不同胚龄人神经干细胞的分离和培养
哺乳动物胚胎阶段和成年动物的特定脑区存在神经干细胞得到不断证实,但对人类神经干细胞的研究尚少。江苏省无锡市第三人民医院神经外科等单位的科研人员从7周人胚前脑和13周人胚大脑皮层中分离和培养出具有自我更新和多分化潜能的神经干细胞,并对两个胚龄的神经干细胞在不同培养方法中的生长特性做了初步的比较,以探索不同胚龄入神经干细胞分离和培养的适宜条件。方法:取7周自然流产和13周水囊引产的人胚胎,无菌条件下分离出胚胎前脑和大脑皮层组织,制成单细胞悬液,加入DMEM/F12(1:1,GibcoBRL)无血清培养基。培养方法分为悬浮细胞培养法和贴壁细胞培养法。待原代细胞培养出现大量悬浮克隆球后进行传代培养。根据克隆球生长情况,7~10天传代1次,方法同前。再进行单细胞克隆。将来自单细胞的克隆球进行分化培养。最后进行免疫荧光法检测。结果:从两个不同胚龄的人胚脑中分离出具有自我更新和多分化潜能的神经干细胞,未包被组7周的人胚脑除高密度悬浮培养法生长不良,其他密度及培养法均有克隆球形成;13周的人胚脑仅中等密度悬浮培养法及高密度贴壁培养法有克隆球形成;包被组各种密度培养均生长不良。., http://www.100md.com
结论:人胚脑中存在具有自我更新能力和多分化潜能的神经干细胞,随着胚龄增大,培养难度逐渐加大,高密度贴壁培养法适宜各胚龄神经干细胞的分离培养。., http://www.100md.com
摘自《中华器官移植杂志》2003年第24卷第2期(《中华器官移植杂志》 )
结论:人胚脑中存在具有自我更新能力和多分化潜能的神经干细胞,随着胚龄增大,培养难度逐渐加大,高密度贴壁培养法适宜各胚龄神经干细胞的分离培养。., http://www.100md.com
摘自《中华器官移植杂志》2003年第24卷第2期(《中华器官移植杂志》 )