人胚胎小肠APUD细胞中EC细胞的超微结构
1哈尔滨市职工医学院 黑龙江省哈尔滨市 150080
2哈尔滨医科大学电镜中心
3黑龙江鹤北林业医院儿科
4黑龙江省电子工业学校医务所
项目负责人 孟祥君 Tel. 0086-451-6347930
收稿日期 2000-11-13 接受日期 2001-02-18
主题词 小肠/细胞学；小肠/超微结构；小肠/胚胎学；APUD细胞/超微结构
, 百拇医药
孟祥君, 杨玲, 宋雁南, 刘桂芬, 宁书斐, 马然. 人胚胎小肠APUD细胞中EC细胞的超微结构. 世界华人消化杂志，2001；9(7)：830-831
目前已知在消化道内有10余种APUD细胞，但对人胚胎时期小肠APUD细胞的超微结构报道 甚少. 我们着重观察了胚胎发育中APUD细胞中的EC细胞的超微结构特点，探讨其分类，起源及在发生过程中的功能.
1 材料和方法取妊娠8wk～28wk水囊引产的人胚胎28例，其中8wk 1例、10wk, 12wk, 14wk, 16wk, 18wk, 20wk, 22wk, 24wk 和28wk各3例，各期胚胎均测其顶臀长加以验证. 取各胚胎空肠的组织块用30g·L-1戊二醛固定，10g·L-1四氧化锇后固定，丙酮系列脱 水，环氧树脂EPON812包埋，半薄切片，光镜定位，Reichert超薄切片机切片，醋酸双氧铀 一柠檬酸铅双重染色，H-600A透射电镜观察.
, 百拇医药
2 结果2.1 我们观察到的EC细胞于胚胎发育wk8即可在复层肠上皮的基底 层观察到(图1). 细胞分散存在，其形态呈圆形或锥形，或顶端略细的瓶状，细胞基底面 附于基膜上，顶端不暴露于消化管腔内，但我们于胚胎发育20wk见到有极少量开放型的EC细胞，其细胞顶端有少量微绒毛伸入管腔. EC细胞核多呈圆形或椭圆形，胞质内细胞器较丰富，分泌颗粒多位于细胞核的一侧靠近基膜面. 颗粒大小为100nm～580nm，呈圆形，卵圆形、条形、梨形、三角形、肾形和双凹形. 此外尚可见到一种胞核及胞质均极 明亮淡染的EC细胞，此细胞核呈圆形，常染色质多，异染色质少，胞质内含有大量的粗面内质网，线粒体较丰富，分泌颗粒多，且位于核的一侧靠近基膜面.
2.2 根据内分泌细胞的超微结构特点，分泌颗粒的形状和文献，我们在胚胎期空肠内观察到几种不同形态的EC细胞，其分泌颗粒远比生后大，这可能是胚胎发育时期内分泌细胞的特点. 我们依其颗粒的大小，将此EC细胞分为3类：①中颗粒EC细胞，颗粒大小约为250nm～350nm，数量最多，相当于生后的EC1细胞(图2)；②大颗粒EC细胞，颗粒大小约为350nm～580nm，数目很少，相当于生后的EC2细胞(图3)； ③小颗粒EC细胞，颗粒大小约为100nm～250nm，数目最少，相当于生后的ECN细胞(图4).
, 百拇医药
图1 胚胎发育8wk时的EC细胞. ×10000
图2 EC1细胞，颗粒大小约为250nm～350nm. ×10000
图3 EC2细胞，颗粒大小约为150nm～580nm. ×10000
图4 EC-N细胞，颗粒大小约为100nm～250nm. ×10000
3 讨论3.1 胞核及胞质均极明亮淡染的EC细胞，我们推测其为少分化的EC细胞. 一般报道EC细胞在肠道内为闭锁型的内分泌细胞[1]，但我们于胚胎发育wk20见到有极少量开放型的EC细胞，其细胞顶端有少量微绒毛伸入管腔.
