一氧化氮对原发性肝癌诊疗的意义
1兰州医学院第一附属医院传染科 甘肃省兰州市 730000
2 广东省人民医院神经外科 510080
项目负责人 关玉娟兰州医学院第一附属医院传染科 甘肃省兰州市 730000
收稿日期 2000-05-12 接收日期 2000-05-16
Subject headings nitric oxide/diagnostic use; nitric oxide/therapeutic use; liver neoplasms/therapy; antineoplastic agents; serodiagnosis; immunoassay
, 百拇医药
主题词 一氧化氮/诊断应用；一氧化氮/治疗应用；肝肿瘤/治疗；抗肿瘤药；血清诊断；免疫测定
关玉娟, 周东. 一氧化氮对原发性肝癌诊疗的意义. 世界华人消化杂志，2000；8(9)：1064-1065
一氧化氮(nitric oxide, NO)在肿瘤血管生成和微循环中起一定作用，有关NO与肿瘤生物学行为的研究也逐渐成为“热点”. 原发性肝癌患者血清一氧化氮临床变化情况国内尚未见报道. 我们探讨原发性肝癌患者血清NO含量及其对原发性肝癌的诊断、治疗及预后的意义.
1 材料和方法
1.1 材料 1997-03/1999-10收住我科及门诊诊治的原发性肝癌患者21例. 男16例，女5例；年龄35岁～74岁，平均54岁±10岁. 经病史、症状、体征、临床各项检查(化验、B超及CT)确诊为中晚期肝癌. 其中，10例合并肝硬变，11例无合并肝硬变，肝硬变诊断符合1995年全国第五次传染病学术会议所修订的《病毒性肝炎防治方案(试行)》. 5例甲胎蛋白(AFP)<400μg·L-1,16例AFP≥400μg·L-1. 肿瘤直径大小为5.7cm～24cm，平均14cm±4cm. 随机选择年龄匹配健康体检肝功正常者36例,男20例,女16例. 所有对象无亚硝酸盐类饮食及药物治疗史.
, http://www.100md.com
1.2 方法 分别采空腹静脉血3mL，即刻离心，取血清封口，-20℃保存. NO的检测参照Green et al[1]方法，试剂盒由军事医学科学院提供，用Beckman Du型生化分析仪测定. 肝功能检测采用美国Beckman型全自动生化分析仪检测. AFP的检测采用美国德普公司提供的AFP试剂盒及全自动化学发光免疫分析系统测定仪-Immulite检测. 癌瘤大小的测量：选用福田UF-3500型B超和(或)CT显示的瘤体最大径来测量.
统计学处理 数据采用万道统计(SDAS)软件分析. 服从正态分布且F检验方差齐者用t检验，服从正态分布但方差不齐者采用近似法t＇检验或秩和检验(Wilcoxon法). 血清NO与瘤体大小间相关性采用直线相关分析. 资料陈述用x±s形式.
2 结果
, 百拇医药
肝癌组血清NO(12±3)μmol·L-1明显高于对照组(10±2)μmol·L-1, P<0.01. 合并LC组(14±2)μmol·L-1高于无合并LC组(11±3)μmol·L-1，P<0.05. AFP≥400μg·L-1组(15±2)μmol·L-1高于AFP<400μg·L-1组(11±3)μmol·L-1，P<0.05. 血清NO与瘤体直径呈正相关，r=0.5132,P<0.05.
