慢性肝病患者血清透明质酸、Ⅳ型胶原测定的意义
上海第二医科大学新华医院消化内科 上海市 200092
项目负责人 桑玉尔
收稿日期 2000-02-13 接受日期 2000-04-13
Subject headings liver diseases; collagen; hyaluronic acid; serodiagnosis
主题词 肝病；透明质酸；Ⅳ型胶原；血清诊断
桑玉尔, 徐雷鸣, 王秀玲, 王志荣, 李定国. 慢性肝病患者血清透明质酸、Ⅳ 型胶原测定的意义. 世界华人消化杂志，2000；8(7)：836-837
, http://www.100md.com
各种病因所致慢性肝病的共同病理过程为肝组织慢性炎症、纤维化，终末期形成肝硬变，部分患者发生癌变[1]. 明确诊断各种慢性肝病的不同阶段对于指导临床治疗及估计预后具有重要意义. 目前有关肝病诊断的血清学指标不少，但多缺乏特异性[2]. 我们观察肝病患者55例及健康体检者20例血清透明质酸(hyaluronic acid, HA) 及Ⅳ型胶原含量的变化, 以探讨联合检测HA及Ⅳ胶原在肝病临床诊治中的意义.
1 材料和方法
1.1 材料 本院门诊、住院肝病患者55例，正常对照20例为健康检查者. 慢性肝炎患者32例(按1990年第六次全国病毒性肝炎会议修订的临床诊断标准[3])，男20例，女12例，年龄21岁～70岁，平均45岁±12岁；经B超及CT检查诊断为肝硬变患者15例，男10例，女5例，年龄35岁～72岁，平均49岁±15岁；8例肝癌患者经B超、CT及血清甲胎蛋白检查明确诊断 ，男7例，女1例，年龄45岁～75岁，平均55岁±13岁；健康检查者20例，无慢性肝病病史 ，肝功能及B超检查均正常，男12例，女8例，年龄28岁～71岁，平均46岁±16岁. 各组间 在年龄、性别及暴露因素等方面均无差异(P>0.05).
, 百拇医药
1.2 检测方法 血清HA和Ⅳ型胶原参照有关文献[4]分别用放射免疫法及酶连免疫吸附法测定， 试剂盒由海军上海医学研究所和森雄(上海)公司提供. 统计学处理 实验数据用x±s表示，采用F检验进行统计学处理.
2 结果
肝硬变组及肝癌组患者血清HA含量明显高于正常组，慢性肝炎与正常组之间无统计学差异； 肝癌组患者血清HA含量明显高于肝硬变组. 慢性肝炎组、肝硬变及肝癌组患者血清Ⅳ含量均较对照组显著增高；肝癌组高于肝硬变组；而慢性肝炎组Ⅳ胶原含量低于肝硬变组，各组间比较差异显著(表1).
表1 各型肝病患者血清HA和IV型胶原含量比较 (x±s, mg/L)
, http://www.100md.com
aP<0.05 vs 正常组; bP<0.05 vs 肝癌组; cP<0.05 vs 肝硬变组.
3 讨论HA主要由肝星状细胞(hepatic stellate cell, HSC)合成及分泌，主要由肝窦内皮细胞摄取并被降解为乙酸和乳酸；部分HA进入血液循环或沉积于组织间隙. 折叠成三维网状结构的HA具有介导胶原蛋白沉积，与硫酸软骨素及硫酸角质素等其他糖氨多糖协同连接到核心蛋白上，构成蛋白聚糖聚合体以维持肝组织的形态和体积[5]. 慢性肝炎、肝硬变及癌变时，肿瘤坏死因子、氧自由基、血小板衍生生长因子、转化生长因子β1等前炎因 子、细胞因子的刺激HSC激活、增殖，分泌HA水平上调，使进入血液循环及沉积于肝组织间隙的HA量增加. 刘芳et al[6]和Murawaki et al[7] 发现慢性病毒性肝炎及肝硬变患者血清HA和转化生长因子β1水平呈正相关，并与肝组织病理改变相一致. 王泰龄et al[8]研究表明血清HA含量与肝组织炎症及纤维化程度呈正相关，具有较好的临床诊断价值. Pontinha et al[9]观察111例无症状乙型肝炎病毒携带者发现血清HA水平与肝组织纤维化程度显著相关. Guechot et al[10]也发现慢性丙型肝炎患者的血清HA水平不仅与肝纤维化程度相关，同时可作为判定预后的指标，预测丙型肝炎肝硬变严重并发症的发生；对干扰素治疗敏感的慢性丙型肝炎、肝纤维化患者同时伴有血清HA水平下调[11]. Yamada et al [12]观察血友病丙型肝炎病毒相关性慢性肝病患者血清HA水平变化，结果提示HA监测可替代肝组织病理学检查，并可反映干扰素的治疗效果. 