, 百拇医药
3.2 关于APUD细胞在消化道内出现的时间文献记载不一[2-9] ，我们于胚胎发育8wk肠上皮的基底层观察到APUD细胞，早于文献报道，与张莉等观察到人胚胎胃APUD细胞的时间相一致. 对于APUD细胞的胚胎来源，至今仍有争论，1977年Pearse[10]，根据胃肠内分泌细胞的化学和超微结构特 点，提出神经崤起源的观点. 有些学者以形态学为依据，认为APUD细胞来源 于未分化的粘膜上皮细胞. 根据我们的观察结果，鉴于APUD细胞在胚胎8wk空肠复层 柱状上皮基底层就已出现，上皮以外固有结缔组织未见有其存在 或迁入上皮的迹象，我们认为APUD细胞起源于粘膜上皮本身，并非来自其他组织，但是根据 APUD细胞的嗜银、嗜铬的化学特性，也不排除它来源于早期的外胚层母细胞，而后迁移到内胚层细胞间的可能性[11-15].
3.3 胎期小肠仅产生和储存胎粪，而生后小肠必须执行母乳的消化与吸收. APUD细胞在围产期可能产生某些激素，调节并适应肠内容物的突然改变. 它是一种感觉内分泌器官，是胎后期和围产期的环境调控器，我们于12wk见到的开放型EC细胞也可以支持以上设想.
, 百拇医药
4 参考文献1 成令忠，主编. 组织学. 人民卫生出版社，1994；1127
2 贾友苏. 人胚胎小肠内分泌细胞的初步观察. 安徽医科大学学报，1989;24:178
3 Bjerknes M, Cheng H. Mucous cells and cell migration in the mouse duodenal epithelium. Anat Rec, 1985;212:69
4 Calvert R, Pothier P. Migration of fetal intestinal intervillous cells in neonatal mice. Anat Rec, 1990;227:199
5 Fujita T. Messenger substances of neurons and paraneurons: theirchemical natu re and the routes and ranges of theirtransport to
, 百拇医药
targets. Biomed Res, 1983;4:139
6 Hakanson R. Histamine in endocrine cells in thestomach.A survey of sever al species using a panel ofhistamine antibodjes.
Histochemistry, 1986;86:5
7 Ito H. Histological and immunohistochemical studies of the Segi′s cap, a lar ge aggregation of endocrine cells on the intestinal villi
of porcine fetuses and neonates. Arch Histol Jap, 1998;48:399
, 百拇医药
8 Spencer J. Human Peyer′s patches:an immunohistochemical study. Gut, 1986;27:405
9 Tamura S, Fujita H. Fine structural aspects on the renewal and development of surface mucous cells and glandular cells of the
gastric body of the adult golden hamster. Arch Histol Jap, 1983;46:501
10 Pearse AGE. Neurae crest of the endorine polyhentide (APUD) all of the gastrointestinal tract and pancreas. Gut, 1971;12:783
, 百拇医药
11 林静, 王超, 景燕, 庞有成, 杨红, 乔进朋, 陈勃, 姚希贤. 胃癌组织中内分泌细胞的表达及与细胞凋亡的关系. 世界华人消化杂志，2000;8:1054-1055
12 王道存, 王立东, 贾云英, 刘益清, 冯常炜, 唐芙爱, 周琦, 李振锋, 崔广林. 大肠癌内分泌样癌细胞的免疫组化研究. 新消化病学杂志,1997;5:435-436
13 Pan QS, Fang ZP, Zhao YX. Immunocytochemical identification and locali zation of APUD cells in the gut of seven stomachless
teleost fishes. World J Gastroenterol, 2000;6:96-101
, http://www.100md.com 14 Ji XL, Shen MS, Yin T. Liver inflammatory pseudotumor or parasitic gra nuloma? World J Gastroenterol, 2000;6:458-460
15 Pan QS, Fang ZP, Huang FJ. Identification, localization and morphology of APUD cells in gastroenteropancreatic system of
stomach-containing teleosts. World J Gastroenterol, 2000;6:842-847, 百拇医药(孟祥君1 杨 玲1 宋雁南2 刘桂芬3 宁书斐4 马 然1)
2哈尔滨医科大学电镜中心
3黑龙江鹤北林业医院儿科
4黑龙江省电子工业学校医务所
项目负责人 孟祥君 Tel. 0086-451-6347930
收稿日期 2000-11-13 接受日期 2001-02-18
主题词 小肠/细胞学；小肠/超微结构；小肠/胚胎学；APUD细胞/超微结构
, 百拇医药
孟祥君, 杨玲, 宋雁南, 刘桂芬, 宁书斐, 马然. 人胚胎小肠APUD细胞中EC细胞的超微结构. 世界华人消化杂志，2001；9(7)：830-831
目前已知在消化道内有10余种APUD细胞，但对人胚胎时期小肠APUD细胞的超微结构报道 甚少. 我们着重观察了胚胎发育中APUD细胞中的EC细胞的超微结构特点，探讨其分类，起源及在发生过程中的功能.