, 百拇医药
3 讨论
NO参与包括肿瘤在内的病理过程,如在巨噬细胞及枯否细胞介导的肿瘤细胞毒作用中起重要作用. 最近研究表明，妇科肿瘤、乳腺癌、结肠癌、和脑胶质瘤中，NOS的表达和活性及NO代谢产物水平增高，并与肿瘤的生长有密切关系[2-5]. 动物实验也证实NO在肿瘤的生长中起重要作用[6]. 我们发现，原发性肝癌组患者血清NO明显高于健康对照组,且与有无合并肝硬变及甲胎蛋白的含量有关，与肿瘤大小呈正相关关系，说明NO在原发性肝癌的生长等生物学行为中起重要作用. 国内报道肝硬变患者5a～30a内，约有10%发展成肝癌. 在肝硬变的慢性发展过程中，升高的NO影响肝细胞蛋白合成和能量代谢，与其低蛋白血症、低凝血因子及其他肝功能障碍有密切关系[7]，此点与本实验结论相符. 本研究与Moriyama et al[8,9]的结果具有一定的相似之处，他们发现肝癌患者血清NO代谢产物水平升高，可作为肝癌的标志物，且与肿瘤的表面积、体积间呈正相关关系. 故监测NO有助于动态观察肝癌病情变化[10].
, 百拇医药
Lala et al[11]将NO介导的促进肿瘤生长及转移的可能机制归结为：①直接刺激肿瘤细胞增殖；②促进肿瘤细胞侵袭；③促进肿瘤血管生成；④对肿瘤新生血管微循环调节作用；⑤对宿主抗肿瘤防御的抑制. NO的扩血管作用对维持肿瘤血管最大舒张状态，以保证肿瘤快速生长的血液供应具有重要意义. 现在认为，检测肿瘤血管密度可用来判断实体肿瘤的预后，但肿瘤血管密度的测定存在着不足，如不能提供血管形成的生化途径，不能用来监控疗效和对肿瘤血管形成进行总的评价，与之相比，动态监测NO的变化较为容易，可提供有关血管形成的肿瘤生物行为信息.
原发性肝癌生存期短，发展快，转移早，预后较差，术后复发率及死亡率均较高. 故早发现、早诊断对其预后及疗效有重要意义. 肝癌的发生发展是一个多因素参与的复杂过程，AFP是一项敏感而特异的原发性肝癌标志物，与B超结合仅可发现约60%～70%的HCC；而且在小肝癌中阳性率更低，仅25%. 学者不断筛选出新的具有诊断价值的HCC标志物[12]，如γ-谷氨酸转肽酶同工酶Ⅱ(GGTⅡ)、AFP异质体等，与AFP联合检测大大提高HCC的阳性检出率. 通过本研究，是否可通过检测NO来联合协助诊断，尚有待于进一步大量实验. 同时，临床对肝癌的发展、药物及介入治疗效果的判断多通过CT及MRI等较为昂贵的检查手段来监测，加重患者经济负担的同时增加了癌症患者接触放射线的机会. 本研究中原发性肝癌患者血清NO含量及其与肝癌瘤体相关关系证实了NO在肝癌发展中起重要作用. Ahn et al[13]也证实NO及其产物为肝损害的原因，可作为肝肿瘤的激活物，促进肿瘤的发生；同时肿瘤组织中诱生型NOS可作为新生毛细血管和卵圆形细胞系的标志物. 可见，肝癌患者血清NO含量的测定对肝癌诊断、治疗及预后的评价具有一定的意义. NOS抑制剂可以通过影响NO的产生而改变肿瘤的生物学特性，具有良好的抗肿瘤前景. 因此，原发性肝癌患者血清NO含量的研究，可能为肝癌的治疗开辟新的途径.
, 百拇医药
4 参考文献
1 Green LC, Wagner DA, Glogowski J, Skipper PL, Wishnok JS, Tannenbaum SR. Analysis of nitrate, nitrite, and [15N] nitrate
in biological fluids. Anal Biochem, 1982;126:131-138
2 Thomsen LL, Miles DW. Role of nitric oxide in tumor progression: lessons from human tumors. Cancer Metastasis Rev,1998;17:107-118
, 百拇医药
3 Zhao WM, Ma XH, Li ZJ, Yang CF. The effect of nitric oxide on gastric carcinoma metastasis. World J Gastroenterol,1998;4(Suppl 2):78-79
