幽门螺杆菌相关性消化性溃疡血清内皮素、降钙素基因相关肽的变化及意义
陈朝元,王岩,福建中医学院附属人民医院 福建省福州市 350004
项目负责人 陈朝元,350004,福建省福州市817中路602号,福建中医学院附属人民医院消化内科. ccycz@yahoo.com.cn
电话:0591-3258135-272
收稿日期 2002-07-26 接受日期 2002-08-07
摘要
目的:观察幽门螺杆菌(Hp)相关性消化性溃疡(PU)患者血清内皮素、降钙素基因相关肽的变化，探讨其临床意义.
方法:对100例PU患者进行Hp和血清内皮素、降钙素基因相关肽检测，并分析其相互关系.
, 百拇医药
结果:Hp阳性PU组血清ET高于Hp阴性组，而CGRP低于Hp阴性组(P <0.01) ;Hp阳性PU患者血清ET与CGRP的相关系数r =-0.222,P =0.027,呈显著负相关.
结论:Hp感染可能导致ET释放增加，抑制CGRP释放.推测ET/CGRP失衡参与PU发生的病理生理过程,是Hp相关性PU发病机制之一.
陈朝元,王岩. 幽门螺杆菌相关性消化性溃疡血清内皮素、降钙素基因相关肽的变化及意义.世界华人消化杂志
2002;10(11):1349-1450
0 引言幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)是消化性溃疡(PU)的重要病因之一.胃溃疡(GU)患者Hp感染率为80-90 %,十二指肠溃疡(DU)患者Hp感染率90-100 %.但其致病机制目前尚不十分清楚，可能是多种途径的综合作用的结果.内皮素(endothelin，ET)，降钙素基因相关肽(CGRP)是一对具有拮抗作用的血管活性肽，参与胃黏膜血流的调节.其间的平衡失调是影响胃黏膜屏障的重要内在因素之一.本研究旨在观察Hp相关性PU患者血清ET、CGRP水平的变化，以探讨其可能的临床意义.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 2001年间因上腹疼痛的门诊或住院病例,经电子胃镜确诊的100例活动性PU (连续性病例),男71例,女29例，平均(36.37±8.21)岁.为排除其他影响血清ET、CGRP水平检测的因素，纳入对象的年龄必须< 45岁，同时排除心、脑、肺、肝、肾等重要器官疾病.根据Hp的感染情况分为二组:(1)Hp阳性组78例,男53例,女25例,平均年龄(34.68±11.2)岁.其中GU26例，DU52例.(2)Hp阴性组22例，男14例，女8例，平均年龄(37.28±10.67)岁.其中GU9例，DU13例.
1.2 方法
1.2.1 Hp检测及判断 胃镜下，在胃窦部距幽门5 cm范围内小弯侧取2块黏膜标本，分别进行快速尿素酶试验和组织学检查(WS染色).两项中有一项阳性者即为Hp阳性，两项均阴性者即为Hp阴性.
, 百拇医药
1.2.2 ET、CGRP检测 所有受试对象均于清晨8时前抽空腹静脉血5ml，加抗凝剂.置于含10 %EDTA二钠30 ul和抑肽酶40 ul试管中混匀.4 ℃ 3 000 r/min离心10 min,分离血浆分装2份,-30 ℃保存待测.测定前，样本置于室温或冷水中复融混匀,再次4 ℃ 3 000 r/min离心10 min,取上清液用放射免疫法测定.试剂盒及测定方法由北京东亚免疫技术研究所提供,专人操作.ET试剂盆批内变异系数<10 %,批间变异系数<15 %.CGRP试剂盆批内变异系数<7 %,批间变异系数<12%.
统计学处理 数据以均数±标准差(c±S)表示，两组均数比较用t检验,相关分析采用线性相关分析.所有统计资料采用SPSS/PC10.0统计软件进行处理.