我们研究发现肝硬变及肝癌患者血清HA显著高于正常对照组，且以肝癌组最为明显. 而慢性肝炎组患者血清HA水平轻度升高，与正常组无显著差异. 与李兵顺et al[13]研究结果实验一致. 提示HA是判定慢性肝病发生发展较好指标.Ⅳ型胶原是正常肝窦周围非连续性基底膜的主要组成部分. 慢性肝炎、肝硬变及肝癌早期HS C激活、分泌Ⅳ胶原增加并与层粘连蛋白等结合，沉积于肝窦壁，产生肝窦毛细血管化及纤 维间隔，部分Ⅳ胶原进入血液循环. 病变后期，随着Ⅰ，Ⅲ型胶原合成增加，Ⅳ型胶原酶活 性上调并破坏肝窦基底膜，此时血清IV胶原含量也明显升高[5].George et al[14]观察血色病患者IV型胶原、层粘连蛋白及基质金属蛋白酶组织抑制因子等血清学指标和肝组织病理学变化，结果显示血清IV型胶原含量与肝纤维化程度显著相关. Ninomiya et al[15]报道57例慢性丙型肝炎患者血清Ⅳ胶原含量较对照组显著升高，重组α2干扰素治疗后明显下降，且与肝组织纤维化程度相关. 邹兵et al[16]研究结果表明不同类型的肝炎、肝硬变及原发性肝癌患者血清IV胶原均较正常组明显升高，且以重症肝炎组含量最高. 我们研究发现慢性肝炎、肝硬变及肝癌患者血清IV型胶原含量均较正常对照组明显升高，但以肝癌组最为显著，与胡乃中et al[17]报道结果一致. 因此，我们认为肝病患者血清Ⅳ型胶原含量测定是判断肝组织炎症及纤维化程度的较好指标.
, 百拇医药
4 参考文献1 Li D, Friedman SL. Liver fibrogenesis and the role of hepatic stellat e cells: new insights and prospects for therapy.
J Gastroenterol Hepatol, 1999;14:618-633
2 Friedman SL. Evaluation of fibrosis and hepatitis C. Am J Med, 1999;107:27S-30S
3 1990年5月上海第六次全国病毒性肝炎会议讨论修订. 病毒性肝炎防治方案(试行). 中华传染病杂志, 1991;9:52-54
4 刘仁才，刘龙秀，张德远，雷兴琼，胡寒静，程明亮. 血清HA\,LN\,Ⅳ-C\,hpcⅢ含量与慢性肝炎炎症活动度及纤维化程度的关系.
, 百拇医药
中华传染病杂志, 1999；17:122-123
5 程明亮，刘三都，主编. 肝纤维化的基础研究及临床. 第1版. 北京：人民卫生出版社出版，1996：30-34
6 刘芳，刘金星，曹治宸，李兵顺，赵彩彦，孔丽，甄真. 慢性肝病患者血清TGF-β1与肝纤维化指标和肝组织病理的关系.
世界华人消化杂志, 1999;7:519-521
7 Murawaki Y, Nishimura Y, Ikuta Y, Idobe Y, Kitamura Y, Kawasaki H. Plasma transforming growth factor-beta 1 concentrations
in patients with chronic viral hepatitis. J Gastroenterol Hepatol, 1998;13:680-684
, http://www.100md.com
8 王泰龄, 王宝恩, 刘霞，贾继东，赵静波，李新民，张晶，李宁章. 慢性病毒性肝炎纤维化分期与血清学指标的关系.
中华病理学杂志, 1998；27:185-190
9 Pontinha N, Pessegueiro H, Barros H. Serum hyaluronan as a marker of liver fibrosis in asymptomatic chronic viral hepatitis B.