4 Yun J, Guo F, Ebert MPA, Malfertheiner P. Expression of inducible nitric oxide synthase in human gastric cancer.
World J Gastroenterol, 1999;5:430-431
5 沈靖, 王润田, 徐希平. NO，iNOS与胃癌关系的研究进展. 世界华人消化杂志， 2000;8:320-322
, 百拇医药 6 Jenkins DC, Charles IG, Thomsen LL, Moss DW, Holmes LS, Baylis SA, Rhodes P, Westmore K, Emson PC, Moncada S. Role of
nitric oxide in tumor growth. Proc Natl Acad Sci USA, 1995;92:4392-4396
7 关玉娟，王家咙，高评. 一氧化氮及一氧化氮合酶与肝病. 中华内科杂志, 1999;38:353-354
8 Moriyama A, Masumoto A, Nanri H, Tabaru A, Unoki H, Imoto I, Ikeda M, Otsuki M. High plasma concentrations of nitrite/nitrate
, 百拇医药
in patients with hepatocellular carcinoma. Am J Gastroenterol, 1997;92:1520-1523
9 Moriyama A, Tabaru A, Unoki H, Abe S, Masumoto A, Otsuki M. Plasma nitrite/nitrate concentrations as a tumor marker
for hepatocellular carcinoma. Clin Chim Acta, 2000;296:181-191
10 Moussa YI, Plevris JN, Hayes PC. Plasma nitrites/nitrates in HCV infection and hepatocellular carcinoma. Eur J Gastroenterol
, http://www.100md.com
Hepatol, 2000;12:159-163
11 Lala PK, Orucevic A. Role of nitric oxide in tumor progression: lessons from experimental tumors.
Cancer Metastasis Rev, 1998;17:91-106
12 沈鼎明. 肝癌标志物的研究动向. 中华肝脏病杂志, 1999;7:168-169
13 Ahn B, Han BS, Kim DJ, Ohshima H. Immunohistochemical localization of inducible nitric oxide synthase and 3-nitrotyrosine in rat
liver tumors induced by N-nitrosodiethylamine. Carcinogenesis, 1999;20:1337-1344, 百拇医药(关玉娟1 周 东2)
2 广东省人民医院神经外科 510080
项目负责人 关玉娟兰州医学院第一附属医院传染科 甘肃省兰州市 730000
收稿日期 2000-05-12 接收日期 2000-05-16
Subject headings nitric oxide/diagnostic use; nitric oxide/therapeutic use; liver neoplasms/therapy; antineoplastic agents; serodiagnosis; immunoassay
, 百拇医药
主题词 一氧化氮/诊断应用；一氧化氮/治疗应用；肝肿瘤/治疗；抗肿瘤药；血清诊断；免疫测定
关玉娟, 周东. 一氧化氮对原发性肝癌诊疗的意义. 世界华人消化杂志，2000；8(9)：1064-1065
一氧化氮(nitric oxide, NO)在肿瘤血管生成和微循环中起一定作用，有关NO与肿瘤生物学行为的研究也逐渐成为“热点”. 原发性肝癌患者血清一氧化氮临床变化情况国内尚未见报道. 我们探讨原发性肝癌患者血清NO含量及其对原发性肝癌的诊断、治疗及预后的意义.
1 材料和方法
1.1 材料 1997-03/1999-10收住我科及门诊诊治的原发性肝癌患者21例. 男16例，女5例；年龄35岁～74岁，平均54岁±10岁. 经病史、症状、体征、临床各项检查(化验、B超及CT)确诊为中晚期肝癌. 其中，10例合并肝硬变，11例无合并肝硬变，肝硬变诊断符合1995年全国第五次传染病学术会议所修订的《病毒性肝炎防治方案(试行)》. 5例甲胎蛋白(AFP)<400μg·L-1,16例AFP≥400μg·L-1. 肿瘤直径大小为5.7cm～24cm，平均14cm±4cm. 随机选择年龄匹配健康体检肝功正常者36例,男20例,女16例. 所有对象无亚硝酸盐类饮食及药物治疗史.