2 结果
, 百拇医药
2.1 PU组ET、CGRP结果 Hp阳性PU组血清ET高于Hp阴性PU组，而CGRP低于Hp阴性PU组,差异非常显著.
表1 PU患者Hp阳性组与阴性组血清ET、CGRP含量比较(ng·L-1)
Hp(+)与Hp(-)比较：aP < 0.01, bP < 0.01
, 百拇医药
2.2 Hp阳性的GU和DU血清 ET、CGRP的结果 Hp阳性GU血清ET高于Hp阳性DU组，而CGRP低于Hp阳性DU组,但差异无显著性.
表2 Hp阳性PU组中GU与DU血清ET、CGRP含量比较(ng·L-1)
GU与DU比较：P >0.05
, 百拇医药
2.3 相关分析 Hp阳性PU血清ET、CGRP间呈显著性负相关；Hp阴性PU血清ET、CGRP间无相关性.
表3 各组血清ET、CGRP相关分析
3 讨论ET是已知最强的缩血管物质.研究表明胃肠黏膜上皮可产生ET，内源性ET释放增加，可引起胃黏膜血流量减少，破坏黏膜屏障，是胃黏膜损伤的一个始动或促进因子[1].外原性ET能介导大鼠胃黏膜损伤和增加乙醇对胃黏膜损伤易感性[2].胃和十二指肠含有丰富的CGRP神经纤维，实验证明80 %胃传入神经元含CGRP[3].CGRP是目前已知最强的扩血管物质,直接皮下或动脉注射CGRP可抑制阿司匹林、酒精诱发的胃黏膜损伤，也可预防动脉周围注射缩血管物质引起的胃黏膜出血与血管损伤[4] .Tani et al [5]研究认为人胃黏膜可见大量CGRP免疫阳性，推测CGRP参与了胃溃疡黏膜修复.当出现内源性或外源性损伤因子的作用时，感觉神经通过释放CGRP，增加胃黏膜血流量，起到保护胃黏膜作用[6]，ET、CGRP在调节GMBF及保持胃黏膜完整性方面具有拮抗作用.
, http://www.100md.com
Hp定植于胃黏液与上皮细胞之间可产生有毒性作用的酶、细胞毒素，诱导免疫反应，刺激细胞因子释放等，造成黏膜损害，刺激上皮细胞产生大量ET从而引起血管收缩，使黏膜缺血、缺氧和酸中毒，而内皮细胞对缺血、缺氧十分敏感，会进一步释放ET，形成恶性循环.同时 Hp感染可能通过抑制感觉神经而减少CGRP释放[7、8] .由于ET释放增加，CGIRP释放减少，导致胃黏膜血流下降，造成胃黏膜损伤.此外，不论外源性还是内源性的CGRP均可通过胃窦内分泌细胞，刺激生长抑素及抑制胃泌素分泌而参与胃酸的调节[9].由于CGRP减少，这种反馈抑制胃酸的调节作用削弱，会使得胃酸分泌增加.因此，Hp感染不仅会破坏黏膜屏障，还会增加黏膜酸负荷.本研究结果表明，Hp阳性组血清ET水平升高，CGRP水平下降，与Hp阴性组比较差异有非常显著意义(P <0.01).Hp阳性GU患者血清ET高于，CGRP低于Hp阳性 DU患者，但差异无显著意义(P >0.05).这说明不论GU或DU患者Hp感染可能会导致ET释放增加，抑制CGRP释放.提示内源性保护因子减弱，而攻击因子增强.
, 百拇医药
表3的结果表明,Hp阴性组血清ET与CGRP的相关系数r =-0.247，P =0.274，两者无相关性.Hp阳性组血清ET与CGRP的相关系数r =-0.330，P =0.003，呈显著性负相关.这说明Hp相关性PU患者ET、CGRP在调节胃黏膜血流量及保持胃黏膜完整性方面的拮抗作用失调.Hp感染刺激ET释放，这时CGRP不仅不能保护性地释放增加，反而可能被抑制.推测ET/CGRP失衡参与PU发生的病理生理过程，是Hp相关性PU发病机制之一.这为PU的防治提供了新的理论依据，ET拮抗剂或CGRP类似物可能成为新一类抗溃疡药物.
