L-365260对SGC-7901细胞中Bcl-2,Bax基因的调控
L-365260;胃肿瘤,病理学;基因，Bcl-2;Bax;细胞凋亡;肿瘤细胞，培养的;原癌基因;脱噬作用,主题词,1材料和方法,1.1材料,1.2方法,1.2.1RT-PCR检测,1.2.2流式细胞仪检测,1.2.3检测胃癌细胞凋亡,2结果,2.1Bcl-2mRN
主题词 L-365260；胃肿瘤/病理学；基因，Bcl-2；Bax；细胞凋亡；肿瘤细胞，培养的；原癌基因；脱噬作用
唐卓斌, 刘为纹. L-365260对SGC-7901细胞中Bcl-2, Bax基因的调控. 世界华人消化杂志，2001；9(7)：831-832
我们以前研究发现L-365260可诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡，但其作用机制未见报道. 为此，我们就L-365260对SGC-7901细胞中Bcl-2和Bax基因的调控作用进行了研究.
1 材料和方法
1.1 材料 L-365260由Manning教授惠赠，人胃癌细胞株SGC-7901由本科培养；引物序列如下：Bax:上游引物5′-GGCCCACCAGCTCTGAGCAGA-3′ 下游引物5′-GCCACGTGGGCGTCCCAAAGT-3′; Bcl-2:上游引 物5′-GTGGAGGAGCTCTTCAGGGA-3′; 下游引物5′-AGGCACCCAGGGTGATGCAA-3′;GAPDH: 上游引物CCACCCATGGCAAATTCCATGGCA下游引物TCTAGACGGCAGGTCAGGTCCAC扩增片段大小分别为479, 304, 598bp；引物均由上海生工公司合成. 逆转录试剂盒Asccess RT-PCR System(A1250)购自Promega公司，TripureTM Isolation Reagent kit购自德国宝灵曼公司，2400型PCR循环仪为美国Perkin-Elmer公司产品，紫外线凝胶成象系统为美国Bio-Rad公司产品.
1.2 方法
1.2.1 RT-PCR检测 选择对数生长期SGC-7901细胞，以4.5×108个L-1接种于6孔培养板中，每孔1.5mL，待其生长至对数生长期，每孔加入终浓度为1×10-7mol·L-1的L-365260，继续无血清培养6, 12, 24, 48h后提取RNA，按宝灵曼RNA提取试剂盒说明书操作，设未处理的胃癌细胞为空白对照. 采用25μL逆转录反应体积，内含RNA模板2μL，5×Buffer 5μL，dNTP 0.5μL，MgSO4 1μL，Bax，Bcl-2，GAPDH引物各1.5μL ......
您现在查看是摘要页，全文长 10117 字符。