HSV-tk/GCV自杀基因系统对人食管癌细胞的作用
食管肿瘤,治疗;基因疗法;单纯病毒属,遗传学;胸苷激酶,遗传学;阿昔洛韦,项目负责人,主题词,0,引言,1,材料和方法,1.1,材料,1.2,方法,2,结果,2.1HSV-tk基因的整合和表达,2.2GCV对ECA109,tk的杀伤作用,图,1,2,3,3,讨论,4,参考文献
1中国人民解放军广州军区广州总医院消化内科 广东省广州市 510010中国人民解放军第四军医大学 2西京医院消化科 3生化教研室 陕西省西安市 710032
项目负责人 赵亚刚，510010，广东省广州市流花路111号.
收稿日期 2001-04-15 接受日期 2001-04-28
主题词 食管肿瘤/治疗；基因疗法；单纯病毒属/遗传学；胸苷激酶/遗传学；阿昔洛韦
赵亚刚, 张学庸, 惠宏襄, 王成济. HSV-tk/GCV自杀基因系统对人食管癌 细胞的作用. 世界华人消化杂志，2001；9(8)：961-962
0 引言基因治疗是当前肿瘤治疗的前沿课题[1-10]，其中“药物敏感基因(drug sensiti vity gene)”的应用尤为引人嘱目，单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)/丙氧鸟苷(GCV)系统是目前最常用的药敏基因治疗系统[11-16]. 我们采用携带HSV-tk基因的重组逆转录病毒感染人食管癌细胞系ECA109，观察HSV-tk/GCV系统对食管癌细胞的体内外杀伤作用.
1 材料和方法1.1 材料 限制性内切酶、T4 DNA连接酶和Taq DNA聚合酶购自Promega公司；LipofectAMIN E Kit为Life Technoligies产品；G418, GCV购自Sigma公司. pIC19R/MC1-TK质粒由美国匹兹堡大学Huang L.教授惠赠，内含1.7kb的HSV-tk cDNA片段；逆转录病毒载 体pDOR-neo质粒由本文作者惠宏襄提供. 逆转录病毒辅助包装细胞PA317购自美国ATCC公司；人食管细胞癌细胞系ECA109由第四军医大学消化病研究所提供；6周龄Balb/c 雄性裸小鼠由第四军医大学实验动物中心提供并饲养.
1.2 方法 用限制性内切酶消化pIC19R/MC1-TK质粒，凝胶电泳证实有所需1.7kb的HSV-tk cDNA片段，将其克隆入pBluescript质粒，并对tk基因进行序列测定. 然后将tk基因定 向克隆入逆转录病毒载体pDOR-neo中 ......
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