4 参考文献1 齐爱东，吴葆杰，周序斌.内皮素的研究进展.生理学进展 1992;23:46?9
2 Wallace JL, Cirino G ,De Nucci G ,McKnight W, MacNaughton WK.Endothelin has potent ulcerogenic and
, http://www.100md.com
vasoconstrictorac-tion in the stomach.Am J Physiol 1989;256:661-666
3 周吕.肠神经系统脑肠肽.中华消化杂志 1996;16:287-289
4 Li DS, Raybould HE,Quintero E, Guth PH. Calcitonin gene-related peptide mediatesthe gastric hyperemic response
to acid back-diffusion.Gastroenterology 1992;102:1124-1128
5 Tani N, Miyazawa M, Miwa T, Shibata M, Yamaura T. Immunohistochemical localization of calcitonin gene-related
, http://www.100md.com
peptide in the human gastric mucosa. Digestion 1999;60:338-343
6 刘民生.感觉神经在胃粘膜保护中的作用.国外医学·消化系统疾病分册 1997;17:73?4
7 阳惠湘,邹益友，张熙纯，王德良，李学文.幽门螺杆菌感染的十二指肠溃疡患者血清CGRP的测定.
湖南医科报 1999;24:273?74
8 孟立娜，朱林喜，何学敏，项伯康.消化性溃疡与血浆ET、CGRP关系探讨.浙江医学 1999;21:528?29
9 Manela FD, Ren J, Gao J, McGuigan JE, Harty RF. Calcitonin gene-related peptide modulates acid-mediated
regulation of somatostatin and gastrin release from rat antrum.Gastroenterology 1995;109:701-06, http://www.100md.com(陈朝元,王 岩)
项目负责人 陈朝元,350004,福建省福州市817中路602号,福建中医学院附属人民医院消化内科. ccycz@yahoo.com.cn
电话:0591-3258135-272
收稿日期 2002-07-26 接受日期 2002-08-07
摘要
目的:观察幽门螺杆菌(Hp)相关性消化性溃疡(PU)患者血清内皮素、降钙素基因相关肽的变化，探讨其临床意义.
方法:对100例PU患者进行Hp和血清内皮素、降钙素基因相关肽检测，并分析其相互关系.
, 百拇医药
结果:Hp阳性PU组血清ET高于Hp阴性组，而CGRP低于Hp阴性组(P <0.01) ;Hp阳性PU患者血清ET与CGRP的相关系数r =-0.222,P =0.027,呈显著负相关.
结论:Hp感染可能导致ET释放增加，抑制CGRP释放.推测ET/CGRP失衡参与PU发生的病理生理过程,是Hp相关性PU发病机制之一.
陈朝元,王岩. 幽门螺杆菌相关性消化性溃疡血清内皮素、降钙素基因相关肽的变化及意义.世界华人消化杂志
2002;10(11):1349-1450
0 引言幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)是消化性溃疡(PU)的重要病因之一.胃溃疡(GU)患者Hp感染率为80-90 %,十二指肠溃疡(DU)患者Hp感染率90-100 %.但其致病机制目前尚不十分清楚，可能是多种途径的综合作用的结果.内皮素(endothelin，ET)，降钙素基因相关肽(CGRP)是一对具有拮抗作用的血管活性肽，参与胃黏膜血流的调节.其间的平衡失调是影响胃黏膜屏障的重要内在因素之一.本研究旨在观察Hp相关性PU患者血清ET、CGRP水平的变化，以探讨其可能的临床意义.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 2001年间因上腹疼痛的门诊或住院病例,经电子胃镜确诊的100例活动性PU (连续性病例),男71例,女29例，平均(36.37±8.21)岁.为排除其他影响血清ET、CGRP水平检测的因素，纳入对象的年龄必须< 45岁，同时排除心、脑、肺、肝、肾等重要器官疾病.根据Hp的感染情况分为二组:(1)Hp阳性组78例,男53例,女25例,平均年龄(34.68±11.2)岁.其中GU26例，DU52例.(2)Hp阴性组22例，男14例，女8例，平均年龄(37.28±10.67)岁.其中GU9例，DU13例.