Scand J Clin Lab Invest, 1999;59:343-347
10 Guechot J, Serfaty L, Bonnand AM, Chazouilleres O, Poupon RE, Poupon R. Prognostic value of serum hyaluronan in patients
, http://www.100md.com
with compensated HCV cirrhosis. J Hepatol, 2000;32:447-452
11 Cannelles M, Zorat F, Pozzato G. Effects of interferon therapy on fibrosis serum markers in HCV-positive chronic liver disease.
Eur J Gastroenterol Hepatol, 1998;10:125-131
12 Yamada M, Fukuda Y, Nakano I, Katano Y, Takamatsu J, Hayakawa T. Serum hyaluronan as a marker of liver fibrosis in hemophiliacs
, http://www.100md.com
with hepatitis C virus-associated chronic liver disease. Acta Haematol, 1998;99:212-216
13 李兵顺, 王继, 刘金星, 孙述强, 魏梅新, 刘晓梅, 裴王秀, 王麟士. 联合检测血清PCⅢ，HA，LN对肝纤维化的诊断价值.
中华传染病杂志, 1998;16:85-87
14 George DK, Ramm GA, Walker NI, Powell LW, Crawford DH. Elevated serum type Ⅳ collagen: a sensitive indicator of the presence
of cirrhosis in haemochr omatosis. J Hepatol, 1999;31:47-52
, http://www.100md.com
15 Ninomiya T, Yoon S, Hayashi Y, Sugano M, Kumon Y, Seo Y, Shimizu K, Kasuga M. Clinical significance of serum hyaluronic acid as a
fibrosis marker in chronic hepatitis C patients treated with interferon-alpha: histological evaluation by a modifiedhistological activity
index scoring system. J Gastroenterol Hepatol, 1998;13:68-74
16 邹兵，凌奇荷, 霍继荣, 王继贵. 肝病患者血清Ⅳ型胶原、透明质酸和TNFα的变化意义. 华人消化杂志, 1998;6:296-297
17 胡乃中, 刘传功. 不同类型肝病中血清Ⅳ型胶原与层粘蛋白和透明质酸的比较及诊断价值. 临床消化病杂志, 1998；10:100-101, http://www.100md.com(桑玉尔 徐雷鸣 王秀玲 王志荣 李定国)
项目负责人 桑玉尔
收稿日期 2000-02-13 接受日期 2000-04-13
Subject headings liver diseases; collagen; hyaluronic acid; serodiagnosis
主题词 肝病；透明质酸；Ⅳ型胶原；血清诊断
桑玉尔, 徐雷鸣, 王秀玲, 王志荣, 李定国. 慢性肝病患者血清透明质酸、Ⅳ 型胶原测定的意义. 世界华人消化杂志，2000；8(7)：836-837
, http://www.100md.com
各种病因所致慢性肝病的共同病理过程为肝组织慢性炎症、纤维化，终末期形成肝硬变，部分患者发生癌变[1]. 明确诊断各种慢性肝病的不同阶段对于指导临床治疗及估计预后具有重要意义. 目前有关肝病诊断的血清学指标不少，但多缺乏特异性[2]. 我们观察肝病患者55例及健康体检者20例血清透明质酸(hyaluronic acid, HA) 及Ⅳ型胶原含量的变化, 以探讨联合检测HA及Ⅳ胶原在肝病临床诊治中的意义.
1 材料和方法
1.1 材料 本院门诊、住院肝病患者55例，正常对照20例为健康检查者. 慢性肝炎患者32例(按1990年第六次全国病毒性肝炎会议修订的临床诊断标准[3])，男20例，女12例，年龄21岁～70岁，平均45岁±12岁；经B超及CT检查诊断为肝硬变患者15例，男10例，女5例，年龄35岁～72岁，平均49岁±15岁；8例肝癌患者经B超、CT及血清甲胎蛋白检查明确诊断 ，男7例，女1例，年龄45岁～75岁，平均55岁±13岁；健康检查者20例，无慢性肝病病史 ，肝功能及B超检查均正常，男12例，女8例，年龄28岁～71岁，平均46岁±16岁. 各组间 在年龄、性别及暴露因素等方面均无差异(P>0.05).
, 百拇医药
1.2 检测方法 血清HA和Ⅳ型胶原参照有关文献[4]分别用放射免疫法及酶连免疫吸附法测定， 试剂盒由海军上海医学研究所和森雄(上海)公司提供. 统计学处理 实验数据用x±s表示，采用F检验进行统计学处理.