1 材料和方法取妊娠8wk～28wk水囊引产的人胚胎28例，其中8wk 1例、10wk, 12wk, 14wk, 16wk, 18wk, 20wk, 22wk, 24wk 和28wk各3例，各期胚胎均测其顶臀长加以验证. 取各胚胎空肠的组织块用30g·L-1戊二醛固定，10g·L-1四氧化锇后固定，丙酮系列脱 水，环氧树脂EPON812包埋，半薄切片，光镜定位，Reichert超薄切片机切片，醋酸双氧铀 一柠檬酸铅双重染色，H-600A透射电镜观察.
, 百拇医药
2 结果2.1 我们观察到的EC细胞于胚胎发育wk8即可在复层肠上皮的基底 层观察到(图1). 细胞分散存在，其形态呈圆形或锥形，或顶端略细的瓶状，细胞基底面 附于基膜上，顶端不暴露于消化管腔内，但我们于胚胎发育20wk见到有极少量开放型的EC细胞，其细胞顶端有少量微绒毛伸入管腔. EC细胞核多呈圆形或椭圆形，胞质内细胞器较丰富，分泌颗粒多位于细胞核的一侧靠近基膜面. 颗粒大小为100nm～580nm，呈圆形，卵圆形、条形、梨形、三角形、肾形和双凹形. 此外尚可见到一种胞核及胞质均极 明亮淡染的EC细胞，此细胞核呈圆形，常染色质多，异染色质少，胞质内含有大量的粗面内质网，线粒体较丰富，分泌颗粒多，且位于核的一侧靠近基膜面.
2.2 根据内分泌细胞的超微结构特点，分泌颗粒的形状和文献，我们在胚胎期空肠内观察到几种不同形态的EC细胞，其分泌颗粒远比生后大，这可能是胚胎发育时期内分泌细胞的特点. 我们依其颗粒的大小，将此EC细胞分为3类：①中颗粒EC细胞，颗粒大小约为250nm～350nm，数量最多，相当于生后的EC1细胞(图2)；②大颗粒EC细胞，颗粒大小约为350nm～580nm，数目很少，相当于生后的EC2细胞(图3)； ③小颗粒EC细胞，颗粒大小约为100nm～250nm，数目最少，相当于生后的ECN细胞(图4).
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图1 胚胎发育8wk时的EC细胞. ×10000
图2 EC1细胞，颗粒大小约为250nm～350nm. ×10000
图3 EC2细胞，颗粒大小约为150nm～580nm. ×10000
图4 EC-N细胞，颗粒大小约为100nm～250nm. ×10000
3 讨论3.1 胞核及胞质均极明亮淡染的EC细胞，我们推测其为少分化的EC细胞. 一般报道EC细胞在肠道内为闭锁型的内分泌细胞[1]，但我们于胚胎发育wk20见到有极少量开放型的EC细胞，其细胞顶端有少量微绒毛伸入管腔.
