5%和80.0%，与IGF-Ⅱ阴性者(HCC 18.8%，LC 3.85%，CAH 11.4%)比较差异有显著性，且两者阳性细胞分布区域、染色强度基本一致.
3 讨论
IGF-Ⅱ能与IGF-Ⅰ/Ⅱ受体发生双重结合，前者属酪氨酸激酶类受体、有促进细胞分裂和生长的作用；后者为分布于肝细胞质和膜表面的糖蛋白分子，介导IGF-Ⅱ在溶酶体中的降解，抑制其促有丝分裂作用. 我们的研究表明IGF-Ⅱ和IGF-ⅡR过表达是肝癌细胞自分泌和(或)邻分泌系统的分子基础[1]. 陈文生et al[2]用IGF-ⅡR反义基因导入SMMC-7721人肝癌细胞株后，细胞进入S期比例及细胞凋亡发生率明显增多；同时IGF-IR转录上调，转染细胞生长速度无明显变化. 本文结果显示，在HBV感染所致CAH，LC和HCC中，IGF-Ⅱ和IGF-ⅡR阳性率逐渐升高，IGF-Ⅱ则CAH显著高于LC和HCC，提示IGF-ⅡR的过量表达对IGF-ⅠR有抑制作用，IGF-ⅠR可能与肝细胞的良性增殖有关，IGF-ⅡR则与肝细胞的恶性转化、恶性表型维持和恶性增殖关系更密切. 在肝细胞恶性演变过程中，可能由于IGF-Ⅱ的胚胎性过量表达诱导了其受体由IGF-ⅠR向IGF -Ⅱ转变，而导致肝癌的发生；或二者均是肝细胞癌变的结果.
, 百拇医药
体外培养的肝癌细胞可依赖其自身分泌的IGF-Ⅱ维持生长，加速G1期细胞进入S期，促进DNA和蛋白质等合成，刺激癌细胞分化与增殖；在人HCC实体瘤癌组织中，DNA异倍体出现率、S期细胞比例在IGF-Ⅱ阳性及IGF-ⅡR阳性者显著高于阴性者[3]. 本文结果提示在HBV相关性慢性肝病中，IGF-Ⅱ阳性者PCNA阳性率明显高于IGF-Ⅱ阴性者、且两者阳性细胞染色强度和分布区域一致，表明IGF-Ⅱ阳性细胞属活跃周期细胞，相应组织中高表达的IGF-Ⅱ对肝细胞增殖起正向调节作用.
4 参考文献
1 周最明，杨冬华，徐重，邱庆林，邱立文. 肝癌中IGF-Ⅱ表达与11p染色体脆性位点、癌断点的关系. 临床肝胆病杂志，1999；15：85-88
2 陈文生，刘为纹，周筱梅，顾健人. IGF-Ⅱ受体( IGF-ⅡR)反义基因对肝癌细胞癌基因转录及生物学行为的影响.
第三军医大学学报，1996；18：319
3 邓涛，陈乃玲，贾克明. 肝癌组织IGF-Ⅱ、IGF-ⅡR、HBxAg的表达与细胞DNA倍体和S期的关系. 中华内科杂志，1994；33：743-746, 百拇医药(梁巧明1 周最明2 杨冬华2 徐 重1 )
项目负责人 周最明中国人民解放军第一军医大学珠江医院中心实验室 广东省广州市 510282
收稿日期 1999-12-22 接收日期 2000-02-08
Subject headings carcinoma, hepatocellular; liver cirrhosis; hepatitis, chronic active; insulin-like growth factor Ⅱ;
immunohistochemistry; liver neoplasms
, 百拇医药
主题词 癌，肝细胞；肝硬化；肝炎，慢性活动性； 胰岛素样生长因子Ⅱ；免疫组织化学；肝肿瘤
梁巧明,周最明,杨冬华,徐重. 肝组织中IGF-Ⅱ及其受体表达对肝细胞增殖的影响. 世界华人消化杂志，2000；8(5)：545
我们采用免疫组织化学SP法检测了胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)及其受体(IGF-Ⅰ/ⅡR)和增殖细胞核抗原(PCNA)在HBV所致慢性肝病组织中的表达，以探讨IGF-Ⅱ及其受体对肝细胞增殖的影响.
1 材料和方法
1.1 材料 血清HBsAg阳性并经病理证实的慢性活动性肝炎(CAH)50例、肝硬变(LC)66例、肝细胞癌(HCC)110例，常规制备组织切片[1].