2 结果
肝硬变组及肝癌组患者血清HA含量明显高于正常组，慢性肝炎与正常组之间无统计学差异； 肝癌组患者血清HA含量明显高于肝硬变组. 慢性肝炎组、肝硬变及肝癌组患者血清Ⅳ含量均较对照组显著增高；肝癌组高于肝硬变组；而慢性肝炎组Ⅳ胶原含量低于肝硬变组，各组间比较差异显著(表1).
表1 各型肝病患者血清HA和IV型胶原含量比较 (x±s, mg/L)
| 诊断 | n | HA(mg/L) | Ⅳ型胶原(mg/L) |
| 慢性肝炎 | 32 | 89±36bc | 117±33abc |
| 肝硬变 | 15 | 680±378ab | 412±115ab |
| 肝癌 | 8 | 1016±564a | 1113±385a |
| 正常对照 | 20 | 73±30 | 83±22 |
, http://www.100md.com
aP<0.05 vs 正常组; bP<0.05 vs 肝癌组; cP<0.05 vs 肝硬变组.
3 讨论HA主要由肝星状细胞(hepatic stellate cell, HSC)合成及分泌，主要由肝窦内皮细胞摄取并被降解为乙酸和乳酸；部分HA进入血液循环或沉积于组织间隙. 折叠成三维网状结构的HA具有介导胶原蛋白沉积，与硫酸软骨素及硫酸角质素等其他糖氨多糖协同连接到核心蛋白上，构成蛋白聚糖聚合体以维持肝组织的形态和体积[5]. 慢性肝炎、肝硬变及癌变时，肿瘤坏死因子、氧自由基、血小板衍生生长因子、转化生长因子β1等前炎因 子、细胞因子的刺激HSC激活、增殖，分泌HA水平上调，使进入血液循环及沉积于肝组织间隙的HA量增加. 刘芳et al[6]和Murawaki et al[7] 发现慢性病毒性肝炎及肝硬变患者血清HA和转化生长因子β1水平呈正相关，并与肝组织病理改变相一致. 王泰龄et al[8]研究表明血清HA含量与肝组织炎症及纤维化程度呈正相关，具有较好的临床诊断价值. Pontinha et al[9]观察111例无症状乙型肝炎病毒携带者发现血清HA水平与肝组织纤维化程度显著相关. Guechot et al[10]也发现慢性丙型肝炎患者的血清HA水平不仅与肝纤维化程度相关，同时可作为判定预后的指标，预测丙型肝炎肝硬变严重并发症的发生；对干扰素治疗敏感的慢性丙型肝炎、肝纤维化患者同时伴有血清HA水平下调[11]. Yamada et al [12]观察血友病丙型肝炎病毒相关性慢性肝病患者血清HA水平变化，结果提示HA监测可替代肝组织病理学检查，并可反映干扰素的治疗效果. 我们研究发现肝硬变及肝癌患者血清HA显著高于正常对照组，且以肝癌组最为明显. 而慢性肝炎组患者血清HA水平轻度升高，与正常组无显著差异. 与李兵顺et al[13]研究结果实验一致. 提示HA是判定慢性肝病发生发展较好指标.Ⅳ型胶原是正常肝窦周围非连续性基底膜的主要组成部分. 慢性肝炎、肝硬变及肝癌早期HS C激活、分泌Ⅳ胶原增加并与层粘连蛋白等结合，沉积于肝窦壁，产生肝窦毛细血管化及纤 维间隔，部分Ⅳ胶原进入血液循环. 病变后期，随着Ⅰ，Ⅲ型胶原合成增加，Ⅳ型胶原酶活 性上调并破坏肝窦基底膜，此时血清IV胶原含量也明显升高[5].George et al[14]观察血色病患者IV型胶原、层粘连蛋白及基质金属蛋白酶组织抑制因子等血清学指标和肝组织病理学变化，结果显示血清IV型胶原含量与肝纤维化程度显著相关. Ninomiya et al[15]报道57例慢性丙型肝炎患者血清Ⅳ胶原含量较对照组显著升高，重组α2干扰素治疗后明显下降，且与肝组织纤维化程度相关. 邹兵et al[16]研究结果表明不同类型的肝炎、肝硬变及原发性肝癌患者血清IV胶原均较正常组明显升高，且以重症肝炎组含量最高. 我们研究发现慢性肝炎、肝硬变及肝癌患者血清IV型胶原含量均较正常对照组明显升高，但以肝癌组最为显著，与胡乃中et al[17]报道结果一致. 因此，我们认为肝病患者血清Ⅳ型胶原含量测定是判断肝组织炎症及纤维化程度的较好指标.
