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编号:10692140
肝脏胶原蛋白检测进展与评析
http://www.100md.com 2003年6月15日 《世界华人消化杂志》 2003年第6期
刘成海,项目负责人,:,摘要,0,引言,1肝脏胶原的种类与结构特征,2肝组织羟脯氨酸含量测定法,3同位素标记脯氨酸掺入与胶原酶消化法测定胶原生成率,3.1[3H]Pro掺入,3.2胶原酶消化与测定,4专一抗体结合、免疫反应法测定不同类型胶原含量,4.1免疫印迹法,(wes
     刘成海,上海中医药大学肝病研究所上海市曙光医院 上海市 200032

    刘成海博士,上海中医药大学肝病研究所暨上海市曙光医院研究员.主要从事肝纤维化的基础与临床研究,第一与通讯作者发表论文

    29篇,出版专著7本,获得奖励5次.

    项目负责人:刘成海,200032,上海市零陵路530号,上海中医药大学肝病研究所上海市曙光医院. chenghailiu@hotmail.com

    电话:021-54231109 传真:021-64036889

    收稿日期:2002-09-20 接受日期:2002-11-29

    摘要胶原含量多少可以直接反映肝脏纤维化程度之轻重,胶原蛋白含量测定在肝纤维化机制与药理研究中极其重要,往往是结果分析的“终点指标”.综述肝脏胶原蛋白的生化与病理检测方法,结合个人实践体会,分析其各种不同方法的特点及适应范围.认为肝组织胶原蛋白以羟脯氨酸含量检测可靠,培养细胞总胶原分泌宜采用同位素掺入与胶原酶消化的方法,各型胶原分泌量可采用ELISA法,各型胶原沉积量可采用Westernblot法. 肝组织与培养细胞胶原病理染色,主要用于胶原蛋白定性分析与表达位置检测,正确应用图像分析可半定量.

    刘成海.肝脏胶原蛋白检测进展与评析.世界华人消化杂志 2003;11(6):689-692

    0 引言胶原是细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)的主要蛋白质成分,约占机体总蛋白的25%[1].多细胞器官中的多数细胞均与ECM大分子密切联系,ECM不仅为细胞提供结构支架,而且也是重要的信号调节分子,能调控细胞的生长、代谢与分化.肝脏中胶原含量丰富,对肝细胞的分化、肝小叶结构与功能的维持等有重要影响.慢性肝炎、肝硬化等慢性肝病均存在着以胶原为主的ECM增生沉积的病理变化,即肝纤维化.研究表明[2],肝星状细胞(hepaticstellate cell,HSC)在肝损伤后,活化为“肌成纤维样细胞(myofibroblastlike cell, MFB)”,大量合成与分泌间质性胶原等ECM,是肝纤维化的细胞学基础.肝纤维化时,胶原等ECM成分的数量与分布位置均发生改变,表现为数量增加3-5倍,内皮下间隙(狄氏间隙)胞外基质成分从正常的低密度基底膜样基质向以纤维胶原为主的间质性胶原转变.这种胶原的数量与分布的改变,明显影响肝脏的结构与功能.因此 ......

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