1.2 方法
1.2.1 Hp检测及判断 胃镜下，在胃窦部距幽门5 cm范围内小弯侧取2块黏膜标本，分别进行快速尿素酶试验和组织学检查(WS染色).两项中有一项阳性者即为Hp阳性，两项均阴性者即为Hp阴性.
, 百拇医药
1.2.2 ET、CGRP检测 所有受试对象均于清晨8时前抽空腹静脉血5ml，加抗凝剂.置于含10 %EDTA二钠30 ul和抑肽酶40 ul试管中混匀.4 ℃ 3 000 r/min离心10 min,分离血浆分装2份,-30 ℃保存待测.测定前，样本置于室温或冷水中复融混匀,再次4 ℃ 3 000 r/min离心10 min,取上清液用放射免疫法测定.试剂盒及测定方法由北京东亚免疫技术研究所提供,专人操作.ET试剂盆批内变异系数<10 %,批间变异系数<15 %.CGRP试剂盆批内变异系数<7 %,批间变异系数<12%.
统计学处理 数据以均数±标准差(c±S)表示，两组均数比较用t检验,相关分析采用线性相关分析.所有统计资料采用SPSS/PC10.0统计软件进行处理.
2 结果
, 百拇医药
2.1 PU组ET、CGRP结果 Hp阳性PU组血清ET高于Hp阴性PU组，而CGRP低于Hp阴性PU组,差异非常显著.
表1 PU患者Hp阳性组与阴性组血清ET、CGRP含量比较(ng·L-1)
| n | ET | CGRP | |
| Hp(+) | 78 | 67.27±9.28 | 28.52±9.44 |
| Hp(-) | 22 | 61.47±6.90a | 33.72±3.78b |
Hp(+)与Hp(-)比较：aP < 0.01, bP < 0.01
, 百拇医药
2.2 Hp阳性的GU和DU血清 ET、CGRP的结果 Hp阳性GU血清ET高于Hp阳性DU组，而CGRP低于Hp阳性DU组,但差异无显著性.
表2 Hp阳性PU组中GU与DU血清ET、CGRP含量比较(ng·L-1)
| n | ET | CGRP | |
| Hp(+)GU | 26 | 67.02±8.99 | 33.80±3.56 |
| Hp(+)DU | 52 | 63.52±10.18 | 31.58±6.90 |
GU与DU比较：P >0.05
, 百拇医药
2.3 相关分析 Hp阳性PU血清ET、CGRP间呈显著性负相关；Hp阴性PU血清ET、CGRP间无相关性.
表3 各组血清ET、CGRP相关分析
| df | r | p | |
| Hp(+) | 76 | -0.330 | 0.003 |
| Hp(-) | 20 | -0.244 | 0.274 |
3 讨论ET是已知最强的缩血管物质.研究表明胃肠黏膜上皮可产生ET，内源性ET释放增加，可引起胃黏膜血流量减少，破坏黏膜屏障，是胃黏膜损伤的一个始动或促进因子[1].外原性ET能介导大鼠胃黏膜损伤和增加乙醇对胃黏膜损伤易感性[2].胃和十二指肠含有丰富的CGRP神经纤维，实验证明80 %胃传入神经元含CGRP[3].CGRP是目前已知最强的扩血管物质,直接皮下或动脉注射CGRP可抑制阿司匹林、酒精诱发的胃黏膜损伤，也可预防动脉周围注射缩血管物质引起的胃黏膜出血与血管损伤[4] .Tani et al [5]研究认为人胃黏膜可见大量CGRP免疫阳性，推测CGRP参与了胃溃疡黏膜修复.当出现内源性或外源性损伤因子的作用时，感觉神经通过释放CGRP，增加胃黏膜血流量，起到保护胃黏膜作用[6]，ET、CGRP在调节GMBF及保持胃黏膜完整性方面具有拮抗作用.