, 百拇医药
3.2 关于APUD细胞在消化道内出现的时间文献记载不一[2-9] ，我们于胚胎发育8wk肠上皮的基底层观察到APUD细胞，早于文献报道，与张莉等观察到人胚胎胃APUD细胞的时间相一致. 对于APUD细胞的胚胎来源，至今仍有争论，1977年Pearse[10]，根据胃肠内分泌细胞的化学和超微结构特 点，提出神经崤起源的观点. 有些学者以形态学为依据，认为APUD细胞来源 于未分化的粘膜上皮细胞. 根据我们的观察结果，鉴于APUD细胞在胚胎8wk空肠复层 柱状上皮基底层就已出现，上皮以外固有结缔组织未见有其存在 或迁入上皮的迹象，我们认为APUD细胞起源于粘膜上皮本身，并非来自其他组织，但是根据 APUD细胞的嗜银、嗜铬的化学特性，也不排除它来源于早期的外胚层母细胞，而后迁移到内胚层细胞间的可能性[11-15].
3.3 胎期小肠仅产生和储存胎粪，而生后小肠必须执行母乳的消化与吸收. APUD细胞在围产期可能产生某些激素，调节并适应肠内容物的突然改变. 它是一种感觉内分泌器官，是胎后期和围产期的环境调控器，我们于12wk见到的开放型EC细胞也可以支持以上设想.
, 百拇医药
4 参考文献1 成令忠，主编. 组织学. 人民卫生出版社，1994；1127
2 贾友苏. 人胚胎小肠内分泌细胞的初步观察. 安徽医科大学学报，1989;24:178
3 Bjerknes M, Cheng H. Mucous cells and cell migration in the mouse duodenal epithelium. Anat Rec, 1985;212:69
4 Calvert R, Pothier P. Migration of fetal intestinal intervillous cells in neonatal mice. Anat Rec, 1990;227:199
5 Fujita T. Messenger substances of neurons and paraneurons: theirchemical natu re and the routes and ranges of theirtransport to
, 百拇医药
targets. Biomed Res, 1983;4:139
6 Hakanson R. Histamine in endocrine cells in thestomach.A survey of sever al species using a panel ofhistamine antibodjes.
Histochemistry, 1986;86:5
7 Ito H. Histological and immunohistochemical studies of the Segi′s cap, a lar ge aggregation of endocrine cells on the intestinal villi
of porcine fetuses and neonates. Arch Histol Jap, 1998;48:399
, 百拇医药
8 Spencer J. Human Peyer′s patches:an immunohistochemical study. Gut, 1986;27:405
9 Tamura S, Fujita H. Fine structural aspects on the renewal and development of surface mucous cells and glandular cells of the
gastric body of the adult golden hamster. Arch Histol Jap, 1983;46:501
10 Pearse AGE. Neurae crest of the endorine polyhentide (APUD) all of the gastrointestinal tract and pancreas. Gut, 1971;12:783
, 百拇医药
11 林静, 王超, 景燕, 庞有成, 杨红, 乔进朋, 陈勃, 姚希贤. 胃癌组织中内分泌细胞的表达及与细胞凋亡的关系. 世界华人消化杂志，2000;8:1054-1055
12 王道存, 王立东, 贾云英, 刘益清, 冯常炜, 唐芙爱, 周琦, 李振锋, 崔广林. 大肠癌内分泌样癌细胞的免疫组化研究. 新消化病学杂志,1997;5:435-436
13 Pan QS, Fang ZP, Zhao YX. Immunocytochemical identification and locali zation of APUD cells in the gut of seven stomachless
teleost fishes. World J Gastroenterol, 2000;6:96-101
, http://www.100md.com 14 Ji XL, Shen MS, Yin T. Liver inflammatory pseudotumor or parasitic gra nuloma? World J Gastroenterol, 2000;6:458-460
15 Pan QS, Fang ZP, Huang FJ. Identification, localization and morphology of APUD cells in gastroenteropancreatic system of
stomach-containing teleosts. World J Gastroenterol, 2000;6:842-847, 百拇医药(孟祥君1 杨 玲1 宋雁南2 刘桂芬3 宁书斐4 马 然1)