60000联单SSA抗原的提取及纯化
SSA抗原主要有60000和52000两种，对其与某些特异性临床表现及疾病发病机制关系的研究日益受到重视。目前国内多以人脾及兔胸腺中提取的ENA粗抗原，采用免疫扩散(ID)和免疫印迹(IBT)的方法用诹俅布煅镾SA抗原，而后者缺乏60000SSA，有时造成漏诊。因此，中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院探讨了如何建立用于临床检验及研究的SSA60000抗原的提取及纯化方法。该实验利用牛脾组织提取粗抗原，采用阴离子交换层析法(IEC)进行初纯化，再分别以分子筛及亲和层析法进一步提纯，并利用对流免疫电泳(CIE)、免疫扩散(ID)及免疫印迹(IBT)法检测各纯化阶段提取液中的60000SSA抗原。结果：IEC(DE52)初步提纯SSA抗原效佳。分子筛方法(SephadexG-100)作为SSA抗原的进一步提纯方法不理想，杂蛋白存留较多，但可作为用于分析目的的初纯化方法。亲和层析方法可进一步纯化出60000SSA抗原。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)转膜后氨基黑染色见只有一条条带位于67000～43000。进一步行IBT证实其为60000SSA抗原。实验结果表明，利用牛脾粗抗原经IEC、亲和层析的方法提纯60000SSA抗原操作简便，纯化效果好，价格不高，能够成功地制备60000SSA抗原，为开展60000SSA抗原在疾病中作用的研究创造了条件。h%tj, 百拇医药
摘自《中华风湿病学杂志》2003年第7卷第1期(《中华风湿病学杂志》 )
摘自《中华风湿病学杂志》2003年第7卷第1期(《中华风湿病学杂志》 )