角质细胞生长因子-2的发酵及纯化工艺研究
角质细胞生长因子-2(KGF-2),又名成纤维细胞生长因子-10(FGF-10),是近年新发现的细胞因子。它能作用于上皮细胞的FGFR-2b,对烧伤、溃疡、切割伤的修复再生比其他生长因子有更显著的作用。它还对体外培养的人角膜上皮细胞有明显的促生长作用,能提高辐射后小鼠肠干细胞的存活率,并对辐射引起气道上皮细胞的通透性升高具有拮抗作用,加速辐射诱导的DNA损伤的修复,有希望成为临床上多功能的生物制剂。目前国外关于重组人KGF-2(rhKGF-2)的文献多为其性质和结构的研究,未见有关提纯工艺的全面探讨,国内也未见相关报道。我们在成功表达rhKGF-2工程菌的基础上,探索和优化rhKGF-2工程菌的高密度发酵工艺,建立合理的纯化工艺,获得稳定的高活性rhKGF-2蛋白纯品,为rhKGF-2的大批量生产提供实验依据,为进一步研究其生物学活性提供物质基础。|, http://www.100md.com
方法:通过增加培养营养成分,发酵过程补加葡萄糖,获得高产率菌体。细菌裂解液经硫酸铵沉淀、分子筛、肝素亲和色谱和离子交换色谱等方法进行纯化,进行电泳分析。结果:每1升发酵液可获得菌体12.2克,表达率为28.7%。纯化后rhKGF-2纯度达97%。结论:rhKGF-2工程菌可获得高密度发酵。纯化工艺适用于rhKGF-2的大量制备。|, http://www.100md.com
摘自《中国生化药物杂志》2002年第23卷第5期(《中国生化药物杂志》 )
方法:通过增加培养营养成分,发酵过程补加葡萄糖,获得高产率菌体。细菌裂解液经硫酸铵沉淀、分子筛、肝素亲和色谱和离子交换色谱等方法进行纯化,进行电泳分析。结果:每1升发酵液可获得菌体12.2克,表达率为28.7%。纯化后rhKGF-2纯度达97%。结论:rhKGF-2工程菌可获得高密度发酵。纯化工艺适用于rhKGF-2的大量制备。|, http://www.100md.com
摘自《中国生化药物杂志》2002年第23卷第5期(《中国生化药物杂志》 )