, 百拇医药
4 参考文献1 Li D, Friedman SL. Liver fibrogenesis and the role of hepatic stellat e cells: new insights and prospects for therapy.
J Gastroenterol Hepatol, 1999;14:618-633
2 Friedman SL. Evaluation of fibrosis and hepatitis C. Am J Med, 1999;107:27S-30S
3 1990年5月上海第六次全国病毒性肝炎会议讨论修订. 病毒性肝炎防治方案(试行). 中华传染病杂志, 1991;9:52-54
4 刘仁才，刘龙秀，张德远，雷兴琼，胡寒静，程明亮. 血清HA\,LN\,Ⅳ-C\,hpcⅢ含量与慢性肝炎炎症活动度及纤维化程度的关系.
, 百拇医药
中华传染病杂志, 1999；17:122-123
5 程明亮，刘三都，主编. 肝纤维化的基础研究及临床. 第1版. 北京：人民卫生出版社出版，1996：30-34
6 刘芳，刘金星，曹治宸，李兵顺，赵彩彦，孔丽，甄真. 慢性肝病患者血清TGF-β1与肝纤维化指标和肝组织病理的关系.
世界华人消化杂志, 1999;7:519-521
7 Murawaki Y, Nishimura Y, Ikuta Y, Idobe Y, Kitamura Y, Kawasaki H. Plasma transforming growth factor-beta 1 concentrations
in patients with chronic viral hepatitis. J Gastroenterol Hepatol, 1998;13:680-684
, http://www.100md.com
8 王泰龄, 王宝恩, 刘霞，贾继东，赵静波，李新民，张晶，李宁章. 慢性病毒性肝炎纤维化分期与血清学指标的关系.
中华病理学杂志, 1998；27:185-190
9 Pontinha N, Pessegueiro H, Barros H. Serum hyaluronan as a marker of liver fibrosis in asymptomatic chronic viral hepatitis B.
Scand J Clin Lab Invest, 1999;59:343-347
10 Guechot J, Serfaty L, Bonnand AM, Chazouilleres O, Poupon RE, Poupon R. Prognostic value of serum hyaluronan in patients
, http://www.100md.com
with compensated HCV cirrhosis. J Hepatol, 2000;32:447-452
11 Cannelles M, Zorat F, Pozzato G. Effects of interferon therapy on fibrosis serum markers in HCV-positive chronic liver disease.
Eur J Gastroenterol Hepatol, 1998;10:125-131
12 Yamada M, Fukuda Y, Nakano I, Katano Y, Takamatsu J, Hayakawa T. Serum hyaluronan as a marker of liver fibrosis in hemophiliacs
, http://www.100md.com
with hepatitis C virus-associated chronic liver disease. Acta Haematol, 1998;99:212-216
13 李兵顺, 王继, 刘金星, 孙述强, 魏梅新, 刘晓梅, 裴王秀, 王麟士. 联合检测血清PCⅢ，HA，LN对肝纤维化的诊断价值.
中华传染病杂志, 1998;16:85-87
14 George DK, Ramm GA, Walker NI, Powell LW, Crawford DH. Elevated serum type Ⅳ collagen: a sensitive indicator of the presence
of cirrhosis in haemochr omatosis. J Hepatol, 1999;31:47-52
, http://www.100md.com
15 Ninomiya T, Yoon S, Hayashi Y, Sugano M, Kumon Y, Seo Y, Shimizu K, Kasuga M. Clinical significance of serum hyaluronic acid as a
fibrosis marker in chronic hepatitis C patients treated with interferon-alpha: histological evaluation by a modifiedhistological activity
index scoring system. J Gastroenterol Hepatol, 1998;13:68-74
16 邹兵，凌奇荷, 霍继荣, 王继贵. 肝病患者血清Ⅳ型胶原、透明质酸和TNFα的变化意义. 华人消化杂志, 1998;6:296-297
17 胡乃中, 刘传功. 不同类型肝病中血清Ⅳ型胶原与层粘蛋白和透明质酸的比较及诊断价值. 临床消化病杂志, 1998；10:100-101, http://www.100md.com(桑玉尔 徐雷鸣 王秀玲 王志荣 李定国)