, 百拇医药
1.2 方法 免疫组织化学：一抗包括兔抗IGF-Ⅱ，IGF-Ⅰ/ⅡR多克隆抗体(自行制备)和PCNA(PC10)单抗(Sigma公司). SP试剂(Zymed公司). 染色和对照设计参见文献[1].
统计学处理 χ2 检验.
2 结果
2.1 CAH，LC和HCC中IGF-Ⅱ及其受体的分布与阳性率 ① IGF-Ⅱ阳性率：CAH 30.0%，LC 60.6%，HCC 85%5%，三者差异有显著性(P<0.01). ② IGF-ⅡR阳性率：CAH 16.0%，LC 56.1%，HCC 83.6%，三者差异有显著性(P<0.01). ③ IGFⅡ-IR阳性率：CAH 26.0%，LC 10.6%，HCC 9.1%，其中CAH显著高于LC和HCC(P<0.05)，LC与HCC无差异(P>0.05).
, 百拇医药
2.2 慢性肝组织中 IGF-Ⅱ与PCNA高表达的关系 PCNA阳性着色仅见于细胞核内，阳性细胞多位于坏死灶(CAH)、硬化结节周边(LC)和弥漫分布于癌组织. HCC，LC和CAH中阳性率分别为84.5%，48.5%和32.0%，其中HCC显著高于CAH和LC(P<0.01). PCNA在IGF-Ⅱ阳性HCC，LC和CAH中阳性率分别为95.7%，77.5%和80.0%，与IGF-Ⅱ阴性者(HCC 18.8%，LC 3.85%，CAH 11.4%)比较差异有显著性，且两者阳性细胞分布区域、染色强度基本一致.
3 讨论
IGF-Ⅱ能与IGF-Ⅰ/Ⅱ受体发生双重结合，前者属酪氨酸激酶类受体、有促进细胞分裂和生长的作用；后者为分布于肝细胞质和膜表面的糖蛋白分子，介导IGF-Ⅱ在溶酶体中的降解，抑制其促有丝分裂作用. 我们的研究表明IGF-Ⅱ和IGF-ⅡR过表达是肝癌细胞自分泌和(或)邻分泌系统的分子基础[1]. 陈文生et al[2]用IGF-ⅡR反义基因导入SMMC-7721人肝癌细胞株后，细胞进入S期比例及细胞凋亡发生率明显增多；同时IGF-IR转录上调，转染细胞生长速度无明显变化. 本文结果显示，在HBV感染所致CAH，LC和HCC中，IGF-Ⅱ和IGF-ⅡR阳性率逐渐升高，IGF-Ⅱ则CAH显著高于LC和HCC，提示IGF-ⅡR的过量表达对IGF-ⅠR有抑制作用，IGF-ⅠR可能与肝细胞的良性增殖有关，IGF-ⅡR则与肝细胞的恶性转化、恶性表型维持和恶性增殖关系更密切. 在肝细胞恶性演变过程中，可能由于IGF-Ⅱ的胚胎性过量表达诱导了其受体由IGF-ⅠR向IGF -Ⅱ转变，而导致肝癌的发生；或二者均是肝细胞癌变的结果.
, 百拇医药
体外培养的肝癌细胞可依赖其自身分泌的IGF-Ⅱ维持生长，加速G1期细胞进入S期，促进DNA和蛋白质等合成，刺激癌细胞分化与增殖；在人HCC实体瘤癌组织中，DNA异倍体出现率、S期细胞比例在IGF-Ⅱ阳性及IGF-ⅡR阳性者显著高于阴性者[3]. 本文结果提示在HBV相关性慢性肝病中，IGF-Ⅱ阳性者PCNA阳性率明显高于IGF-Ⅱ阴性者、且两者阳性细胞染色强度和分布区域一致，表明IGF-Ⅱ阳性细胞属活跃周期细胞，相应组织中高表达的IGF-Ⅱ对肝细胞增殖起正向调节作用.
4 参考文献
1 周最明，杨冬华，徐重，邱庆林，邱立文. 肝癌中IGF-Ⅱ表达与11p染色体脆性位点、癌断点的关系. 临床肝胆病杂志，1999；15：85-88
2 陈文生，刘为纹，周筱梅，顾健人. IGF-Ⅱ受体( IGF-ⅡR)反义基因对肝癌细胞癌基因转录及生物学行为的影响.
第三军医大学学报，1996；18：319
3 邓涛，陈乃玲，贾克明. 肝癌组织IGF-Ⅱ、IGF-ⅡR、HBxAg的表达与细胞DNA倍体和S期的关系. 中华内科杂志，1994；33：743-746, 百拇医药(梁巧明1 周最明2 杨冬华2 徐 重1 )