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编号:10693808
炎性肠病患者血清可溶性Fas,IL-6的变化
http://www.100md.com 2002年7月15日 《世界华人消化杂志》 2002年第7期
     吴兴桂,王广伟,侯宪典,宋豫军,齐保庆,河南省平顶山市第一五二医院普通外科 河南省平顶山市 467000

    项目负责人 吴兴桂,467000,河南省平顶山市第一五二医院普通外科 wujianxia@hotmail.com

    电话: 0375-3933355-43075 传真:0375-3933355

    收稿日期 2002-03-05 接收日期 2002-03-18

    摘要

    目的:研究血清可溶性Fas,IL-6与炎性肠病及其与溃疡性结肠炎临床疾病活动性的关系.

    方法:用ELISA法检测44例溃疡性结肠炎、25例克罗恩病及33例正常人血清可溶性Fas,IL-6水平.
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    结果:对照组血清可溶性Fas为33±6ng/L,溃疡性结肠炎为58±8ng/L,克罗恩病为40±4ng/L,溃疡性结肠炎与克罗恩病和对照组相比较亦存在显著性差异(P<0.01),而且溃疡性结肠炎和克罗恩病相比较都存在显著性差异(P<0.01);对照组血清IL-6为62±6ng/L,溃疡性结肠炎为98±8ng/L,克罗恩病为72±6ng/L,溃疡性结肠炎与克罗恩病和对照组相比较都存在显著性差异(P<0.01),而且溃疡性结肠炎和克罗恩病相比较都存在显著性差异(P<0.01).溃疡性结肠炎轻、中、重度组的血清可溶性Fas的水平分别为:48±4ng/L,58±8ng/L,67±3ng/L.轻、中度比较,中、重度比较都存在显著性差异(P<0.01);溃疡性结肠炎轻、中、重度组的血清IL-6的分别为94±12g/L,100±6ng/L,97±1ng/L,各组间比较皆无显著性差异(P>0.05).

    结论:炎性肠病与血清sFas,IL-6密切相关,溃疡性结肠炎较克罗恩病有更强烈的自身免疫反应,血清sFas与溃疡性结肠炎的临床活动性有关.
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    吴兴桂,王广伟,侯宪典,宋豫军,齐保庆. 炎性肠病患者血清可溶性Fas,IL-6的变化.世界华人消化杂志 2002;10(7):865-866

    0 引言可溶性Fas(sFas)在自身免疫疾病中的异常表达可改变Fas与FasL对细胞凋亡的正常调控,从而导致淋巴细胞活性改变并影响T、B淋巴细胞间的相互调控,IL-6通过对T细胞不同分化阶段均发挥刺激作用而对细胞免疫进行调节.本研究旨在通过对61例炎性肠病患者血清sFas 及IL-6的测定,探讨二者与炎性肠病的关系,并评价其临床价值.

    1 材料和方法

    1.1
材料 溃疡性结肠炎患者44例,男20例,女24例,平均年龄45岁,为1995年至2001年在我院已确诊正规治疗前住院患者.溃疡性结肠炎的诊断依据患者的临床表现、结肠镜、组织病理学及放射学检查确定.溃疡性结肠炎的活动性根据Truelove-Witts 分类法[1]分3组:轻度组12例,中度组18例,重度组14例.克罗恩病患者25例,男15例,女10例,平均年龄42岁,亦为1995-2001年在我院住院的患者.克罗恩病的诊断根据疾病的临床表现以及结肠镜、组织病理、放射线检查而确定.对照组33例,均来源于我院普通外科腹股沟疝、痔、肛瘘患者,男13例,女20例,平均年龄48岁.空腹抽取炎性肠病患者及对照组静脉血2ml,室温自然凝固,经3000r/min离心20min,收集血清,分装后-70℃冻存.取出标本一次融解后测定sFas和IL-6.
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    1.2 血清sFas及IL-6水平测定 采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)法(试剂盒由美国Genzyme公司生产).从4℃冰箱中取出96孔抗sFas或IL-6单抗预包被板条平衡至室温;加入标准品和标本稀释液100μL至空白孔和零孔,加入已稀释的不同浓度的标准品100μL至相应孔中;在各样本孔中加入标准品和标本稀释液50μL,再加标本50μL稀释,混匀,用封板胶纸封住反应孔,37℃ 90min;洗板后除空白孔外,每孔加已稀释的生物素标记二抗100μL,封住板孔37℃ 60min;洗板后除空白孔外,每孔加稀释好的酶联物100μL,封住板孔37℃30min;洗板后每孔加底物TMB和0.02% H2O2各50μL,避光37℃ 20min;每孔加终止液4mol/L H2SO4 50μL,混匀终止反应,测A值(波长450nm);分别绘出sFas及IL-6的标准曲线,在曲线上查所测样品的sFas 和IL-6的含量.
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    统计学处理 采用SPSS软件处理数据资料,所有数据均以x±s 表示,根据方差分析或 t检验分析各个均数.