, http://www.100md.com
Hp定植于胃黏液与上皮细胞之间可产生有毒性作用的酶、细胞毒素，诱导免疫反应，刺激细胞因子释放等，造成黏膜损害，刺激上皮细胞产生大量ET从而引起血管收缩，使黏膜缺血、缺氧和酸中毒，而内皮细胞对缺血、缺氧十分敏感，会进一步释放ET，形成恶性循环.同时 Hp感染可能通过抑制感觉神经而减少CGRP释放[7、8] .由于ET释放增加，CGIRP释放减少，导致胃黏膜血流下降，造成胃黏膜损伤.此外，不论外源性还是内源性的CGRP均可通过胃窦内分泌细胞，刺激生长抑素及抑制胃泌素分泌而参与胃酸的调节[9].由于CGRP减少，这种反馈抑制胃酸的调节作用削弱，会使得胃酸分泌增加.因此，Hp感染不仅会破坏黏膜屏障，还会增加黏膜酸负荷.本研究结果表明，Hp阳性组血清ET水平升高，CGRP水平下降，与Hp阴性组比较差异有非常显著意义(P <0.01).Hp阳性GU患者血清ET高于，CGRP低于Hp阳性 DU患者，但差异无显著意义(P >0.05).这说明不论GU或DU患者Hp感染可能会导致ET释放增加，抑制CGRP释放.提示内源性保护因子减弱，而攻击因子增强.
, 百拇医药
表3的结果表明,Hp阴性组血清ET与CGRP的相关系数r =-0.247，P =0.274，两者无相关性.Hp阳性组血清ET与CGRP的相关系数r =-0.330，P =0.003，呈显著性负相关.这说明Hp相关性PU患者ET、CGRP在调节胃黏膜血流量及保持胃黏膜完整性方面的拮抗作用失调.Hp感染刺激ET释放，这时CGRP不仅不能保护性地释放增加，反而可能被抑制.推测ET/CGRP失衡参与PU发生的病理生理过程，是Hp相关性PU发病机制之一.这为PU的防治提供了新的理论依据，ET拮抗剂或CGRP类似物可能成为新一类抗溃疡药物.
4 参考文献1 齐爱东，吴葆杰，周序斌.内皮素的研究进展.生理学进展 1992;23:46?9
2 Wallace JL, Cirino G ,De Nucci G ,McKnight W, MacNaughton WK.Endothelin has potent ulcerogenic and
, http://www.100md.com
vasoconstrictorac-tion in the stomach.Am J Physiol 1989;256:661-666
3 周吕.肠神经系统脑肠肽.中华消化杂志 1996;16:287-289
4 Li DS, Raybould HE,Quintero E, Guth PH. Calcitonin gene-related peptide mediatesthe gastric hyperemic response
to acid back-diffusion.Gastroenterology 1992;102:1124-1128
5 Tani N, Miyazawa M, Miwa T, Shibata M, Yamaura T. Immunohistochemical localization of calcitonin gene-related
, http://www.100md.com
peptide in the human gastric mucosa. Digestion 1999;60:338-343
6 刘民生.感觉神经在胃粘膜保护中的作用.国外医学·消化系统疾病分册 1997;17:73?4
7 阳惠湘,邹益友，张熙纯，王德良，李学文.幽门螺杆菌感染的十二指肠溃疡患者血清CGRP的测定.
湖南医科报 1999;24:273?74
8 孟立娜，朱林喜，何学敏，项伯康.消化性溃疡与血浆ET、CGRP关系探讨.浙江医学 1999;21:528?29
9 Manela FD, Ren J, Gao J, McGuigan JE, Harty RF. Calcitonin gene-related peptide modulates acid-mediated
regulation of somatostatin and gastrin release from rat antrum.Gastroenterology 1995;109:701-06, http://www.100md.com(陈朝元,王 岩)