, http://www.100md.com
1.2 方法 分别采空腹静脉血3mL，即刻离心，取血清封口，-20℃保存. NO的检测参照Green et al[1]方法，试剂盒由军事医学科学院提供，用Beckman Du型生化分析仪测定. 肝功能检测采用美国Beckman型全自动生化分析仪检测. AFP的检测采用美国德普公司提供的AFP试剂盒及全自动化学发光免疫分析系统测定仪-Immulite检测. 癌瘤大小的测量：选用福田UF-3500型B超和(或)CT显示的瘤体最大径来测量.
统计学处理 数据采用万道统计(SDAS)软件分析. 服从正态分布且F检验方差齐者用t检验，服从正态分布但方差不齐者采用近似法t＇检验或秩和检验(Wilcoxon法). 血清NO与瘤体大小间相关性采用直线相关分析. 资料陈述用x±s形式.
2 结果
, 百拇医药
肝癌组血清NO(12±3)μmol·L-1明显高于对照组(10±2)μmol·L-1, P<0.01. 合并LC组(14±2)μmol·L-1高于无合并LC组(11±3)μmol·L-1，P<0.05. AFP≥400μg·L-1组(15±2)μmol·L-1高于AFP<400μg·L-1组(11±3)μmol·L-1，P<0.05. 血清NO与瘤体直径呈正相关，r=0.5132,P<0.05.
, 百拇医药
3 讨论
NO参与包括肿瘤在内的病理过程,如在巨噬细胞及枯否细胞介导的肿瘤细胞毒作用中起重要作用. 最近研究表明，妇科肿瘤、乳腺癌、结肠癌、和脑胶质瘤中，NOS的表达和活性及NO代谢产物水平增高，并与肿瘤的生长有密切关系[2-5]. 动物实验也证实NO在肿瘤的生长中起重要作用[6]. 我们发现，原发性肝癌组患者血清NO明显高于健康对照组,且与有无合并肝硬变及甲胎蛋白的含量有关，与肿瘤大小呈正相关关系，说明NO在原发性肝癌的生长等生物学行为中起重要作用. 国内报道肝硬变患者5a～30a内，约有10%发展成肝癌. 在肝硬变的慢性发展过程中，升高的NO影响肝细胞蛋白合成和能量代谢，与其低蛋白血症、低凝血因子及其他肝功能障碍有密切关系[7]，此点与本实验结论相符. 本研究与Moriyama et al[8,9]的结果具有一定的相似之处，他们发现肝癌患者血清NO代谢产物水平升高，可作为肝癌的标志物，且与肿瘤的表面积、体积间呈正相关关系. 故监测NO有助于动态观察肝癌病情变化[10].
, 百拇医药
Lala et al[11]将NO介导的促进肿瘤生长及转移的可能机制归结为：①直接刺激肿瘤细胞增殖；②促进肿瘤细胞侵袭；③促进肿瘤血管生成；④对肿瘤新生血管微循环调节作用；⑤对宿主抗肿瘤防御的抑制. NO的扩血管作用对维持肿瘤血管最大舒张状态，以保证肿瘤快速生长的血液供应具有重要意义. 现在认为，检测肿瘤血管密度可用来判断实体肿瘤的预后，但肿瘤血管密度的测定存在着不足，如不能提供血管形成的生化途径，不能用来监控疗效和对肿瘤血管形成进行总的评价，与之相比，动态监测NO的变化较为容易，可提供有关血管形成的肿瘤生物行为信息.