    2 结果本研究的结果:对照组血清可溶性Fas为33±6ng/L,溃疡性结肠炎为58±8ng/L,克罗恩病为40±4ng/L,溃疡性结肠炎与克罗恩病和对照组相比较都存在显著性差异(P<0.01),而且溃疡性结肠炎和克罗恩病相比较都存在显著性差异(P<0.01);对照组血清IL-6为62±6ng/L,溃疡性结肠炎为98±8ng/L,为72±6ng/L,溃疡性结肠炎与克罗恩病和对照组相比较都存在显著性差异(P<0.01),而且溃疡性结肠炎和克罗恩病相比较都存在显著性差异(P<0.01).血清可溶性Fas、IL-6与溃疡性结肠炎活动性的关系:轻、中、重度组的血清可溶性Fas的水平分别为:48±4ng/L,58±8ng/L,67±3ng/L轻、中度比较,中、重度比较都存在显著性差异(P<0.01);轻、中、重度组的血清IL-6的分别为94±12ng/L,100±6ng/L,97±1ng/L,各组间比较皆无显著性差异(P>0.05).
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    3 讨论Fas(APo-1/CD95)是一种跨膜糖蛋白,属于肿瘤坏死因子/神经生长因子(TNF/NGF)受体超家族,以膜分子形式(mFas)或可溶性形式(sFas)存在.mFas阳性的敏感态细胞在被Fas天然配体(FasL)或抗Fas特异性单抗激活后迅速凋亡.故Fas可视为一种介导凋亡信号的受体.sFas是Fas mRNA发生变异剪接后编译的蛋白质产物, IL-6刺激Fas基因转录,是与Fas受体有关的细胞凋亡诱导因子, IL-6对细胞免疫的调节可表现在对T细胞不同分化阶段均发挥刺激作用.sFas的变化与淋巴细胞活性以及增生有关.现已证实T细胞sFasL高表达,尤以活化的T细胞,而B细胞,巨噬细胞,NK细胞以表达Fas为主.活化的B细胞Fas高表达,并因此对表达FasL的T细胞杀伤作用敏感.Fas系统的启动可导致自身免疫病,并可产生组织损害.许多肿瘤、自身免疫性疾病和其他一些疾病都存在Fas和IL-6的表达异常.目前研究表明:食管鳞癌,肝门部胆管癌,原发性肝癌,各种慢性肝炎都存Fas异常[1-7];结肠癌,黑色素瘤,妇科恶性肿瘤,肝细胞癌,非霍奇金氏淋巴瘤,肾癌, Grave’s病、统性红斑狼疮、类风湿关节炎、Ⅰ型糖尿病血清sFas异常[8-14];乳癌,肺癌,间质性肺病,病毒性肝炎,小儿肺炎,哮喘,麻疹等存在IL-6异常的异常[16-19].但目前有关血清sFas、 IL-6水平与炎性肠病患者关系的报道还没见到.
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    本研究显示,溃疡性结肠炎与克罗恩病和正常对照组相比较都存在显著性差异(P<0.01),而且溃疡性结肠炎和克罗恩病相比较都存在显著性差异(P<0.01);溃疡性结肠炎与克罗恩病血清IL-6和对照组相比较都存在显著性差异(P<0.01),而且溃疡性结肠炎和克罗恩病相比较亦存在显著性差异(P<0.01),这说明炎性肠病与sFas、IL-6密切相关.其作用机制可能是高水平的sFas、IL-6大大增强了机体的细胞免疫所致.另外,我们注意到溃疡性结肠炎的sFas、 IL-6水平都明显高于较克罗恩病,这提示溃疡性结肠炎较克罗恩病有更强烈的自身免疫反应.但本研究不能解释溃疡性结肠炎与克罗恩病的发生有特定部位.溃疡性结肠炎患者血清sFas轻、中度比较,中、重度比较都存在显著性差异(P<0.01);轻、中、重度组的血清IL-6各组间比较皆无显著性差异(P>0.05).因此,可以推定,在血清sFas和IL-6中,血清sFas还与溃疡性结肠炎的活动性有关.

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