原发性肝癌生存期短，发展快，转移早，预后较差，术后复发率及死亡率均较高. 故早发现、早诊断对其预后及疗效有重要意义. 肝癌的发生发展是一个多因素参与的复杂过程，AFP是一项敏感而特异的原发性肝癌标志物，与B超结合仅可发现约60%～70%的HCC；而且在小肝癌中阳性率更低，仅25%. 学者不断筛选出新的具有诊断价值的HCC标志物[12]，如γ-谷氨酸转肽酶同工酶Ⅱ(GGTⅡ)、AFP异质体等，与AFP联合检测大大提高HCC的阳性检出率. 通过本研究，是否可通过检测NO来联合协助诊断，尚有待于进一步大量实验. 同时，临床对肝癌的发展、药物及介入治疗效果的判断多通过CT及MRI等较为昂贵的检查手段来监测，加重患者经济负担的同时增加了癌症患者接触放射线的机会. 本研究中原发性肝癌患者血清NO含量及其与肝癌瘤体相关关系证实了NO在肝癌发展中起重要作用. Ahn et al[13]也证实NO及其产物为肝损害的原因，可作为肝肿瘤的激活物，促进肿瘤的发生；同时肿瘤组织中诱生型NOS可作为新生毛细血管和卵圆形细胞系的标志物. 可见，肝癌患者血清NO含量的测定对肝癌诊断、治疗及预后的评价具有一定的意义. NOS抑制剂可以通过影响NO的产生而改变肿瘤的生物学特性，具有良好的抗肿瘤前景. 因此，原发性肝癌患者血清NO含量的研究，可能为肝癌的治疗开辟新的途径.
, 百拇医药
4 参考文献
1 Green LC, Wagner DA, Glogowski J, Skipper PL, Wishnok JS, Tannenbaum SR. Analysis of nitrate, nitrite, and [15N] nitrate
in biological fluids. Anal Biochem, 1982;126:131-138
2 Thomsen LL, Miles DW. Role of nitric oxide in tumor progression: lessons from human tumors. Cancer Metastasis Rev,1998;17:107-118
, 百拇医药
3 Zhao WM, Ma XH, Li ZJ, Yang CF. The effect of nitric oxide on gastric carcinoma metastasis. World J Gastroenterol,1998;4(Suppl 2):78-79
4 Yun J, Guo F, Ebert MPA, Malfertheiner P. Expression of inducible nitric oxide synthase in human gastric cancer.
World J Gastroenterol, 1999;5:430-431
5 沈靖, 王润田, 徐希平. NO，iNOS与胃癌关系的研究进展. 世界华人消化杂志， 2000;8:320-322
, 百拇医药 6 Jenkins DC, Charles IG, Thomsen LL, Moss DW, Holmes LS, Baylis SA, Rhodes P, Westmore K, Emson PC, Moncada S. Role of
nitric oxide in tumor growth. Proc Natl Acad Sci USA, 1995;92:4392-4396
7 关玉娟，王家咙，高评. 一氧化氮及一氧化氮合酶与肝病. 中华内科杂志, 1999;38:353-354
8 Moriyama A, Masumoto A, Nanri H, Tabaru A, Unoki H, Imoto I, Ikeda M, Otsuki M. High plasma concentrations of nitrite/nitrate
, 百拇医药
in patients with hepatocellular carcinoma. Am J Gastroenterol, 1997;92:1520-1523
9 Moriyama A, Tabaru A, Unoki H, Abe S, Masumoto A, Otsuki M. Plasma nitrite/nitrate concentrations as a tumor marker
for hepatocellular carcinoma. Clin Chim Acta, 2000;296:181-191
10 Moussa YI, Plevris JN, Hayes PC. Plasma nitrites/nitrates in HCV infection and hepatocellular carcinoma. Eur J Gastroenterol
, http://www.100md.com
Hepatol, 2000;12:159-163
11 Lala PK, Orucevic A. Role of nitric oxide in tumor progression: lessons from experimental tumors.
Cancer Metastasis Rev, 1998;17:91-106
12 沈鼎明. 肝癌标志物的研究动向. 中华肝脏病杂志, 1999;7:168-169
13 Ahn B, Han BS, Kim DJ, Ohshima H. Immunohistochemical localization of inducible nitric oxide synthase and 3-nitrotyrosine in rat
liver tumors induced by N-nitrosodiethylamine. Carcinogenesis, 1999;20:1337-1344, 百拇医药(关玉娟1 周 东2)